RSK抑制剂的结晶形式的制作方法

rsk抑制剂的结晶形式
交叉引用
1.本技术要求2019年2月11日提交的第62/804,076号美国临时申请的权益，该美国临时申请通过引用整体并入本文。


背景技术：

2.p90核糖体s6激酶(rsk)家族由四种同种型——rsk1、rsk2、rsk3和rsk4组成。这些同种型对于从细胞表面受体如生长因子、激素和细胞因子传递细胞信号是关键的。rsk1和rsk2是癌症中最常见的同种型，它们在癌症中控制细胞生长、侵袭和凋亡抑制。rsk3通常不在癌症中表达，然而，它与rsk1和rsk2一样与抗药性有关。rsk4通常不在癌症中表达。rsk家族对于炎症、糖尿病和心脏病也很重要。
3.在肿瘤学领域，rsk抑制剂为靶向治疗提供了改善癌症治疗的机会。抑制rsk还提供了通过多种机制克服抗药性的机会，这些机制包括消除癌症干细胞(csc)或肿瘤起始细胞(tic)。据报道，rsk抑制剂可以克服对诸如赫赛汀(herceptin)、吉非替尼(gefitinib)和恩杂鲁胺(enzalutamide)等靶向治疗的抗性。rsk抑制剂还可用来增强对微管细胞毒素如紫杉醇的抗性。
4.有许多类型的与rsk活性相关的癌症，包括但不限于乳腺癌、前列腺癌、肺癌、脑癌、血癌、皮肤癌、骨癌和卵巢癌。在乳腺癌和前列腺癌研究领域，已证明rsk抑制剂可阻断激素信号传导。与许多类型的癌症一样，在乳腺中出现的癌症在遗传学上是多样性的，因此已被分为三种主要类型：1型，其为激素阳性，表达雌激素和孕酮受体(分别为er和pr)；2型，其为her
‑
2阳性；和3型，其为三阴性，因为癌细胞缺乏er、pr和her
‑
2受体。三阴性乳腺癌(tnbc)目前被认为是最具侵袭性的，并且与患者的最差结局相关。它占所有乳腺癌的15
‑
25％，在较年轻的女性中更常见。在乳腺癌易感基因1和2(brca1和brca2)中具有突变的女性相比其他类型的乳腺癌更可能发生tnbc。
5.因此，需要rsk的小分子抑制剂，其可用于治疗与rsk活性相关的疾病和病况，如癌症。


技术实现要素：

6.(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐是一种rsk抑制剂。在一方面，本文描述了(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物。
[0007]
在一个实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式是具有至少一种以下性质的晶形1：
(a)与图1所示的基本相同的x射线粉末衍射(xrpd)图；(b)在9.6
°2‑
θ、16.2
°2‑
θ、18.2
°2‑
θ、21.2
°2‑
θ、22.0
°2‑
θ和24.8
°2‑
θ处具有特征峰的x射线粉末衍射(xrpd)图；(c)与图2所示的基本相似的热重分析(tga)；(d)与图3所示的基本相似的dsc热谱图；(e)具有在约171℃处开始的吸热的dsc热谱图；(f)一水合物；或(g)其组合。
[0008]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式的x射线粉末衍射(xrpd)图与图1所示的基本相同。
[0009]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式的x射线粉末衍射(xrpd)图在9.6
°2‑
θ、16.2
°2‑
θ、18.2
°2‑
θ、21.2
°2‑
θ、22.0
°2‑
θ和24.8
°2‑
θ处具有特征峰。
[0010]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式的热重分析(tga)与图2所示的基本相似。
[0011]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式的dsc热谱图与图3所示的基本相似。
[0012]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式的dsc热谱图具有在约171℃处开始的吸热。
[0013]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式是一水合物。
[0014]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式的特征在于具有以下性质：(a)与图1所示的基本相同的x射线粉末衍射(xrpd)图；(b)在9.6
°2‑
θ、16.2
°2‑
θ、18.2
°2‑
θ、21.2
°2‑
θ、22.0
°2‑
θ和24.8
°2‑
θ处具有特征峰的x射线粉末衍射(xrpd)图；(c)与图2所示的基本相似的热重分析(tga)；(d)与图3所示的基本相似的dsc热谱图；(e)具有在约171℃处开始的吸热的dsc热谱图；和(f)一水合物。
[0015]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式从甲醇/水或醇/水获得。
[0016]
在另一个实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或
其溶剂化物，其中所述(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式是具有至少一种以下性质的晶形2：(a)与图4所示的基本相同的x射线粉末衍射(xrpd)图；(b)在10.4
°2‑
θ、15.1
°2‑
θ、18.0
°2‑
θ、19.5
°2‑
θ、25.4
°2‑
θ和26.8
°2‑
θ处具有特征峰的x射线粉末衍射(xrpd)图；(c)与图5所示的基本相似的热重分析(tga)；(d)与图6所示的基本相似的dsc热谱图；(e)具有在约230℃处开始的吸热的dsc热谱图；或(f)其组合。
[0017]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式的x射线粉末衍射(xrpd)图与图4所示的基本相同。
[0018]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式的x射线粉末衍射(xrpd)图在10.4
°2‑
θ、15.1
°2‑
θ、18.0
°2‑
θ、19.5
°2‑
θ、25.4
°2‑
θ和26.8
°2‑
θ处具有特征峰。
[0019]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式的热重分析(tga)与图5所示的基本相似。
[0020]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式的dsc热谱图与图6所示的基本相似。
[0021]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式的dsc热谱图具有在约230℃处开始的吸热。
[0022]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式的特征在于具有以下性质：(a)与图4所示的基本相同的x射线粉末衍射(xrpd)图；(b)在10.4
°2‑
θ、15.1
°2‑
θ、18.0
°2‑
θ、19.5
°2‑
θ、25.4
°2‑
θ和26.8
°2‑
θ处具有特征峰的x射线粉末衍射(xrpd)图；(c)与图5所示的基本相似的热重分析(tga)；(d)与图6所示的基本相似的dsc热谱图；和(e)具有在约230℃处开始的吸热的dsc热谱图。
[0023]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其中所述结晶形式从乙腈、甲醇、乙醇、甲基乙基酮、1,4
‑
二氧杂环己烷、1
‑
丙醇、2
‑
丙醇或二甲基甲酰胺获得。
[0024]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，其中所述结晶形式为非溶剂化的。
[0025]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，其用于医药。
[0026]
在一些实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐，其中(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐是无定形的。
[0027]
在另一方面，本文描述了一种药物组合物，其包含(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物，以及至少一种选自药学上可接受的载体、稀释剂和赋形剂的非活性成分。
[0028]
在另一方面是一种治疗哺乳动物中与rsk活性相关的疾病或病况的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物。在一些实施方案中，哺乳动物中的所述与rsk活性相关的疾病或病况是癌症。在一些实施方案中，所述癌症是乳腺癌、前列腺癌、肺癌、脑癌、皮肤癌、骨癌、卵巢癌、多发性骨髓瘤或白血病。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中与rsk活性相关的疾病或病况的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐的结晶形式，或其溶剂化物；进一步包括施用第二治疗剂。在一些实施方案中，所述第二治疗剂是化疗剂、激素治疗剂或免疫治疗剂。在一些实施方案中，所述第二治疗剂是聚adp
‑
核糖聚合酶(parp)抑制剂、stat 3抑制剂、janus激酶抑制剂或egfr抑制剂。在一些实施方案中，所述第二治疗剂是化疗剂(小分子或抗体)。在一些实施方案中，所述第二治疗剂是紫杉醇。在一些实施方案中，所述第二治疗剂是氨甲蝶呤。在一些实施方案中，所述第二治疗剂是5
‑
氟尿嘧啶。在一些实施方案中，所述第二治疗剂是阿霉素。
[0029]
在一些实施方案中，所述方法进一步包括施用放射疗法。援引并入
[0030]
本说明书中提到的所有出版物、专利和专利申请均以适用和相关的程度通过引用并入本文，并且其引用程度如同特别地且单独地指出每个单独的出版物、专利或专利申请均通过引用而并入。
附图说明
[0031]
图1.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)晶形1的x射线粉末衍射(xrpd)图。
[0032]
图2.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)晶形1的热重分析(tga)热谱图。
[0033]
图3.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)晶形1的差示扫描量热法(dsc)热谱图。
[0034]
图4.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)晶形2的x射线粉末衍射(xrpd)图。
[0035]
图5.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)晶形2的热重分析(tga)热谱图。
[0036]
图6.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)晶形2的差示扫描量热法(dsc)热谱图。
[0037]
图7.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)晶形3的x射线粉末衍射(xrpd)图。
