本发明属于植物基因工程。更具体地,涉及蛋白foupe7在降低香蕉枯萎病菌致病力中的应用。
背景技术:
1、香蕉枯萎病(fusarium wilt)又称巴拿马病(panama disease),是一种毁灭性的土传病害,其病原菌为尖孢镰刀菌古巴专化型(fusarium oxysporum f.sp.cubense,foc),也称香蕉枯萎病菌。现已发现的foc小种中,4号小种(foc4)的危害性最大,其能够侵染香牙蕉、龙牙蕉、大蕉等几乎所有的栽培品种,给香蕉产业造成了巨大的经济损失。
2、目前,普通化学防治对香蕉枯萎病的防治效果并不理想。而开展香蕉枯萎病菌的致病机理研究,寻找调控香蕉枯萎病菌致病力的蛋白,以此为靶点开发防治香蕉枯萎病的制剂,或是有效防治香蕉枯萎病的关键。
技术实现思路
1、本发明提供了蛋白foupe7在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用,丰富了与香蕉枯萎病菌致病力相关的蛋白数据库,有利于香蕉枯萎病防治制剂的开发。
2、本发明的第一个目的是提供蛋白foupe7在降低香蕉枯萎病菌致病力中的应用。
3、本发明的第二个目的是提供蛋白foupe7在维持香蕉枯萎病菌抗氧化胁迫能力中的应用。
4、本发明的第三个目的是提供蛋白foupe7在维持香蕉枯萎病菌细胞壁完整性方面的应用。
5、本发明的第四个目的是提供抑制蛋白foupe7表达的制剂或用于敲除编码蛋白foupe7的基因的制剂在降低香蕉枯萎病菌致病力中的应用。
6、本发明的第五个目的是提供抑制蛋白foupe7表达的制剂或用于敲除编码蛋白foupe7的基因的制剂在制备降低香蕉枯萎病菌致病力的产品中的应用。
7、本发明的第六个目的是提供抑制蛋白foupe7表达的制剂或用于敲除编码蛋白foupe7的基因的制剂在防治香蕉枯萎病中的应用。
8、本发明的第七个目的是提供抑制蛋白foupe7表达的制剂或用于敲除编码蛋白foupe7的基因的制剂在制备防治香蕉枯萎病的产品中的应用。
9、本发明的第八个目的是提供一种降低香蕉枯萎病菌致病力的方法。
10、本发明的第九个目的是提供一种防治香蕉枯萎病的方法。
11、本发明上述目的通过以下技术方案实现:
12、本发明所述蛋白foupe7是一个未知蛋白,不含已知结构域,仅知其在镰刀菌属中具有高度保守性。本发明通过构建香蕉枯萎病菌基因foupe7的敲除质粒和回补质粒,利用所述敲除质粒和回补质粒分别转化对应原生质体,筛选得到foupe7敲除突变体和回补突变体发现并进行致病力分析发现,敲除基因foupe7会显著降低香蕉枯萎病菌的致病力,而将基因回补回去后,香蕉枯萎病菌的致病力恢复且与野生型相当,表明蛋白foupe7为香蕉枯萎病菌致病力相关蛋白,调控香蕉枯萎病菌的致病力。此外,敲除基因foupe7还会影响香蕉枯萎病菌的细胞壁完整性和抗氧化胁迫的能力。因此,本发明请求保护以下应用:
13、本发明请求保护蛋白foupe7在降低香蕉枯萎病菌致病力中的应用。
14、具体地,所述应用是通过抑制蛋白foupe7的表达或敲除编码蛋白foupe7的基因实现的。
15、本发明还请求保护所述蛋白foupe7在维持香蕉枯萎病菌抗氧化胁迫能力中的应用。
16、本发明还请求保护所述蛋白foupe7在维持香蕉枯萎病菌细胞壁完整性方面的应用。
17、本发明还请求保护抑制蛋白foupe7表达的制剂或用于敲除编码蛋白foupe7的基因的制剂在降低香蕉枯萎病菌致病力中的应用。
18、本发明还请求保护抑制蛋白foupe7表达的制剂或用于敲除编码蛋白foupe7的基因的制剂在制备降低香蕉枯萎病菌致病力的产品中的应用。
19、鉴于香蕉枯萎病是由香蕉枯萎病菌引起的病害,降低香蕉枯萎病的致病力可以预防香蕉枯萎病的发生,减轻香蕉枯萎病的危害。而敲除香蕉枯萎病菌基因foupe7或抑制基因foupe7表达均可以使蛋白foupe7的表达受影响,进而降低香蕉枯萎病菌的致病力。因此,本发明还请求保护抑制蛋白foupe7表达的制剂或用于敲除编码蛋白foupe7的基因的制剂在防治香蕉枯萎病中的应用。
