一种动物源检测试剂盒的制作方法

1.本实用新型涉及检测用品领域，尤其涉及一种动物源检测试剂盒。


背景技术：

2.近年来，市场出现不法分子利用廉价低值肉制品，掺杂在牛肉羊肉驴肉中进行销售，常常以处理猪肉冒充牛肉，以鸡鸭肉掺到牛羊肉中，以老鼠、貂或狐狸肉冒充羊肉做羊肉串等等，大大损害消费者权益，同时也使人们对食品安全信任度降低，造成不良社会影响。因此急需开发一种快速准确技术和商业化试剂盒来进行动物源性成分的快速高通量筛查。
3.现阶段的检测方式，需要往复不停的添加和倒出预杂交液、杂交液、洗液、封闭液、显色液等，但是现阶段的检测试剂盒没有快速倒出液体的功能。


技术实现要素：

4.为了解决上述技术问题中的至少一个，本实用新型提供了一种动物源检测试剂盒。
5.根据本实用新型的一个方面，一种动物源检测试剂盒，包括：盒体和检测试剂组件，所述检测试剂组件均设置在所述盒体内；
6.所述盒体包括侧板、底板和分隔组件，四个所述侧板首尾相接构成矩形结构，四个所述侧板的下端分别与所述底板的四个侧边垂直固定连接，所述分隔组件将所述盒体内部分隔成为多个独立腔体；
7.所述检测试剂组件包括内参探针组件、对照探针组件和多个动物源检测组件，所述内参探针组件、所述对照探针组件和多个所述动物源检测组件分别设置在所述独立腔体内；
8.所述动物源检测试剂盒还包括垫块，所述垫块固定设置在位于所述盒体的其中一个角落的所述独立腔体内，所述垫块为四面体结构。
9.具体地，所述分隔组件包括横板和竖板，多个所述横板平行设置，且所述横板的两端分别与两个对称设置的所述侧板的内侧面垂直固定连接，多个所述竖板平行设置，且所述竖板的两端分别与另外两个对称设置的所述侧板的内侧面垂直固定连接，所述横板和所述竖板垂直固定连接。
10.具体地，相邻的两个所述横板之间的距离相等，相邻的两个所述竖板之间的距离相等，相邻的两个所述横板之间的距离等于相邻的两个所述竖板之间的距离。
11.具体地，所述横板的下端和所述竖板的下端均与所述底板的上侧面垂直固定连接，所述横板的下端和所述竖板的下端均设置有多个通槽，相邻的两个所述独立腔体通过所述通槽连通。
12.优选地，所述内参探针组件、所述动物源检测组件和所述对照探针组件均包括支持膜，所述支持膜放置在所述独立腔体内；
13.所述内参探针组件包括内参探针，所述内参探针设置在所述支持膜的上侧面；
14.所述动物源检测组件包括检测探针和支持膜，所述检测探针设置在所述支持膜的上侧面；
15.所述对照探针组件包括阳性探针、阴性探针和支持膜，所述阳性探针和所述阴性探针分别设置在两个不同的所述支持膜的上侧面。
16.具体地，所述检测探针包括猪探针、牛探针、羊探针、鸡探针、鸭探针、兔探针、驴探针、鼠探针。
17.进一步，所述垫块包括下侧面、两个垂直侧面和倾斜面，所述垫块的下侧面与所述底板的上侧面固定连接，所述垫块的两个垂直侧面与两个所述侧板的内侧面固定连接，所述垫块的倾斜面的侧边与所述侧板连接，所述垫块的倾斜面的底边与所述底板连接，所述侧板上设置有出药口，所述出药口设置在所述垂直侧面和所述倾斜面的交点的上方。
18.具体地，所述垫块的下侧面、所述垫块的两个垂直侧面均为直角三角形，所述垫块的倾斜面为等腰三角形。
19.优选地，所述出药口的下侧边与所述倾斜面的顶点重合。
20.根据本实用新型的至少一个实施方式，本实用新型通过在试剂盒内设置检测试剂组件，实现对不同动物源进行检测；达到一次检测多种可能动物源的目的；并通过设置垫块和出药口，可以方便进行液体的倾倒。
附图说明
21.附图示出了本实用新型的示例性实施方式，并与其说明一起用于解释本实用新型的原理，其中包括了这些附图以提供对本实用新型的进一步理解，并且附图包括在本说明书中并构成本说明书的一部分。
22.图1是根据本实用新型所述的一种动物源检测试剂盒的俯视图。
23.图2是图1的a
‑
a剖视图。
24.图3是根据本实用新型所述竖板的结构示意图。
25.附图标记：1
‑
盒体，2
‑
竖板，3
‑
横板,4
‑
独立腔体，5
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检测试剂组件，6