[0038]
图8.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)晶形4的x射线粉末衍射(xrpd)图。
[0039]
图9.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)晶形1的重量测量蒸汽吸附(gvs)分析。
[0040]
图10.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)晶形1在gvs前和gvs后的x射线粉末衍射(xrpd)图。
[0041]
图11.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)晶形2的重量测量蒸汽吸附(gvs)分析。
[0042]
图12.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)晶形2在gvs前和gvs后的x射线粉末衍射(xrpd)图。
[0043]
图13.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺二盐酸盐(化合物2)晶形1的x射线粉末衍射(xrpd)图。
[0044]
图14.示出了结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺游离碱(化合物3)晶形1的x射线粉末衍射(xrpd)图。
具体实施方式
[0045]
(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并
[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐是一种rsk抑制剂。本文描述了(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)、(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺二盐酸盐(化合物2)和(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺游离碱(化合物3)的结晶形式。化合物1
[0046]
在一个实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐(化合物1)。“化合物1”或“(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3’,2’:4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺盐酸盐”是指具有以下结构的化合物：化合物2
[0047]
在另一个实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺二盐酸盐(化合物2)。“化合物2”或“(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3’,2’:4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺二盐酸盐”是指具有以下结构的化合物：化合物3
[0048]
在另一个实施方案中是(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺游离碱(化合物3)。“化合物3”或“(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3’,2’:4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺游离碱”是指具有以下结构的化合物：
[0049]
在一些实施方案中，化合物1包括溶剂加成形式(溶剂化物)。在一些实施方案中，化合物2包括溶剂加成形式(溶剂化物)。在一些实施方案中，化合物3包括溶剂加成形式(溶剂化物)。
[0050]
溶剂化物含有化学计量的或非化学计量的量的溶剂，并且在产物形成或分离过程中与药学上可接受的溶剂形成，该溶剂例如是水、乙醇、甲醇、叔丁基甲基醚(mtbe)、二异丙醚(dipe)、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、异丙醇、甲基异丁基酮(mibk)、甲基乙基酮(mek)、丙酮、
硝基甲烷、四氢呋喃(thf)、二氯甲烷(dcm)、二氧杂环己烷、庚烷、甲苯、苯甲醚、乙腈等。在一些实施方案中，溶剂化物使用但不限于使用第三类溶剂形成。在一些实施方案中，溶剂化物使用但不限于使用第二类溶剂形成。溶剂的类别例如在国际人用药物注册技术要求协调会议(ich),“impurities:guidelines for residual solvents,q3c(r6),(2016年10月)中定义。当溶剂为水时形成水合物，或者当溶剂为醇时形成醇化物。
[0051]
在其他实施方案中，化合物1被制备成多种形式，包括但不限于无定形相、结晶形式、磨碎形式和纳米颗粒形式。在其他实施方案中，化合物2被制备成多种形式，包括但不限于无定形相、结晶形式、磨碎形式和纳米颗粒形式。在其他实施方案中，化合物3被制备成多种形式，包括但不限于无定形相、结晶形式、磨碎形式和纳米颗粒形式。
[0052]
虽然不打算受任何特定理论的束缚，但某些固体形式的特征在于适用于药物剂型和治疗剂型的物理性质，例如稳定性、溶解性和溶出速率。此外，虽然不希望受任何特定理论的束缚，但某些固体形式的特征在于影响特定过程(例如，产生、过滤、洗涤、干燥、研磨、混合、压片、流动性、溶出、配制和冻干)的物理性质(例如，密度、可压缩性、硬度、形态、裂解、粘性、溶解性、水吸收、电学性质、热行为、固态反应性、物理稳定性和化学稳定性)，这使某些固体形式适合于制备固体剂型。此类性质可以使用特定的分析化学技术来确定，包括固态分析技术(例如，x射线衍射、显微术、光谱学和热分析)，如本文所述。结晶形式
[0053]
考虑到固体形式的变化可影响多种物理和化学性质，药物化合物的固体形式的鉴定和选择是复杂的，这可在加工、配制、稳定性、生物利用度、储存和处理(例如，运输)以及其他重要的药物特性方面提供优点或缺点。有用的药物固体包括结晶固体和无定形固体，具体取决于产品及其给药方式。无定形固体的特征在于缺乏长程结构有序性，而结晶固体的特征在于结构周期性。理想的药物固体类别取决于具体的应用；有时基于例如增强的溶出曲线来选择无定形固体，而对于诸如物理或化学稳定性等性质，结晶固体可能是理想的。
[0054]
药物化合物的结晶固体形式或无定形固体形式均包括单组分固体和多组分固体。单组分固体基本上由药物化合物或活性成分组成，而不存在其他化合物。单组分结晶材料之间的差异可能是由同质多晶现象引起的，其中特定的药物化合物存在多个三维排列。
[0055]
值得注意的是，不可能先验地预测化合物是否存在结晶形式，更不用说如何成功地制备它们(参见，例如，braga和grepioni,2005,“making crystals from crystals:a green route to crystal engineering and polymorphism,”chem.commun.:3635
‑
3645(就晶体工程而言，如果说明不够精确和/或其他外部因素影响了该过程，则结果可能无法预测)；jones等人,2006,pharmaceutical cocrystals:an emerging approach to physical property enhancement,”mrs bulletin 31:875
‑
879(目前，即使是最简单的分子，通常也无法通过计算预测出可观察到的多晶型物的数目)；price,2004,“the computational prediction of pharmaceutical crystal structures and polymorphism,”advanced drug delivery reviews 56:301
‑
319(“price”)；和bernstein,2004,“crystal structure prediction and polymorphism,”aca transactions 39:14
‑
23(仍需要了解和完成很多才能以任何置信度宣称预测晶体结构的能力，更不用说多晶形式))。
[0056]
对于给定的药物化合物，多种可能的固体形式会在物理和化学性质上产生潜在的
多样性。固体形式的发现和选择在开发有效、稳定和可销售的药物产品中非常重要。结晶化合物1，晶形1
[0057]
在一些实施方案中，化合物1是结晶的。在一些实施方案中，结晶的化合物1是特征在于具有至少一种以下性质的晶形1：(a)与图1所示的基本相同的x射线粉末衍射(xrpd)图；(b)在9.6
°2‑
θ、16.2
°2‑
θ、18.2
°2‑
θ、21.2
°2‑
θ、22.0
°2‑
θ和24.8
°2‑
θ处具有特征峰的x射线粉末衍射(xrpd)图；(c)与图2所示的基本相似的热重分析(tga)；(d)与图3所示的基本相似的dsc热谱图；(e)具有在约171℃处开始的吸热的dsc热谱图；(f)一水合物；或(g)其组合。
[0058]
在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1的特征在于具有至少两种选自(a)至(f)的性质。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1的特征在于具有至少三种选自(a)至(f)的性质。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1的特征在于具有至少四种选自(a)至(f)的性质。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1的特征在于具有至少五种选自(a)至(f)的性质。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1的特征在于具有性质(a)至(f)。
[0059]
在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1的x射线粉末衍射(xrpd)图与图1所示的基本相同。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1的x射线粉末衍射(xrpd)图在9.6
°2‑
θ、16.2
°2‑
θ、18.2
°2‑
θ、21.2
°2‑
θ、22.0
°2‑
θ和24.8
°2‑
θ处具有特征峰。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1的热重分析(tga)热谱图与图2所示的基本相似。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1的dsc热谱图与图3所示的基本相似。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1的dsc热谱图具有在约171℃处开始的吸热。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1是一水合物。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1从甲醇和水的组合(甲醇/水)获得。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1从40％甲醇/60％水溶液获得。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1从95％甲醇/5％水溶液获得。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1为溶剂化的。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形1为非溶剂化的。结晶化合物1，晶形2
