本申请属于生物，具体涉及一种重组海参肽raj-hrp30及其在抗肿瘤或抗肿瘤药物制备中的应用。
背景技术：
0、技术背景
1、据globocan2020在线数据库的统计，截至2020年底，全球癌症新增病例达到1930万例。其中，我国癌症新增病例约占全球新增病例的23.4％。与发达国家相比，我国癌症发病率较低，但预后较差，且由于癌症早期诊断率低，以及不同地区实施的临床癌症治疗策略的不统一导致我国的癌症治愈率更低。我国正处于癌症谱系从发展中国家向发达国家转变的癌症转型阶段，结直肠癌、前列腺癌和女性乳腺癌的癌症负担迅速增加，消化道癌症的发病率也很高。预计未来几年我国癌症风险仍呈上升趋势。
2、目前，抗癌药物分为三大类别，包括：常规化疗药物、激素治疗药物、分子靶向药物。在这三大类抗癌药物中，化疗药物和激素治疗药物因其毒副作用强而限制了其治疗效果，而分子靶向药物则因其疗效好、副作用小的优势成为抗肿瘤药物市场的发展趋势，其已占全球抗肿瘤药物市场的60％份额。但不容忽视的是，靶向药物大多数为单抗类产品，具有拮抗肿瘤类型单一、研发代价高、生产成本高、销售价格高的特点，这严重限制了患者的广泛使用。因此，寻找新型抗癌药物成为全球相关领域科研工作者的神圣使命。
3、由于陆地资源有限，海洋这个大型生态系统中所蕴含的生命系统以其自身所富有的各种生物活性物质吸引了生物制药研发人员的目光，向海洋要药俨然成为寻找新型抗肿瘤药物的热点。仿刺参属棘皮动物门、海参纲、楯手目、刺参科，是辽宁地区重要的海珍品经济养殖品种，关于其活性成分的研究还处于起步阶段。在海参的众多保健功效中，其抗癌作用引起广泛关注。鉴于此，提出本申请。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本课题组对前期发现于仿刺参(apostichopus japonicus)cdna文库的抗肿瘤活性肽raj-hrp进行一系列突变改造和筛选测试。由于蛋白质一级结构的改变会影响其高级结构，继而影响其功能，故无法通过序列的变化简单推测其抗肿瘤功能的强弱，本课题组构建了不同表达序列的突变体，经活性比较分析发现，本申请raj-hrp30不仅具有更为高效抗肿瘤活性，而且作用靶点与野生型(raj-hrp)不同：raj-hrp作用靶点为egfr受体，而raj-hrp30作用靶点为fgfr受体。raj-hrp30一级结构由30个氨基酸组成且富含组氨酸，分子量为3.92kda，进一步研究表明，raj-hrp30具有剂量依赖性抑制肿瘤细胞功能，这种抑制作用是通过抑制肿瘤细胞黏附、迁移、浸润及诱导肿瘤细胞凋亡实现的，因其作用靶点为fgfr受体，属于一种fgfr抑制剂，raj-hrp30有望应用于fgfr抑制剂类靶向抗肿瘤药物制备领域。
2、因此，本申请至少具有如下目的：
3、本申请的第一目的在于提供一种新型重组海参肽raj-hrp30及其编码基因；
4、本申请的第二目的在于提供一种所述重组海参肽raj-hrp30的制备方法；
5、本申请的第三目的在于提供所述重组海参肽raj-hrp30在抗肿瘤或制备抗肿瘤药物中的应用；
6、本申请的第四目的在于提供基于所述重组海参肽raj-hrp30的抗肿瘤活性物质的筛选方法。
7、为实现上述目的，本申请具体提供如下技术方案：
8、本申请首先提供一种重组海参肽raj-hrp30，其氨基酸序列为如下任一：
9、1)包含seq id no.4所示序列；
10、2)满足氨基酸保守替代基础上，与seq id no.4具有至少90％以上同源性。
11、本申请还提供一种核苷酸，编码上述所述的重组海参肽。
12、进一步的，所述核苷酸序列如seq id no.5所示。
13、本申请还提供一种组合物，包含上述所述的重组海参肽或核苷酸。
14、本申请还提供一种重组载体，包括上述所述的核苷酸序列；
15、优选的，所述载体为克隆载体或表达载体；
16、更优选的，所述表达载体为真核表达载体或原核表达载体。
17、本申请还提供一种重组细胞，包含上述所述的重组载体。
18、本申请还提供一种上述所述重组海参肽raj-hrp30的制备方法，包含利用上述所述重组载体进行表达的步骤；
19、优选的，所述方法进一步包括分离和纯化步骤。
20、本申请还提供上述所述的重组海参肽raj-hrp30的如下任一应用：
21、1)在抗肿瘤活性中的应用；
22、2)在制备抗肿瘤药物中的应用；
23、优选的，在制备以fgfr为靶点的抗肿瘤药物中的应用；
24、3)在筛选肿瘤抑制中的应用；
25、优选的，以fgfr为靶点的肿瘤抑制剂中的应用；
26、4)在抑制肿瘤细胞生长或增殖中的应用(体内或体外)；
27、5)在抗肿瘤活性评价中的应用。
28、本申请还提供上述所述的核苷酸的如下任一应用：
29、1)在抗肿瘤活性中的应用；
30、2)在制备抗肿瘤药物中的应用；
31、优选的，在制备以fgfr为靶点的抗肿瘤药物中的应用；
32、3)在筛选肿瘤抑制中的应用；
33、优选的，以fgfr为靶点的肿瘤抑制剂中的应用；
34、4)在抑制肿瘤细胞生长或增殖中的应用(体内或体外)；
35、5)在抗肿瘤活性评价中的应用。
36、本申请还提供一种在体外或体内抑制肿瘤细胞的方法，其特征在于，包括给予或表达上述所述重组海参肽的步骤。
37、本申请至少具有如下有益技术效果：
38、本申请发现，raj-hrp30具有剂量依赖性抑制肿瘤细胞功能，这种抑制作用是通过抑制肿瘤细胞黏附、迁移、浸润及诱导肿瘤细胞凋亡实现的，而且其作用靶点为fgfr受体，是一种fgfr抑制剂。raj-hrp30有望应用于fgfr抑制剂类靶向抗肿瘤药物制备领域，而且由于其是可原核重组表达的小肽，相较于单克隆抗体类靶向药物，还具有在生产制备成本更低廉，且更容易实现高产等方面优势。
1.一种重组海参肽raj-hrp30，其特征在于，其氨基酸序列为如下任一：
2.一种核苷酸，其特征在于，编码权利要求1所述的重组海参肽。
3.根据权利要求2所述的核苷酸，其特征在于，所述核苷酸序列如seq id no.5所示。
4.一种组合物，其特征在于，包含权利要求1-3任一所述的重组海参肽或核苷酸。
5.一种重组载体，其特征在于，包括权利要求2所述的核苷酸序列；
6.一种重组细胞，其特征在于，包含权利要求5所述的重组载体。
7.权利要求1所述重组海参肽raj-hrp30的制备方法，其特征在于，包含利用权利要求5所述重组载体进行表达的步骤；
8.权利要求1所述的重组海参肽raj-hrp30的如下任一应用：
9.权利要求2-3任一所述的核苷酸的如下任一应用：
10.一种在体外或体内抑制肿瘤细胞的方法，其特征在于，包括给予或表达权利要求1所述重组海参肽的步骤。