‑
垫块,7
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通槽，8
‑
出药口。
具体实施方式
26.下面结合附图和实施方式对本实用新型作进一步的详细说明。可以理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于解释相关内容，而非对本实用新型的限定。另外还需要说明的是，为了便于描述，附图中仅示出了与本实用新型相关的部分。
27.需要说明的是，在不冲突的情况下，本实用新型中的实施方式及实施方式中的特征可以相互组合。下面将参考附图并结合实施方式来详细说明本实用新型。
28.根据本实用新型的一种动物源检测试剂盒，包括：盒体1和检测试剂组件5，检测试剂组件5均设置在盒体1内；
29.盒体1包括侧板、底板和分隔组件，四个侧板首尾相接构成矩形结构，四个侧板的下端分别与底板的四个侧边垂直固定连接，分隔组件将盒体1内部分隔成为多个独立腔体4；
30.检测试剂组件5包括内参探针组件、对照探针组件和多个动物源检测组件，内参探针组件、对照探针组件和多个动物源检测组件分别设置在独立腔体4内。
31.在多个独立腔体4里放置检测试剂组件5，在使用时，对待检样本进行处理后，将其置于盒体1内，使其与检测试剂组件5进行反应，达到检测的目的。
32.其中，内参探针组件用于显示能进行检测。
33.对照探针组件用于进行对比检测，从而显示是否能正常检测。
34.动物源检测组件用于对样本进行检测，从而显示属于何种动物。
35.分隔组件包括横板3和竖板2，多个横板3平行设置，且横板3的两端分别与两个对称设置的侧板的内侧面垂直固定连接，多个竖板2平行设置，且竖板2的两端分别与另外两个对称设置在侧板的内侧面垂直固定连接，横板3和竖板2垂直固定连接。
36.相邻的两个横板3之间的距离相等，相邻的两个竖板2之间的距离相等，相邻的两个横板3之间的距离等于相邻的两个竖板2之间的距离。
37.如图1所示，通过设置横板3和竖板2，将盒体1分隔成为多个独立墙体，以便于在独立腔体4内放置内参探针组件、对照探针组件和多个动物源检测组件。
38.横板3的下端和竖板2的下端均与底板的上侧面垂直固定连接，横板3的下端和竖板2的下端均设置有多个通槽7，相邻的两个独立腔体4通过通槽7连通。
39.通过设置通槽7，使得各个独立腔体4内的待检测样本能够流通，避免出现某些探针组件或检测组件无法正常工作。
40.内参探针组件、动物源检测组件和对照探针组件均包括支持膜，支持膜放置在独立腔体4内；
41.内参探针组件包括内参探针，内参探针设置在支持膜的上侧面；
42.动物源检测组件包括检测探针和支持膜，检测探针设置在支持膜的上侧面；
43.对照探针组件包括阳性探针、阴性探针和支持膜，阳性探针和阴性探针分别设置在两个不同的支持膜的上侧面。
44.在需要制备探针组件和检测组件时，进行下述步骤：
45.将支持膜裁成1.2cm
×
1.8cm的膜条，裁好的膜条于双蒸水中浸泡15min，再用15
×
ssc浸泡15min，取出，置于滤纸上，60℃烘1.5hour，待膜条降温到室温后，将内参探针(5um)、11种检测探针(5um)、阳性探针(5um)以及阴性探针(5um)，按顺序将各探针点在膜条相应的位置上，膜条晾干后，置于80℃烘2小时以固定探针，处理好的膜芯片室温干燥处保存，完成了内参探针组件、动物源检测组件和对照探针组件的制作。
46.动物源性成分检测试剂盒通过带有生物素标记序列的反向引物或正向引物结合到模板上并延伸扩增得到大量的带有生物素标记的单链dna，该带有生物素标记的单链dna通过碱基互补原则对应地与探针杂交，经显色处理后，显示出相应颜色，进而得到检测结果。其检测结果具有特异强、假阳性率低、可视化程度高等特点。
47.阳性探针和阴性探针可用于评判显色结果的可靠性，带生物素标记的阳性寡核苷酸单链dna可与阳性探针结合，而不与阴性探针结合。因此，在膜芯片上的阳性探针位置有斑点而阴性探针位置没有斑点说明杂交结果可靠，检测结果可信。
48.检测探针包括猪探针、牛探针、羊探针、鸡探针、鸭探针、兔探针、驴探针、鼠探针。