[0060]
在一些实施方案中，结晶的化合物1是特征在于具有至少一种以下性质的晶形2：(a)与图4所示的基本相同的x射线粉末衍射(xrpd)图；(b)在10.4
°2‑
θ、15.1
°2‑
θ、18.0
°2‑
θ、19.5
°2‑
θ、25.4
°2‑
θ和26.8
°2‑
θ处具有特征峰的x射线粉末衍射(xrpd)图；(c)与图5所示的基本相似的热重分析(tga)；(d)与图6所示的基本相似的dsc热谱图；(e)具有在约230℃处开始的吸热的dsc热谱图；或(f)其组合。
[0061]
在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2的特征在于具有至少两种选自(a)至(e)的性质。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2的特征在于具有至少三种选自(a)至(e)的性质。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2的特征在于具有至少四种选自(a)至(e)的性质。
在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2的特征在于具有性质(a)至(e)。
[0062]
在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2的x射线粉末衍射(xrpd)图与图4所示的基本相同。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2的x射线粉末衍射(xrpd)图在10.4
°2‑
θ、15.1
°2‑
θ、18.0
°2‑
θ、19.5
°2‑
θ、25.4
°2‑
θ和26.8
°2‑
θ处具有特征峰。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2的热重分析(tga)热谱图与图5所示的基本相似。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2的dsc热谱图与图6所示的基本相似。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2的dsc热谱图具有在约230℃处开始的吸热。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2从乙腈、甲醇、乙醇、甲基乙基酮、1
‑
丙醇、2
‑
丙醇或二甲基甲酰胺获得。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2从乙腈获得。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2从甲醇获得。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2从乙醇获得。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2从甲基乙基酮获得。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2从1
‑
丙醇获得。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2从2
‑
丙醇获得。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2从二甲基甲酰胺获得。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2为溶剂化的。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形2为非溶剂化的。结晶化合物1，晶形3
[0063]
在一些实施方案中，结晶化合物1是晶形3。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形3的x射线粉末衍射(xrpd)图与图7所示的基本相同。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形3的x射线粉末衍射(xrpd)图在9.8
°2‑
θ、14.5
°2‑
θ、16.5
°2‑
θ、19.6
°2‑
θ、20.7
°2‑
θ、21.0
°2‑
θ和24.3
°2‑
θ处具有特征峰。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形3从二甲基亚砜获得。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形3为溶剂化的。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形3为非溶剂化的。结晶化合物1，晶形4
[0064]
在一些实施方案中，结晶化合物1是晶形4。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形4的x射线粉末衍射(xrpd)图与图8所示的基本相同。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形4的x射线粉末衍射(xrpd)图在9.4
°2‑
θ、15.2
°2‑
θ、16.9
°2‑
θ、17.4
°2‑
θ、17.9
°2‑
θ、21.6
°2‑
θ、22.0
°2‑
θ和24.4
°2‑
θ处具有特征峰。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形4通过在160℃下加热化合物1而获得。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形4为溶剂化的。在一些实施方案中，结晶化合物1晶形4为非溶剂化的。结晶化合物2，晶形1
[0065]
在一些实施方案中，化合物2是结晶的。在一些实施方案中，结晶化合物2是晶形1。在一些实施方案中，结晶化合物2晶形1的x射线粉末衍射(xrpd)图与图13所示的基本相同。在一些实施方案中，结晶化合物2晶形1的x射线粉末衍射(xrpd)图在14.3
°2‑
θ、15.7
°2‑
θ、16.2
°2‑
θ、22.2
°2‑
θ、25.7
°2‑
θ和27.0
°2‑
θ处具有特征峰。在一些实施方案中，结晶化合物2晶形1为溶剂化的。在一些实施方案中，结晶化合物2晶形1为非溶剂化的。结晶化合物3，晶形1
[0066]
在一些实施方案中，化合物3是结晶的。在一些实施方案中，结晶化合物3是晶形1。在一些实施方案中，结晶化合物3晶形1的x射线粉末衍射(xrpd)图与图14所示的基本相同。在一些实施方案中，结晶的(r)
‑
n
‑
(1
‑
(4
‑
氨基苄基)
‑
1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑9‑
甲基
‑6‑
氧代
‑
6,7,8,9
‑
四氢吡啶并[3',2':4,5]吡咯并[1,2
‑
a]吡嗪
‑2‑
甲酰胺游离碱的x射线粉末衍射
(xrpd)图在11.4
°2‑
θ、16.5
°2‑
θ、18.3
°2‑
θ、24.9
°2‑
θ和25.0
°2‑
θ处具有特征峰。在一些实施方案中，结晶化合物3晶形1为溶剂化的。在一些实施方案中，结晶化合物3晶形1为非溶剂化的。结晶化合物1的制备
[0067]
在一些实施方案中，如实施例中所概述的那样制备化合物1的结晶形式。应当指出，本文提出的溶剂、温度和其他反应条件可以不同。
[0068]
在某些实施方案中，本文提供了制备化合物1的固体形式的方法，其包括：1)在室温下的第一温度下将化合物1悬浮于溶剂中；2)在72小时内以4小时循环在环境温度与第二温度(例如，约40℃)之间循环化合物1混合物；3)若有沉淀则收集固体，若无沉淀则蒸发溶剂以收集固体；以及4)可选的干燥。在某些实施方案中，本文提供了制备化合物1的固体形式的方法，其包括：1)获得化合物1在溶剂中的饱和溶液；2)向该饱和溶液中加入反溶剂；3)冷却至约2
‑
8℃并在约
‑
20℃下；4)若有沉淀则收集固体，若无沉淀则蒸发溶剂以收集固体；以及5)可选的风干。在某些实施方案中，溶剂与反溶剂的体积比为约1:9。在某些实施方案中，溶剂与反溶剂的体积比为约1:4。在某些实施方案中，溶剂与反溶剂的体积比为约1:2。在某些实施方案中，溶剂与反溶剂的体积比为约1:1。在某些实施方案中，所述制备化合物1的固体形式的方法是反溶剂重结晶实验。
[0069]
在另一个实施方案中，结晶化合物1晶形1是基本上纯的。在某些实施方案中，基本上纯的结晶化合物1晶形1基本上不含其他固体形式，例如无定形固体。在某些实施方案中，基本上纯的结晶化合物1晶形1的纯度不小于约95％、不小于约96％、不小于约97％、不小于约98％、不小于约98.5％、不小于约99％、不小于约99.5％或不小于约99.8％。
[0070]
在另一个实施方案中，结晶化合物1晶形2是基本上纯的。在某些实施方案中，基本上纯的结晶化合物1晶形2基本上不含其他固体形式，例如无定形固体。在某些实施方案中，基本上纯的结晶化合物1晶形2的纯度不小于约95％、不小于约96％、不小于约97％、不小于约98％、不小于约98.5％、不小于约99％、不小于约99.5％或不小于约99.8％。
[0071]
在另一个实施方案中，结晶化合物1晶形3是基本上纯的。在某些实施方案中，基本上纯的结晶化合物1晶形3基本上不含其他固体形式，例如无定形固体。在某些实施方案中，基本上纯的结晶化合物1晶形3的纯度不小于约95％、不小于约96％、不小于约97％、不小于约98％、不小于约98.5％、不小于约99％、不小于约99.5％或不小于约99.8％。合适的溶剂
[0072]
向诸如人的哺乳动物施用的治疗剂必须按照下列法规准则来制备。这类政府监管的准则被称为优质生产规范(gmp)。gmp准则概述了活性治疗剂的可接受的污染水平，例如，在最终产品中的残留溶剂的量。在一些实施方案中，本文公开的溶剂是适合在gmp设施中使用并符合工业安全考虑的那些溶剂。溶剂的类别例如在国际人用药物注册技术要求协调会议(ich),“impurities:guidelines for residual solvents,q3c(r6),(2016年10月)中定义。
[0073]
溶剂分类为三类。第一类溶剂是有毒的并且应当避免。第二类溶剂是在治疗剂的生产过程中限制使用的溶剂。第三类溶剂是对人类健康具有低毒潜力和较低危险性的溶剂。第三类溶剂的数据表明它们在急性或短期研究中具有较低毒性，并且在遗传毒性研究中是阴性的。
[0074]
应当避免的第一类溶剂包括：苯、四氯化碳、1,2
‑
二氯乙烷、1,1
‑
二氯乙烯和1,1,1
‑
三氯乙烷。
[0075]
第二类溶剂的实例是：乙腈、氯苯、氯仿、枯烯、环己烷、1,2
‑
二氯乙烯、二氯甲烷、1,2
‑
二甲氧基乙烷、n,n
‑
二甲基乙酰胺、n,n
‑
二甲基甲酰胺、1,4
‑
二氧杂环己烷、2
‑
乙氧基乙醇、乙二醇、甲酰胺、己烷、甲醇、2
‑
甲氧基乙醇、甲基丁基酮、甲基环己烷、甲基异丁基酮、n
‑
甲基吡咯烷酮、硝基甲烷、吡啶、环丁砜、四氢呋喃、四氢化萘、甲苯、1,1,2