20、本发明还请求保护抑制蛋白foupe7表达的制剂或用于敲除编码蛋白foupe7的基因的制剂在制备防治香蕉枯萎病的产品中的应用。
21、可选地,所述抑制蛋白foupe7表达的试剂为靶向基因foupe7的sirna。
22、具体地,所述用于敲除编码蛋白foupe7的基因的制剂包括其敲除质粒。
23、作为其中的一种实施方式,所述敲除质粒是基于丝状真菌表达载体pct74构建得到。
24、本发明还提供了一种降低香蕉枯萎病菌致病力的方法,所述方法为:阻断或抑制香蕉枯萎病菌蛋白foupe7的表达。
25、本发明还提供了一种防治香蕉枯萎病的方法,所述方法为,阻断或抑制香蕉枯萎病菌蛋白foupe7的表达。
26、具体地,本发明所述蛋白foupe7的氨基酸序列如seq id no:2所示。
27、具体地,编码所述蛋白foupe7的基因的核苷酸序列如seq id no:1所示。
28、具体地,所述香蕉枯萎病由香蕉枯萎病菌引起,通过阻断或抑制香蕉枯萎病菌蛋白foupe7的表达,降低香蕉枯萎病菌的致病力来防治香蕉枯萎病。
29、更具体地,所述香蕉枯萎病菌为香蕉枯萎病菌4号小种。
30、本发明具有以下有益效果:
31、本发明通过构建编码香蕉枯萎病菌蛋白foupe7的基因(foupe7)的敲除质粒和回补质粒,利用所述敲除质粒和回补质粒分别转化对应原生质体,筛选得到foupe7敲除突变体和回补突变体发现并进行致病力分析发现,敲除基因foupe7会显著降低香蕉枯萎病菌的致病力,而将基因回补回去后,香蕉枯萎病菌的致病力恢复且与野生型相当,表明蛋白foupe7为香蕉枯萎病菌致病力相关蛋白,调控香蕉枯萎病菌的致病力,可将其作为靶点用于香蕉枯萎病的防治。本发明为香蕉枯萎病菌的防治提供了新的靶点,有利于香蕉枯萎病防治制剂的开发。
1.蛋白foupe7在降低香蕉枯萎病菌致病力中的应用,其特征在于,所述蛋白的氨基酸序列如seq id no:2所示。
2.权利要求1中所述的蛋白foupe7在维持香蕉枯萎病菌抗氧化胁迫能力中的应用。
3.权利要求1中所述的蛋白foupe7在维持香蕉枯萎病菌细胞壁完整性方面的应用。
4.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述应用是通过抑制蛋白foupe7的表达或敲除编码蛋白foupe7的基因实现的。
5.抑制蛋白foupe7表达的制剂或用于敲除编码蛋白foupe7的基因的制剂在降低香蕉枯萎病菌致病力中的应用,其特征在于,所述蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
6.抑制蛋白foupe7表达的制剂或用于敲除编码蛋白foupe7的基因的制剂在制备降低香蕉枯萎病菌致病力的产品中的应用,其特征在于,所述蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
7.抑制蛋白foupe7表达的制剂或用于敲除编码蛋白foupe7的基因的制剂在防治香蕉枯萎病中的应用,其特征在于,所述蛋白的氨基酸序列如seq id no:2所示。
8.抑制蛋白foupe7表达的制剂或用于敲除编码蛋白foupe7的基因的制剂在制备防治香蕉枯萎病的产品中的应用,其特征在于,所述蛋白的氨基酸序列如seq id no:2所示。
9.一种降低香蕉枯萎病菌致病力的方法,其特征在于,阻断或抑制香蕉枯萎病菌蛋白foupe7的表达;所述蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
10.一种防治香蕉枯萎病的方法,其特征在于,阻断或抑制香蕉枯萎病菌蛋白foupe7的表达。