49.上述只是一个实施例，还可以根据需求增加探针的数量，并灵活调节探针的种类，
并按照一定顺序进行固定。
50.试剂盒还包括垫块6，垫块6固定设置在位于盒体1的其中一个角落的独立腔体4内，垫块6为四面体结构，垫块6包括下侧面、两个垂直侧面和倾斜面，垫块6的下侧面与底板的上侧面固定连接，垫块6的两个垂直侧面与两个侧板的内侧面固定连接，垫块6的倾斜面的侧边与侧板连接，垫块6的倾斜面的底边与底板连接，侧板上设置有出药口8，出药口8设置在垂直侧面和倾斜面的交点的上方，垫块6的下侧面、垫块6的两个垂直侧面均为直角三角形，垫块6的倾斜面为等腰三角形，出药口8的下侧边与倾斜面的顶点重合。
51.检测过程中需要使用多种试剂，此装置便于将液体排出，对试剂进行更换。
52.具体使用场景和使用方法如下：
53.预杂交：膜条于42℃预杂交液(5
×
ssc，0.1％sds(十二烷基磺酸钠)，10
×
denhardt’s)中预杂交1小时，然后倾斜盒体1，将预杂交液从出药口8排出。之后将杂交液(5
×
ssc，0.1％sds，5
×
denhardt’s，50％去离子甲酰胺，100μg/ml酵母trna)中倒入盒体1内，并保持42℃，1小时，然后倾斜盒体1，将杂交液倒出。
54.杂交：取40μl多重pcr产物(即，经过处理的待检测样本)，并加入1μl的阳性寡核苷酸单链dna(10um)，100℃水浴变性5分钟后置于冰上，之后加入2ml杂交液中，42℃杂交16小时。用洗液1(2
×
ssc，0.1％sds)、洗液2(0.5
×
ssc，0.1％sds)42℃各洗膜条两次，每次10分钟。
55.封闭：将封闭液(3％bsa(牛血清白蛋白)，100mm tris
‑
hcl，ph7.5，150mm nacl)倒入盒体1内，并保持37℃封闭30分钟，然后倾斜盒体1，将封闭液从出药口8倒出，之后将酶联液(用封闭液1:5000稀释链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶)中倒入盒体1内，并保持37℃30分钟，然后倾斜盒体1，倒出酶联液。
56.显色：依次倒入/倒出洗液(100mm tris
‑
hcl，ph7.5，150mm nacl)、洗液(100mm tris
‑
hcl，ph9.5，100mm nacl，100mm mgcl 2)各漂洗膜条3次，每次5分钟，之后放入tmb显色液(100mm柠檬酸钠ph5.4，0.1mg/ml四甲基联苯胺tmb，1:1600体积比的h 2 o 2(3％))中，避光显色10～15分钟，依照杂交点的显色情况判定结果。
57.通过设置出药口8，可以方便的进行液体的倒出。
58.在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例/方式”、“一些实施例/方式”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例/方式或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本技术的至少一个实施例/方式或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例/方式或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例/方式或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例/方式或示例以及不同实施例/方式或示例的特征进行结合和组合。
59.此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。在本技术的描述中，“多个”的含义是至少两个，例如两个，三个等，除非另有明确具体的限定。
60.本领域的技术人员应当理解，上述实施方式仅仅是为了清楚地说明本实用新型，而并非是对本实用新型的范围进行限定。对于所属领域的技术人员而言，在上述公开的基
础上还可以做出其它变化或变型，并且这些变化或变型仍处于本实用新型的范围内。