‑
三氯乙烯和二甲苯。
[0076]
具有低毒性的第三类溶剂包括:乙酸、丙酮、苯甲醚、1
‑
丁醇、2
‑
丁醇、乙酸丁酯、叔丁基甲基醚(mtbe)、二甲基亚砜、乙醇、乙酸乙酯、乙醚、甲酸乙酯、甲酸、庚烷、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、3
‑
甲基
‑1‑
丁醇、甲基乙基酮、2
‑
甲基
‑1‑
丙醇、戊烷、1
‑
戊醇、1
‑
丙醇、2
‑
丙醇、乙酸丙酯和三乙胺。
[0077]
在活性药物成分(api)中残留的溶剂源自api的制备。在一些情况下，实际制备技术没有完全除去溶剂。用于合成api的溶剂的适当选择可提高产率或确定诸如晶型、纯度和溶解度等特性。因此，溶剂是合成过程中的关键参数。
[0078]
在一些实施方案中，包含化合物1的组合物包含有机溶剂。在一些实施方案中，包含化合物1的组合物包含残余量的有机溶剂。在一些实施方案中，包含化合物1的组合物包含残余量的第三类溶剂。在一些实施方案中，该有机溶剂是第三类溶剂。在一些实施方案中，该第三类溶剂选自乙酸、丙酮、苯甲醚、1
‑
丁醇、2
‑
丁醇、乙酸丁酯、叔丁基甲基醚(mtbe)、二甲基亚砜、乙醇、乙酸乙酯、乙醚、甲酸乙酯、甲酸、庚烷、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、3
‑
甲基
‑1‑
丁醇、甲基乙基酮、2
‑
甲基
‑1‑
丙醇、戊烷、1
‑
戊醇、1
‑
丙醇、2
‑
丙醇、乙酸丙酯和三乙胺。在一些实施方案中，该第三类溶剂选自丙酮、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、叔丁基甲基醚、庚烷、异丙醇和乙醇。
[0079]
在一些实施方案中，包含化合物1、2或3的组合物包含残余量的第二类溶剂。在一些实施方案中，该有机溶剂是第二类溶剂。在一些实施方案中，该第二类溶剂选自乙腈、氯苯、氯仿、枯烯、环己烷、1,2
‑
二氯乙烯、二氯甲烷、1,2
‑
二甲氧基乙烷、n,n
‑
二甲基乙酰胺、n,n
‑
二甲基甲酰胺、1,4
‑
二氧杂环己烷、2
‑
乙氧基乙醇、乙二醇、甲酰胺、己烷、甲醇、2
‑
甲氧基乙醇、甲基丁基酮、甲基环己烷、甲基异丁基酮、n
‑
甲基吡咯烷酮、硝基甲烷、吡啶、环丁砜、四氢呋喃、四氢化萘、甲苯、1,1,2
‑
三氯乙烯和二甲苯。在一些实施方案中，该第二类溶剂选自乙腈、四氢呋喃和甲苯。在一些实施方案中，该第二类溶剂是乙腈。
[0080]
在一些实施方案中，包含化合物1、2或3的组合物包含残留量的未发现足够毒理学数据的溶剂。在一些实施方案中，有机溶剂是未发现足够毒理学数据的溶剂。在一些实施方案中，该溶剂选自2
‑
丁酮和2
‑
甲基四氢呋喃。某些术语
[0081]
除非另有定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语均与所请求保护的主题所属领域的技术人员所一般了解的含义相同。应当理解，前面的一般性描述和下面的详细描述仅是示例性的和说明性的，并不是对所请求保护的任何主题的限制。在本技术中，除非另有特别说明，否则单数形式的使用包括复数形式。必须指出，除非上下文另有明确说明，否则本说明书和所附的权利要求书中使用的单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数形式的指示物。在本技术中，除非另有说明，否则“或”的使用意指“和/或”。此外，术语“包括”以及
治疗剂的效果是指在疾病、病症或病况的治疗期间，在效力或持续时间上增加或延长治疗剂效果的能力。如本文所用的“增强有效量”是指在疾病、病症或病况的治疗中，足以增强治疗剂效果的量。当在患者中使用时，对这种应用有效的量将取决于疾病、病症或病况的严重程度和进程，先前的治疗，患者的健康状态和对药物的反应，以及治疗医师的判断。
[0090]
如本文所用的术语“预防有效量”是指应用于患者的组合物的量，其将在一定程度上缓解所治疗的疾病、病况或病症的一种或多种症状。在此类预防应用中，这样的量可以取决于患者的健康状态、体重等。例如，可以通过剂量递增临床试验来确定这样的预防有效量。
[0091]
如本文所用的术语“受试者”是指作为治疗、观察或实验对象的动物。仅举例来说，受试者可以是但不限于哺乳动物，包括但不限于人。
[0092]
如本文所用的术语“目标活性”是指能够被选择性调节剂所调节的生物活性。某些示例性的目标活性包括但不限于结合亲和力、信号转导、酶活性、肿瘤生长、炎症或与炎症相关的过程，以及与疾病或病况相关的一种或多种症状的改善。
[0093]
如本文所用的术语“治疗”或“处理”包括减轻、缓和或改善疾病或病况的症状，预防额外的症状，改善或预防症状的根本代谢原因，抑制疾病或病况，例如阻止疾病或病况的发展、缓解疾病或病况、使疾病或病况消退、缓解由疾病或状况引起的状况或者停止疾病或病况的症状。术语“治疗”或“处理”包括但不限于预防性和/或治疗性处理。
[0094]
如本文所用的，ic
50
是指特定测试化合物的剂量、浓度或量，其引起的剂量依赖性反应处于由特定测试化合物诱导、引起或加强的特定反应的最大表达的50％。方法
[0095]
在使用本文所述的结晶化合物1的方法的一些实施方案中，是一种治疗哺乳动物中与rsk活性相关的疾病或病况的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的结晶化合物1。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中与p90核糖体s6激酶(rsk)活性相关的疾病或病况的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物1的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中与p90核糖体s6激酶(rsk)活性相关的疾病或病况的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物1的结晶形式；其中该疾病或病况是癌症。在一些实施方案中是治疗哺乳动物中的癌症的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物1的结晶形式；其中该癌症是乳腺癌、前列腺癌、肺癌、脑癌、皮肤癌、骨癌、卵巢癌或血癌。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的前列腺癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物1的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的肺癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物1的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的脑癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物1的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的皮肤癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物1的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的骨癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物1的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的卵巢癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物1的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的血癌的方法，其中该方
法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物1的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的乳腺癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物1的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的乳腺癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物1的结晶形式；其中该乳腺癌选自管腔a型、管腔b型、her
‑
2阳性、三阴性乳腺癌、基底样乳腺癌、炎性乳腺癌、brca1/2突变乳腺癌、耐药性乳腺癌、鼠乳腺癌、吉非替尼不敏感的：mda
‑
mb
‑
231和转移性乳腺癌。在本文所述方法的一些实施方案中，化合物1的结晶形式是本文所述的晶形1。在本文所述方法的一些实施方案中，化合物1的结晶形式是本文所述的晶形2。在本文所述方法的一些实施方案中，化合物1的结晶形式是本文所述的晶形3。在本文所述方法的一些实施方案中，化合物1的结晶形式是本文所述的晶形4。
[0096]
在使用本文所述的结晶化合物2的方法的一些实施方案中，是一种治疗哺乳动物中与rsk活性相关的疾病或病况的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的结晶化合物2。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中与p90核糖体s6激酶(rsk)活性相关的疾病或病况的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物2的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中与p90核糖体s6激酶(rsk)活性相关的疾病或病况的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物2的结晶形式；其中该疾病或病况是癌症。在一些实施方案中是治疗哺乳动物中的癌症的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物2的结晶形式；其中该癌症是乳腺癌、前列腺癌、肺癌、脑癌、皮肤癌、骨癌、卵巢癌或血癌。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的前列腺癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物2的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的肺癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物2的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的脑癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物2的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的皮肤癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物2的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的骨癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物2的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的卵巢癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物2的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的血癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物2的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的乳腺癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物2的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的乳腺癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物2的结晶形式；其中该乳腺癌选自管腔a型、管腔b型、her
‑
2阳性、三阴性乳腺癌、基底样乳腺癌、炎性乳腺癌、brca1/2突变乳腺癌、耐药性乳腺癌、鼠乳腺癌、吉非替尼不敏感的：mda
‑
mb
‑
231和转移性乳腺癌。在本文所述方法的一些实施方案中，化合物2的结晶形式是本文所述的晶形1。
[0097]
在使用本文所述的结晶化合物3的方法的一些实施方案中，是一种治疗哺乳动物中与rsk活性相关的疾病或病况的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的结晶化合物3。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中与p90核糖体s6激酶(rsk)活性相
关的疾病或病况的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物3的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中与p90核糖体s6激酶(rsk)活性相关的疾病或病况的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物3的结晶形式；其中该疾病或病况是癌症。在一些实施方案中是治疗哺乳动物中的癌症的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物3的结晶形式；其中该癌症是乳腺癌、前列腺癌、肺癌、脑癌、皮肤癌、骨癌、卵巢癌或血癌。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的前列腺癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物3的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的肺癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物3的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的脑癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物3的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的皮肤癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物3的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的骨癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物3的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的卵巢癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物3的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的血癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物3的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的乳腺癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物3的结晶形式。在一些实施方案中是一种治疗哺乳动物中的乳腺癌的方法，其中该方法包括向该哺乳动物施用治疗有效量的本文所述的化合物3的结晶形式；其中该乳腺癌选自管腔a型、管腔b型、her
‑
2阳性、三阴性乳腺癌、基底样乳腺癌、炎性乳腺癌、brca1/2突变乳腺癌、耐药性乳腺癌、鼠乳腺癌、吉非替尼不敏感的：mda
‑
mb
‑
231和转移性乳腺癌。在本文所述方法的一些实施方案中，化合物3的结晶形式是本文所述的晶形1。联合治疗
[0098]
在一些实施方案中，本文所述的化合物1、2或3的结晶形式及其组合物与因其对于待治疗病况的治疗价值而被选择的其他治疗剂联合使用。通常，本文所述的组合物，和在采用联合疗法的实施方案中的其他药剂，不必在同一药物组合物中施用，并且可能由于不同的物理和化学特性而必须通过不同的途径施用。给药方式和在可能的情况下在同一药物组合物中给药的可行性的确定完全在临床医师的知识范围之内。可根据本领域认可的既定方案进行初始给药，然后临床医师基于所观察到的效果，可修改剂量、给药方式和给药次数。
[0099]
在一些实施方案中，联合施用本文所述的化合物1、2或3的结晶形式和其他治疗剂是合适的。仅举例来说，如果患者接受本文所述的化合物1、2或3的结晶形式时经历的副作用之一是恶心，那么抗恶心剂与初始治疗剂联合施用可能是合适的。或者，仅举例而言，佐剂的施用可增强一种本文所述化合物的治疗有效性(即，该佐剂本身具有最小的治疗益处，但与另一种治疗剂联合时对患者的总体治疗益处得到增强)。或者，仅举例而言，将一种本文所述化合物与同样具有治疗益处的另一种治疗剂(也包括治疗方案)一起施用可增强患者所经历的益处。在任何情况下，无论所治疗的疾病、病症或病况如何，患者所经历的总体益处可以仅仅是两种治疗剂的累加，或者患者可经历协同益处。
[0100]
对于治疗性应用，在一些实施方案中，本发明的化合物或药物单独施用或与常规
化学疗法、放射疗法、激素疗法和/或免疫疗法联合共同施用。
[0101]
作为非限制性实例，在一些实施方案中，本文所述的化合物1、2或3的结晶形式与常规化疗剂共同施用，所述化疗剂包括烷化剂(例如，环磷酰胺、异环磷酰胺、苯丁酸氮芥、白消安、美法仑、氮芥、乌拉莫司汀、噻替派、亚硝基脲等)、抗代谢物(例如，5
‑
氟尿嘧啶、硫唑嘌呤、氨甲蝶呤、甲酰四氢叶酸、卡培他滨、阿糖胞苷、氟尿苷、氟达拉滨、吉西他滨、培美曲塞、雷替曲塞等)、植物生物碱(例如，长春新碱、长春碱、长春瑞滨、长春地辛、鬼臼毒素、紫杉醇、多西他赛等)、拓扑异构酶抑制剂(例如，伊立替康、拓扑替康、安吖啶、依托泊苷(vp16)、磷酸依托泊苷、替尼泊苷等)、抗肿瘤抗生素(例如，多柔比星、阿霉素、柔红霉素、表柔比星、放线菌素、博来霉素、丝裂霉素、米托蒽醌、普卡霉素等)、铂类化合物(例如，顺铂、奥沙利铂、卡铂等)等。
[0102]
在一些实施方案中，本文所述的化合物1、2或3的结晶形式与常规激素治疗剂共同施用，所述激素治疗剂包括但不限于类固醇(例如，地塞米松)、非那雄胺、芳香酶抑制剂、他莫昔芬和促性腺素释放激素激动剂(gnrh)，如戈舍瑞林。
[0103]
在一些实施方案中，本文所述的化合物1、2或3的结晶形式与常规免疫治疗剂共同施用，所述免疫治疗剂包括但不限于免疫刺激剂(例如，卡介苗(bcg)、左旋咪唑、白介素
‑
2、
‑
干扰素等)、单克隆抗体(例如，抗cd20、抗her2、抗cd52、抗hla
‑
dr和抗vegf单克隆抗体)、免疫毒素(例如，抗cd33单克隆抗体
‑
加利车霉素缀合物、抗cd22单克隆抗体
‑
假单胞菌外毒素缀合物等)和放射免疫疗法(例如，与
111
in、
90
y或
131
i缀合的抗cd20单克隆抗体等)。
[0104]
在进一步的实施方案中，本文所述的化合物1、2或3的结晶形式与聚adp
‑
核糖聚合酶(parp)抑制剂、stat 3抑制剂、janus激酶抑制剂或egfr抑制剂共同施用。
[0105]
所用化合物的具体选择将取决于主治医师的诊断及其对患者病况的判断以及适当的治疗方案。在一些实施方案中，所述化合物一并(例如同时、基本上同时或在同一治疗方案内)或顺序施用，这取决于疾病、病症或病况的性质，患者的状况，以及所用化合物的实际选择。在评价所治疗的疾病和患者状况后，施用顺序的确定和治疗方案中每种治疗剂施用的重复次数完全在医生的知识范围内。
[0106]
当药物在治疗组合中使用时，治疗有效剂量可以变化。文献中描述了用于实验性地确定用于联合治疗方案的药物及其他试剂的治疗有效剂量的方法。例如，文献中已经广泛地描述了节律给药的使用，即，提供更频繁、更低的剂量以使毒副作用最小化。联合治疗进一步包括在不同的时间开始和停止的周期性治疗，以协助患者的临床管理。
[0107]
对于本文所述的联合疗法，共同施用的化合物的剂量当然根据所使用的联合药物的类型、所使用的具体药物、所治疗的疾病或病况等而不同。另外，当与一种或多种生物活性剂共同施用时，本文提供的化合物可以与生物活性剂同时施用或顺序施用。如果顺序施用，主治医师将决定与生物活性剂联合施用蛋白质的适当顺序。
[0108]
在任何情况下，多种治疗剂(其中之一是本文所述的化合物1、2或3的结晶形式)可以以任何顺序施用，乃至同时施用。如果同时施用，则所述多种治疗剂可以以单一的一体形式或多种形式提供(仅举例而言，作为单一的丸剂或作为两个单独的丸剂)。一种治疗剂可以以多个剂量给予，或者两种都可以作为多个剂量给予。如果不是同时施用，多个剂量之间的时间可以从多于零周到少于四周不等。另外，组合方法、组合物和制剂并不限于仅使用两种药剂；也设想了多种治疗组合的使用。
[0109]
可以理解，治疗、预防或改善寻求缓解的病况的剂量方案可以根据多种因素加以修改。这些因素包括受试者所罹患的病症或病况，以及受试者的年龄、体重、性别、饮食和医疗状况。因此，实际采用的剂量方案可广泛变化，因此可偏离本文所述的剂量方案。
[0110]
构成本文公开的联合疗法的药剂可以是组合剂型或用于基本同时施用的单独剂型。构成联合疗法的药剂还可以顺序施用，其中任一种治疗性化合物通过需要两步施用的方案来施用。该两步施用方案可能要求活性剂的顺序施用，或单独活性剂的空间分离的施用。多个施用步骤之间的时间段可在数分钟至数小时的范围内，这取决于每种药剂的性质，如药剂的效力、溶解度、生物利用度、血浆半衰期和动力学谱。靶分子浓度的昼夜节律变化也可决定最佳的给药间隔。
[0111]
在一些实施方案中，本文所述的化合物与可为患者提供额外或协同益处的程序联合使用。在一些实施方案中，本文所述的化合物1、2或3的结晶形式与放射疗法联合施用。仅举例而言，预期患者将在本文所述的方法中发现治疗和/或预防益处，其中将本文公开化合物的药物组合物和/或与其他治疗剂的组合与遗传检测相组合，以确定该个体是否为已知与某些疾病或状况相关的突变基因的携带者。
[0112]
在疾病或状况发生之前、期间或之后施用本文所述的化合物和联合疗法，并且施用包含化合物的组合物的时机可以不同。因此，例如，在一些实施方案中，所述化合物作为预防用药使用，并连续地施用于具有罹患病况或疾病倾向的受试者，以便预防该疾病或病况的发生。在一些实施方案中，所述化合物和组合物可在症状发作期间或在发作后尽可能快地施用于受试者。在一些实施方案中，在症状发作的最初48小时内，优选在症状发作的最初48小时内，更优选在症状发作的最初6小时内，最优选在症状发作的3小时内开始化合物的施用。可经由任何可行的途径，例如，静脉内注射、团注、经约5分钟至约5小时输注、丸剂、胶囊、透皮贴剂、经颊递送等或其组合进行初始施用。
[0113]
优选地在检测到或怀疑疾病或病况发作之后尽可能快地施用化合物，并持续治疗该疾病所需的时间长度，例如1天至约3个月。每个受试者的治疗长度可以不同，并且可采用已知的标准来确定该长度。例如，化合物或含有该化合物的制剂可施用至少2周，优选约1个月至约5年。药物组合物和给药
[0114]
本文还描述了含有本文公开的化合物的药物组合物。在一个实施方案中，本发明涉及一种组合物，其以当施用于动物，优选哺乳动物，最优选人类患者时有效抑制rsk活性的量在药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂中包含本文所述的化合物。
[0115]
在一些实施方案中是一种药物组合物，其包含本文所述的化合物1的结晶形式，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中是一种药物组合物，其包含本文所述的结晶化合物1晶形1，以及至少一种选自药学上可接受的载体、稀释剂和赋形剂的非活性成分。在一些实施方案中是一种药物组合物，其包含本文所述的结晶化合物1晶形2，以及至少一种选自药学上可接受的载体、稀释剂和赋形剂的非活性成分。在一些实施方案中是一种药物组合物，其包含本文所述的结晶化合物1晶形3，以及至少一种选自药学上可接受的载体、稀释剂和赋形剂的非活性成分。在一些实施方案中是一种药物组合物，其包含本文所述的结晶化合物1晶形4，以及至少一种选自药学上可接受的载体、稀释剂和赋形剂的非活性成分。
[0116]
在一些实施方案中是一种药物组合物，其包含本文所述的化合物2的结晶形式，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中是一种药物组合物，其包含本文所述的结晶化合物2晶形1，以及至少一种选自药学上可接受的载体、稀释剂和赋形剂的非活性成分。
[0117]
在一些实施方案中是一种药物组合物，其包含本文所述的化合物3的结晶形式，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中是一种药物组合物，其包含本文所述的结晶化合物3晶形1，以及至少一种选自药学上可接受的载体、稀释剂和赋形剂的非活性成分。
[0118]
如本文所用的，药物组合物是指本文所述的化合物1、2或3的结晶形式与其他化学组分如载体、稳定剂、稀释剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂和/或赋形剂的混合物。该药物组合物有助于将该化合物施用于生物体。在实施本文提供的治疗或使用方法时，将治疗有效量的本文所述化合物以药物组合物的形式施用于患有待治疗的疾病、病症或病况的哺乳动物。在一些实施方案中，该哺乳动物是人。治疗有效量可以根据疾病的严重程度、受试者的年龄和相对健康状况、所用化合物的效力以及其他因素而广泛不同。本文所述的化合物1、2或3的结晶形式可以单独使用，或作为混合物的组分与一种或多种治疗剂联合使用(如在联合疗法中)。
[0119]
本文所述的化合物1、2或3的结晶形式以纯的形式或在合适的药物组合物中的施用可以通过任何可接受的药剂给药方式进行，以提供类似的应用。本文所述的药物组合物可通过将本文所述的化合物1、2或3的结晶形式与合适的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂组合来制备，并且可配制成固体、半固体、液体或气体形式的制品，如片剂、胶囊、粉末、颗粒、软膏、溶液、栓剂、注射剂、吸入剂、凝胶、微球和气雾剂。施用此类药物组合物的典型途径包括但不限于口服、局部、透皮、吸入、肠胃外、舌下、直肠、阴道和鼻内。如本文所用的术语“肠胃外”包括皮下注射、静脉内、肌肉内、胸骨内注射或输注技术。配制本文所述的药物组合物，以便在将组合物施用于患者时使其中含有的活性成分成为生物可用的。将施用于受试者或患者的组合物采取一个或多个剂量单位的形式，其中例如片剂可以是单剂量单位，而气雾剂形式的本文所述的化合物1、2或3的结晶形式的容器可以容纳多个剂量单位。制备这类剂型的实际方法对于本领域技术人员来说是已知的，或者是显而易见的；例如，参见the science and practice of pharmacy,第20版(philadelphia college of pharmacy and science,2000)。在任何情况下，待施用的组合物将含有治疗有效量的本文所述的化合物1、2或3的结晶形式，用于治疗本文所述的感兴趣的疾病或病况。
[0120]
在此有用的药物组合物还含有药学上可接受的载体，包括任何合适的稀释剂或赋形剂，其包括任何本身不会诱导产生对接受该组合物的个体有害的抗体的药剂，并且可以在施用时没有过度毒性。药学上可接受的载体包括但不限于液体，如水、盐水、甘油和乙醇等。关于药学上可接受的载体、稀释剂和其他赋形剂的详尽讨论可见于remington's pharmaceutical sciences(mack pub.co.,n.j.现行版本)。
[0121]
在一些实施方案中，本文所述的药物组合物是固体或液体的形式。在一个方面，载体是颗粒状的，因此该组合物例如是片剂或粉末形式。在一些实施方案中，载体是液体，该组合物是例如口服糖浆、可注射液体或气雾剂，其可用于例如吸入给药。
[0122]
当打算用于口服给药时，药物组合物优选为固体或液体形式，其中半固体、半液
体、悬浮液和凝胶形式作为固体或液体包括在本文所述的形式中。
[0123]
在一些实施方案中，作为用于口服给药的固体组合物，将药物组合物配制成粉末、颗粒、压缩片剂、丸剂、胶囊、口香糖、薄饼或类似形式。这样的固体组合物通常含有一种或多种惰性稀释剂或可食用载体。在一些实施方案中，存在以下一种或多种：粘合剂，如羧甲基纤维素、乙基纤维素、微晶纤维素、黄蓍胶或明胶；赋形剂，如淀粉、乳糖或糊精；崩解剂，如海藻酸、海藻酸钠、primogel、玉米淀粉等；润滑剂，如硬脂酸镁或sterotex；助流剂，如胶体二氧化硅；甜味剂，如蔗糖或糖精；调味剂，如薄荷、水杨酸甲酯或橙子调味剂；和着色剂。
[0124]
当药物组合物为胶囊，例如明胶胶囊的形式时，除了上述类型的物质外，它还可含有液体载体，如聚乙二醇或油。
[0125]
在一些实施方案中，所述药物组合物为液体形式，例如酏剂、糖浆、溶液、乳液或悬浮液。在一些实施方案中，作为两个实例，该液体用于口服给药或通过注射递送。当打算用于口服给药时，除本发明化合物外，优选的组合物还含有甜味剂、防腐剂、染料/着色剂和增味剂中的一种或多种。在一些实施方案中，在打算通过注射施用的组合物中，包含表面活性剂、防腐剂、润湿剂、分散剂、悬浮剂、缓冲液、稳定剂和等渗剂中的一种或多种。
[0126]
本文所述的液体药物组合物，无论它们是溶液、悬浮液还是其他类似形式，均可包含一种或多种下列辅剂：无菌稀释剂，如注射用水，盐水溶液，优选生理盐水、林格氏溶液、等渗氯化钠，不挥发性油，如可用作溶剂或悬浮介质的合成甘油单酯或甘油二酯，聚乙二醇，甘油，丙二醇或其他溶剂；抗菌剂，如苯甲醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂，如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂，如乙二胺四乙酸；缓冲液，如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐，和调节张度的试剂，如氯化钠或右旋糖。肠胃外制剂可以封装在用玻璃或塑料制成的安瓿、一次性注射器或多剂量瓶中。生理盐水是优选的辅剂。可注射的药物组合物优选是无菌的。
[0127]
本文所述的打算用于肠胃外或口服给药的液体药物组合物应含有一定量的本文所述的化合物1、2或3的结晶形式，以便获得合适的剂量。通常，该量为组合物中至少0.01％的本文所述的化合物1、2或3的结晶形式。当打算用于口服给药时，该量可以变化为组合物重量的0.1％至约70％。优选的口服药物组合物含有约4％至约50％的本文所述的化合物1、2或3的结晶形式。制备根据本发明的优选药物组合物和制品，使得在稀释之前，肠胃外剂量单位含有0.01重量％至10重量％的本文所述的化合物1、2或3的结晶形式。
[0128]
在一些实施方案中，本文所述的药物组合物打算用于局部给药，在这种情况下，载体可适当地包含溶液、乳液、软膏或凝胶基质。例如，该基质可包括以下一种或多种：凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、蜂蜡、矿物油，稀释剂如水和醇，以及乳化剂和稳定剂。在一些实施方案中，增稠剂存在于用于局部给药的药物组合物中。在打算用于透皮给药的一些实施方案中，该组合物包括透皮贴剂或离子电渗装置。在一些实施方案中，局部制剂含有浓度为约0.1％w/v至约10％w/v(每单位体积的重量)的本文所述的化合物1、2或3的结晶形式。
[0129]
在一些实施方案中，本文所述的药物组合物打算用于直肠给药，例如为栓剂的形式，其将在直肠中融化并释放药物。用于直肠给药的组合物可含有油性基质作为合适的无刺激性赋形剂。这类碱包括但不限于羊毛脂、可可脂和聚乙二醇。
[0130]
本文所述的药物组合物可包含改变固体或液体剂量单位的物理形式的各种材料。例如，该组合物可包含在活性成分周围形成包衣壳的材料。在一些实施方案中，形成包衣壳的材料通常是惰性的，并且选自例如糖、虫胶和其他肠溶包衣剂。或者，在一些实施方案中，
活性成分包封在明胶胶囊中。
[0131]
固体或液体形式的本文所述药物组合物可包含与本文所述的化合物1、2或3的结晶形式结合的药剂，从而有助于该化合物的递送。可以通过这种能力起作用的合适的药剂包括单克隆或多克隆抗体、蛋白质或脂质体。
[0132]
本文所述的药物组合物可以由可以作为气雾剂施用的剂量单位组成。术语气雾剂用来表示从胶体性质的系统到由加压包装组成的系统的多种系统。在一些实施方案中，通过液化或压缩气体或通过分配活性成分的合适的泵系统进行递送。在一些实施方案中，本文所述的化合物1、2或3的结晶形式的气雾剂以单相、双相或三相系统递送，以递送活性成分。气雾剂的递送包括必要的容器、启动器、阀门、子容器等，它们一起可形成套件。
[0133]
在一些实施方案中，本文所述的药物组合物通过药学领域熟知的方法制备。例如，在一些实施方案中，打算通过注射施用的药物组合物通过将本文所述的化合物1、2或3的结晶形式与无菌蒸馏水组合以形成溶液来制备。在一些实施方案中，加入表面活性剂以促进均相溶液或悬浮液的形成。表面活性剂是与本文所述的化合物1、2或3的结晶形式非共价相互作用的化合物，以促进该化合物在水性递送系统中的溶解或均匀悬浮。
[0134]
在一些实施方案中，配制本文所述的药物组合物，以便通过采用本领域已知的程序在施用于患者后提供活性成分的快速、持续或延迟释放。控释药物递送系统包括渗透泵系统和含有聚合物涂覆的储库或药物
‑
聚合物基质制剂的溶出系统。控释系统的实例在美国专利3,845,770和4,326,525以及p.j.kuzma等人,regional anesthesia 22(6):543
‑
551(1997)中给出，所有这些文献均通过引用并入本文。
[0135]
在一些实施方案中，本文所述的药物组合物通过用于局部、全身和鼻至脑医学治疗的鼻内药物递送系统递送。受控颗粒分散(cpd)
tm
技术、传统鼻喷雾瓶、吸入器或喷雾器是本领域技术人员已知的，以通过靶向嗅觉区和副鼻窦提供有效的局部和全身药物递送。
[0136]
在一些实施方案中，本文所述的药物组合物还涉及适合施用于女性或雌性动物的阴道内壳体或核心药物递送装置。在一些实施方案中，该装置由聚合物基质中的活性药物成分组成，被鞘包围，并且能够每天以基本上零级的模式释放化合物，类似于pct公开专利申请wo98/50016中描述的用来施用睾酮的装置。
[0137]
目前用于眼部递送的方法包括局部给药(滴眼剂)、结膜下注射、眼周注射、玻璃体内注射、外科植入物和离子电渗疗法(使用小电流将离子化药物输送到身体组织中和通过身体组织)。本领域技术人员将最合适的赋形剂与化合物组合以用于安全有效的眼内给药。
[0138]
最合适的途径取决于所治疗的病况的性质和严重程度。本领域技术人员还熟悉确定给药方法(例如，口服、静脉内、吸入、皮下、直肠等)、剂型、合适的药物赋形剂以及与将本文所述的化合物1、2或3的结晶形式递送至有需要的受试者有关的其他方面。给药方法和治疗方案
[0139]
本文所述的化合物1、2或3的结晶形式可用于制备用于治疗癌症或用于治疗将会至少部分地从rsk抑制中获益的疾病或病况的药物。另外，在需要此类治疗的受试者中治疗本文所述的任何疾病或病况的方法包括以治疗有效量向所述受试者施用含有本文所述的化合物1、2或3的结晶形式的药物组合物。
[0140]
本文所述的化合物1、2或3的结晶形式或其药学上可接受的盐以治疗有效量施用，该量将根据多种因素而异，这些因素包括所用具体化合物的活性；该化合物的代谢稳定性
和作用时间长度；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；给药方式和时间；排泄率；药物组合；特定病症或病况的严重程度；以及受试者正在接受的治疗。通常，治疗有效日剂量(对于70kg哺乳动物)为约0.001mg/kg(即0.07mg)至约100mg/kg(即7.0g)；优选地，治疗有效剂量(对于70kg哺乳动物)为约0.01mg/kg(即0.7mg)至约50mg/kg(即3.5g)；更优选地，治疗有效剂量(对于70kg哺乳动物)为约1mg/kg(即70mg)至约25mg/kg(即1.75g)。在一些实施方案中，本文所述的化合物1、2或3的结晶形式合适的日剂量为约0.01mg/kg至约20mg/kg。在一些实施方案中，日剂量为约0.1mg/kg至约10mg/kg。在包括但不限于人的较大哺乳动物中的指定日剂量在约0.5mg至约1000mg的范围内，其方便地以单剂量或分剂量(包括但不限于每日至多四次)或以延长释放形式施用。在一些实施方案中，用于口服给药的合适单位剂型包含约1mg至约500mg的活性成分。在一些实施方案中，单位剂量为约1mg、约5mg、约10mg、约20mg、约50mg、约100mg、约200mg、约250mg、约400mg或约500mg。
[0141]
本文提供的有效剂量的范围并非旨在限制，而是代表优选的剂量范围。这样的剂量可根据多个变量而变化，这些变量不限于所用化合物的活性、待治疗的疾病或病况、给药方式、受试个体的需求、所治疗疾病或病况的严重程度，以及从业医生的判断。然而，最优选的剂量将对受试个体定制，如相关领域的技术人员所理解和确定的。(参见，例如，berkow等人编著,the merck manual,第16版,merck and co.,rahway,n.j.,1992；goodman等人编著,goodman and cilman's the pharmacological basis of therapeutics,第10版,pergamon press,inc.,elmsford,n.y.,(2001)；avery's drug treatment:principles and practice of clinical pharmacology and therapeutics,第3版,adis press,ltd.,williams and wilkins,baltimore,md.(1987),ebadi,pharmacology,little,brown and co.,boston,(1985)；osolci等人编著,remington's pharmaceutical sciences,第18版,mack publishing co.,easton,pa(1990)；katzung,basic and clinical pharmacology,appleton and lange,norwalk,ct(1992))。
[0142]
如果需要，每次治疗所需的总剂量可以通过在一天中的多个剂量或单剂量来施用。通常，用小于化合物的最佳剂量的较小剂量开始治疗。此后，以小增量提高该剂量直到达到这些情况下的最佳效果。诊断药物化合物或组合物可以单独施用或与针对该病理学或针对该病理学的其他症状的其他诊断剂和/或药物一起施用。施用本文所述化合物和/或组合物的接受者可以是任何脊椎动物，如哺乳动物。在哺乳动物中，优选的接受者是灵长目(包括人、猿和猴)、偶蹄目(包括马、山羊、牛、绵羊、猪)、啮齿目(包括小鼠、大鼠、兔子和仓鼠)和食肉目(包括猫和狗)的哺乳动物。在禽类中，优选的接受者是火鸡、鸡和相同目的其他成员。最优选的接受者是人。
[0143]
可以施用包含本文所述的化合物1、2或3的结晶形式的组合物，以用于预防性和/或治疗性处理。在治疗性应用中，将组合物以足以治愈或至少部分阻止疾病或病况的症状的量施用于已经罹患该疾病或病况的患者。对于这种用途有效的量取决于疾病或病况的严重程度和病程，既往治疗，患者的健康状态、体重和对药物的反应以及主治医师的判断。
[0144]
在预防性应用中，将含有本文所述化合物的组合物施用于易患特定疾病、病症或病况或处于其风险下的患者。这样的量被定义为“预防有效量或剂量”。在该用途中，精确的量还取决于患者的健康状态、体重等。当在患者中使用时，对于这种用途有效的量将取决于疾病、病症或病况的严重程度和病程，既往治疗，患者的健康状态和对药物的反应以及主治
医师的判断。
[0145]
在患者的状况没有改善的情况下，根据医生的裁量，化合物1、2或3的结晶形式的给药在一些实施方案中长期进行，即持续延长的一段时间，包括患者的整个生命期，以便改善或以其他方式控制或限制患者的疾病或病况的症状。
[0146]
在患者的状态确实得到改善的情况下，根据医生的裁量，化合物1、2或3的结晶形式的给药在一些实施方案中继续进行；或者，在一些实施方案中，所施用的组合物的剂量暂时减少或暂时停止某段时间长度(即“休药期”)。休药期的长度可以在2天到1年之间不等，仅举例来说，包括2天、3天、4天、5天、6天、7天、10天、12天、15天、20天、28天、35天、50天、70天、100天、120天、150天、180天、200天、250天、280天、300天、320天、350天或365天。在一些实施方案中，休药期期间的剂量减少是约10％至约100％，仅举例来说，包括约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％或约100％。
[0147]
一旦患者的状况已发生改善，如有必要，施用维持剂量。随后，根据症状，可将给药剂量或频率或这两者降低至改善的疾病、病症或病况得以保持的水平。然而，在症状有任何复发时，患者可能需要长期的间歇性治疗。
[0148]
在一些实施方案中，本文所述的药物组合物是适于单次施用精确剂量的单位剂型。在单位剂型中，所述制剂被分成含有适量的一种或多种化合物的单位剂量。在一些实施方案中，单位剂量是含有离散量的制剂的包装的形式。非限制性实例是包装的片剂或胶囊，以及在小瓶或安瓿中的粉末。在一些实施方案中，水性悬浮液组合物被包装在不可再次封闭的单剂量容器中。或者，在一些实施方案中，使用可再次封闭的多剂量容器，在该情况下，组合物中一般包含防腐剂。仅举例而言，在一些实施方案中，用于肠胃外注射的制剂以单位剂型呈现，该单位剂型包括但不限于安瓿，或在添加有防腐剂的多剂量容器中。
[0149]
此类治疗方案的毒性和治疗效果可通过标准药学程序在细胞培养物或实验动物中确定，包括但不限于ld
50
(群体中50％致死的剂量)和ed
50
(群体中50％治疗有效的剂量)的确定。毒性与治疗效果之间的剂量比是治疗指数，并且可表示为ld
50
与ed
50
之间的比值。表现出高治疗指数的化合物是优选的。从细胞培养试验和动物研究中获得的数据可以用于制定在人体中使用的剂量范围。此类化合物的剂量优选地处于包括ed
50
且具有最小毒性的循环浓度的范围内。剂量可以在该范围内变化，这取决于所使用的剂型和所采用的给药途径。试剂盒/制品
[0150]
为了在本文所述的治疗使用方法中使用，本文还描述了试剂盒和制品。这样的试剂盒包括载具、包装或容器，该容器被区室化为容纳一个或多个容器如小瓶、管等，每个容器包含在本文描述的方法中使用的一个单独元件。合适的容器包括，例如，瓶子、小瓶、注射器和试管。在一个实施方案中，该容器由多种材料如玻璃或塑料形成。
[0151]
本文提供的制品含有包装材料。用于包装药物产品的包装材料包括，例如，美国专利5,323,907。药物包装材料的实例包括但不限于泡罩包装、瓶子、管、袋、容器、瓶子，和任何适于选定制剂和预期给药和治疗模式的包装材料。
[0152]
在一些实施方案中，本文所述的化合物1、2或3的结晶形式呈现在包装或分配器装置中，该装置可包含一个或多个含有活性成分的单位剂型。本文所述的化合物1、2或3的结
晶形式单独地包装或与其他化合物或其他成分或添加剂一起包装。在一些实施方案中，该包装包含一个或多个容器，所述容器填充有药物组合物的一种或多种成分。在一些实施方案中，该包装包含金属或塑料箔，如泡罩包装。在一些实施方案中，该包装或分配器附有监管药物生产、使用或销售的政府机构所规定的形式的、与容器相关联的告知书，该告知书反映出该机构批准该药物形式用于人类或兽医给药。在一些实施方案中，例如，这样的告知书是由美国食品药品管理局对处方药批准的标签或批准的产品插页。在一些实施方案中，制备在相容的药物载体中配制的、包含本文所述的化合物1、2或3的结晶形式的组合物，将其置于合适的容器中，并标示出可供治疗指明的病况。
[0153]
例如，容器包括结晶的化合物1、2或3，任选地在组合物中或与另一种本文公开的药剂组合。这样的试剂盒任选地包含关于其在本文所述方法中的使用的标识性描述或标签或说明书。
[0154]
试剂盒一般包括列出了内容物的标签和/或使用说明书，以及带有使用说明的包装插页。一般还包括一套说明书。
[0155]
在一个实施方案中，标签位于容器上或与容器相关联。在一个实施方案中，当构成标签的字母、数字或其他字符附着、模制或蚀刻在容器本身上时，标签处于容器上；当标签存在于也容纳容器的接纳器或载具内(例如作为包装插页)时，标签与容器相关联。在一个实施方案中，标签用来指示内容物将用于特定的治疗性应用。标签还指示内容物的使用说明，例如在本文所述方法中的使用说明。
[0156]
在某些实施方案中，所述药物组合物呈现于包装或分配器装置中，该包装或分配器装置包含一种或多种含有本文提供的化合物的单位剂型。例如，该包装包含金属或塑料箔，如泡罩包装。在一个实施方案中，该包装或分配器装置附有给药说明书。在一个实施方案中，该包装或分配器还附有监管药物生产、使用或销售的政府机构所规定的形式的、与容器相关联的告知书，该告知书反映出该机构批准该药物形式用于人类或兽医给药。例如，这样的告知书是由美国食品药品管理局对处方药批准的标签或批准的产品插页。在一个实施方案中，制备在相容的药物载体中配制的、含有化合物1、2或3的结晶形式的组合物，将其置于合适的容器中，并标示出可供治疗指明的病况。实施例缩写列表
[0157]
除非另有说明，否则如在本发明的整篇说明书中所使用的，下列缩写应理解为具有以下含义：acn或mecn乙腈bn苄基boc或boc氨基甲酸叔丁酯t
‑
bu叔丁基cy环己基dce二氯乙烷(clch2ch2cl)dcm二氯甲烷(ch2cl2)dipea或diea二异丙基乙胺dmap4
‑
(n,n
‑
二甲基氨基)吡啶
dmf二甲基甲酰胺dman,n
‑
二甲基乙酰胺dmso二甲基亚砜eq或equiv当量et乙基et2o二乙醚etoh乙醇etoac乙酸乙酯hplc高效液相色谱法me甲基mek甲基乙基酮meoh甲醇ms质谱法gc气相色谱法h小时kfkarlfischermin分钟msoh甲磺酸nmr核磁共振rp
‑
hplc反相
‑
高效液相色谱法r.t.室温tfa三氟乙酸thf四氢呋喃tlc薄层色谱法v体积i.化学合成
[0158]
除非另外指出，否则试剂和溶剂按从商业供应商接收时原样使用。无水溶剂和烘干的玻璃器皿用于对水分和/或氧敏感的合成转化。没有对产率进行优化。反应时间是近似值，并且没有优化。柱色谱法和薄层色谱法(tlc)在硅胶上进行，除非另外指出。实施例1：化合物1、2和3的制备
[0159]
化合物1、2和3的制备在美国专利9,771,366中公开，其内容通过引用整体并入本文。ii.多晶型物的表征实施例2：x射线粉末衍射(xrpd)
[0160]
xrpd分析在panalyticalx’pertpro上进行，在3至35
°
2θ之间扫描样品。将材料轻轻研磨以释放任何团聚物，并加载到带有kapton或mylar聚合物膜的多孔板上以支撑样品。然后将多孔板放入衍射仪中，并采用40kv/40ma发生器设置，使用以透射模式(步长0.0130
°
2θ)运行的cuk辐射(α1:α2比＝0.5)进行分析。
[0161]
化合物1的晶形1的xrpd分析(图1)显示晶形1为结晶的，在9.6
°2‑
θ、16.2
°2‑
θ、18.2
°2‑
θ、21.2
°2‑
θ、22.0
°2‑
θ和24.8
°2‑
θ处具有特征峰。
[0162]
化合物1的晶形2的xrpd分析(图4)显示晶形2为结晶的，在10.4
°2‑
θ、15.1
°2‑
θ、18.0
°2‑
θ、19.5
°2‑
θ、25.4
°2‑
θ和26.8
°2‑
θ处具有特征峰。
[0163]
化合物1的晶形3的xrpd分析(图7)显示晶形3为结晶的，在9.8
°2‑
θ、14.5
°2‑
θ、16.5
°2‑
θ、19.6
°2‑
θ、20.7
°2‑
θ、21.0
°2‑
θ和24.3
°2‑
θ处具有特征峰。
[0164]
化合物1的晶形4的xrpd分析(图8)显示晶形4为结晶的，在9.4
°2‑
θ、15.2
°2‑
θ、16.9
°2‑
θ、17.4
°2‑
θ、17.9
°2‑
θ、21.6
°2‑
θ、22.0
°2‑
θ和24.4
°2‑
θ处具有特征峰。
[0165]
化合物2的晶形1的xrpd分析(图13)显示其为结晶的，在14.3
°2‑
θ、15.7
°2‑
θ、16.2
°2‑
θ、22.2
°2‑
θ、25.7
°2‑
θ和27.0
°2‑
θ处具有特征峰。
[0166]
化合物3的晶形1的xrpd分析(图14)显示其为结晶的，在11.4
°2‑
θ、16.5
°2‑
θ、18.3
°2‑
θ、24.9
°2‑
θ和25.0
°2‑
θ处具有特征峰。实施例3：偏振光显微术(plm)
[0167]
使用配备有motic相机和图像捕获软件(motic images plus 2.0)的olympus bx50偏振光显微镜进行光学显微术研究。
[0168]
化合物1的晶形1的plm分析表明该材料是双折射的，具有小的团聚颗粒并且没有清晰的形态学。
[0169]
化合物1的晶形2的plm分析表明该材料是双折射的，具有小的团聚颗粒并且没有清晰的形态学。实施例4：热重分析(tga)
[0170]
将大约5mg的材料称重到敞开的铝盘中，并加载到同步热重/差热分析仪(tg/dta)中，并保持在室温下。然后将样品以10℃/min的速率从20℃加热到300℃，在此期间记录样品重量的变化以及任何差热事件(dta)。使用氮气作为吹扫气体，流速为300cm3/min。
[0171]
化合物1的晶形1的tga(图2)显示，从加热开始，根据tg有一系列小的质量损失(0.7％、3.8％和3.2％)，对应于表面溶剂损失、一当量水的损失和hcl的损失，直到大约280℃，此时观察到样品降解。
[0172]
化合物1的晶形2的tga(图5)显示，从实验开始到约232℃有一个0.8％的小质量损失。在232℃下观察到第二个5.3％的更大质量损失。实施例5：差示扫描量热法(dsc)
[0173]
将大约5mg的材料称重到铝制dsc盘中，并用穿孔铝盖非气密地封盖。然后将样品盘加载到冷却并保持在20℃的seiko dsc6200(配备有冷却器)中。一旦获得稳定的热流响应，即以10℃/min的扫描速率将样品和参考物加热到350℃，并监测由此产生的热流响应。使用氮气作为吹扫气体，流速为50cm3/min。进行第二个dsc实验，其中将样品和参考物加热到300℃的较低温度。其他所有参数保持不变。
[0174]
化合物1的晶形1的dsc分析(图3)显示了急剧的熔化吸热，其开始于171℃(81j/g)。
[0175]
化合物1的晶形2的dsc分析(图6)显示了急剧的熔化吸热，其开始于240℃(77j/g)。实施例6：动态蒸汽吸附(dvs)
[0176]
将大约10
‑
20mg的样品放入网状蒸汽吸附天平盘中，并由surface measurement systems加载到dvs intrinsic动态蒸汽吸附天平中。样品经受以10％增量从40％到90％相对湿度(rh)的斜坡曲线，在每一步将样品保持于25℃，直到达到稳定的重量(dm/dt 0.004％，最小步长30分钟，最大步长500分钟)。吸附循环完成后，使用相同的程序将样品干燥至0％rh，然后进行第二个吸附循环以回到40％rh。进行两个循环。绘制了吸附/解吸循环过程中的重量变化，从而允许确定样品的吸湿性。然后对任何保留的固体进行xrpd分析。
[0177]
化合物1的晶形1的dvs分析(图9)显示该材料轻微吸湿，在90％rh或0.2当量的水时质量变化为 0.8％。dvs后xrpd分析显示，该材料在暴露于dvs湿度条件后仍保持晶形1，表明结晶水保留在晶格内(图10)。
[0178]
化合物1的晶形2的dvs分析(图11)显示，根据dvs，该材料轻微吸湿，在90％rh时的质量吸收为1.8％。根据xrpd，在dvs后的形式没有变化(图12)。iii.多晶型物筛选
[0179]
无定形化合物1用于多晶型物筛选。无定形化合物1以下列方式制备。将1.2g结晶化合物1的水溶液(150ml)等分于15个20ml小瓶中，并将小瓶在
‑
20℃下冷冻。然后将小瓶置于与冷冻干燥器相连的干燥器中，并干燥约72小时。收集材料并通过xrpd进行分析，显示无定形化合物1。实施例7：溶剂溶解度筛选
[0180]
向无定形化合物1(10mg)中加入100μl合适的溶剂，如果仍有固体，则将小瓶温和加热至约40℃以帮助溶解。继续添加溶剂直到材料完全溶解或者已添加2ml(<5mg/ml)。将样品打开盖，并让其在环境下蒸发。溶解度筛选中使用的溶剂和结果在表1中示出。表1
实施例8：初级多晶型物筛选
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温度循环
[0181]
将十个小瓶中的无定形化合物1(80mg)悬浮在适当的溶剂/溶剂混合物中，并在72小时内以4小时循环在环境温度与40℃之间循环温度。通过离心过滤分离所得固体，并通过xrpd进行分析。筛选中使用的溶剂和结果在表2中示出。表2溶剂xrpd结果1
‑
丙醇化合物1，晶形2mek化合物1，晶形240％甲醇/60％水化合物1，晶形195％甲醇/5％水化合物1，晶形12
‑
丙醇化合物1，晶形2乙腈化合物1，晶形2
乙醇化合物1，晶形2乙酸乙酯化合物1，无定形甲醇化合物1，晶形2nmp产生固体不足dmf化合物1，晶形2dmso产生固体不足实施例9：初级多晶型物筛选
‑
蒸发
[0182]
将化合物1的饱和溶液转移到2ml小瓶中。然后将小瓶打开盖，并让其在环境温度下蒸发以回收材料。所有回收的材料均通过xrpd进行表征。从mek、2
‑
丙醇、乙腈、乙醇和乙酸乙酯的温度循环过程中产生体积不足的饱和溶液。结果没有在这些溶剂中进行蒸发实验。从1
‑
丙醇、甲醇、nmp和甲醇/水混合物中观察到固体，但产生的量不足，因此，没有进行xrpd分析。实施例10：初级多晶型物筛选
–
冷却沉淀(crashcool)
[0183]
化合物1的饱和溶液在2
‑
8℃下储存72小时。此时，通过xrpd分析回收的任何材料，并将小瓶移动并在
‑
20℃下储存48小时。此后，通过xrpd分析回收的任何材料。从mek、2
‑
丙醇、乙腈、乙醇和乙酸乙酯的温度循环过程中未能产生足够体积的饱和溶液。结果没有在这些溶剂中进行冷却沉淀实验。在从nmp在2
‑
8℃和
‑
20℃下冷却沉淀后观察到固体，但在这两种情况下，固体的产生量都不足，因此，没有进行xrpd分析。实施例11：初级多晶型物筛选
‑
反溶剂添加
[0184]
将多达2ml的反溶剂(tbme)逐滴加入到化合物1的饱和溶液中。将样品在环境温度下加盖24小时，然后在2
‑
8℃下24小时。通过xrpd分析任何所得固体。从mek、2
‑
丙醇、乙腈、乙醇和乙酸乙酯的温度循环过程中未能产生足够体积的饱和溶液。结果没有在这些溶剂中进行反溶剂实验。在1
‑
丙醇、95:5甲醇/水和nmp中的反溶剂实验中观察到固体，但产生的量不足，因此，没有进行xrpd分析。在dmso反溶剂实验中产生化合物1晶形3。实施例12：稳定性研究
‑
一周研究
[0185]
将约15mg化合物1晶形1和2分别放置在40℃/75％rh或80℃/环境光下1周。通过xrpd和hplc纯度分析所得固体。在这些条件下，1周后未观察到晶形1或晶形2的变化。实施例13：稳定性研究
‑
八周研究
[0186]
将约5mg化合物1晶形1称重到24个1.5ml玻璃小瓶中。将每个小瓶置于40℃/75％rh(未加盖的小瓶)、80℃(加盖的小瓶)和环境光及温度(约22℃，加盖的小瓶)下共8周。在1周、2周、4周和8周时，从每个条件中取出10mg进行xrpd、1hnmr和hplc纯度分析。8周后，xrpd和1hnmr分析显示没有变化。另外，通过hplc未观察到纯度的显著变化。iv.生物学数据实施例14：rsk2抑制试验
[0187]
根据以下试验反应配方，在25μl终体积中在30℃下进行rsk2抑制试验(一式两份)15分钟：组分1：5μl经稀释的活性激酶靶标(每次反应100ng)组分2：5μl的rsks6k底物(每次反应0.5μg)组分3：5μl的激酶测定缓冲液
组分4：5μl的化合物1(各种浓度：0、0.1、1、10、100或1000nm，或者1、3、10、30、100、300nm)组分5：5μl的
33
p
‑
atp(5μm储备液，0.8μci；20μm终浓度)
[0188]
通过添加
33
p
‑
atp开始试验，并将反应混合物在30℃下孵育15分钟。孵育期后，通过将10μl反应混合物点样至multiscreen磷酸纤维素p81板上来终止试验。将multiscreen磷酸纤维素p81板在1％磷酸溶液中洗涤3次，每次约15分钟。在trilux闪烁计数器中在闪烁液的存在下对p81板上的放射性进行计数。
[0189]
为目标激酶建立空白对照，其包含除添加适当底物(用等体积的测定稀释缓冲液替换)之外的所有试验组分。通过减去空白对照值来确定每种目标激酶的校正活性。
[0190]
当在上述放射性同位素试验中测定化合物1时，证明了该化合物抑制rsk2的能力。化合物1：rsk2 ic
50
＝18nm。