本发明属于海洋天然产物化学领域，具体涉及喹诺酮类化合物及其制备方法和在制备生物被膜抑制剂药物中的应用。
背景技术
0、
背景技术：
1、海洋沉积物是地球上分布最为广泛，且微生物贮存量最多的介质。随着深海勘探技术的不断发展，发现深海海底具有多种独特的生境类型(如热液口、冷泉、山脊、海盆等)，并估计深海中蕴含地球上10％-50％的微生物。从典型的深海极端生境中，分离的微生物相较于陆生微生物具有更加独特的性质，如耐(嗜)盐、耐(嗜)低温等。在对菲律宾海盆沉积物来源微生物研究过程中，我们分离得到一类带有脂肪族侧链的喹诺酮类化合物，可显著抑制铜绿假单胞菌生物被膜形成，进一步丰富了对深海海盆来源微生物资源的认识，也为生物被膜抑制剂药物的发现提供了新的候选化合物资源。
技术实现思路
1、本发明的第一个目的是带有脂肪族侧链的喹诺酮类化合物(1-4)。
2、本发明涉及的喹诺酮类化合物，其结构如式(ⅰ)所示：
3、
4、式(ⅰ)。
5、本发明人通过对菲律宾海盆沉积物来源鲁戈斯芽孢杆菌bacillus rugosusscsio 41395液体发酵提取物分离纯化，从中获得了喹诺酮类化合物(1-4)，其中化合物1和2为新天然化合物，具体结构如式(ⅰ)所示。通过对喹诺酮类化合物(1-4)的抑制生物被膜活性评价，发现化合物4对铜绿假单胞菌生物被摸，群体感应系统和铁载体等致病菌毒力调控系统有明显的抑制效果，可以做为抗菌药物开发的先导化合物。
6、本发明的第二个目的是提供菲律宾海盆沉积物来源鲁戈斯芽孢杆菌bacillusrugosus scsio 41395，其保藏编号为gdmcc no：63981。
7、本发明的第三个目的是提供上述鲁戈斯芽孢杆菌scsio 41395在制备喹诺酮类化合物的应用。
8、本发明的第四个目的是提供一种制备喹诺酮类化合物的方法，其是从鲁戈斯芽孢杆菌scsio 41395的发酵产物中制备分离得到的。
9、优选，具体步骤为：
10、制备鲁戈斯芽孢杆菌scsio 41395的发酵产物；
11、将发酵产物，用乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯萃取液，浓缩得到粗提物；粗提物进行反相中压分离，采用h2o-ch3oh体系，按体积比从95％:5％-0％:100％，收集h2o-ch3oh体积比为45:55洗脱的馏分fr4，再次进行反相中压分离，采用h2o-ch3oh体系，按体积比从95％:5％-0％:100％，收集h2o-ch3oh体积比为40:60洗脱的馏分fr4-6采用半制备高效液相色谱进行分离，获得化合物1、2、3、4。
12、优选，所述的制备鲁戈斯芽孢杆菌scsio 41395的发酵产物是将bacillusrugosus scsio 41395接种到种子培养基中，28℃，180rpm，培养3天制得种子液，将种子液接入到发酵培养基中，发酵得到鲁戈斯芽孢杆菌scsio 41395的发酵产物，所述的种子培养基和发酵培养基是每1000ml培养基是这样配制的：可溶性淀粉1g、酵母浸膏0.4g、蛋白胨0.2g，磷酸氢二钾质量分数0.05％，葡萄糖质量分数2％，氯化钙质量分数0.05％，溴化钾质量分数0.05％，海盐质量分数3.2％，溶剂为水。
13、优选，所述的采用半制备高效液相色谱进行分离是在250nm和320nm波长监测下，以πnap分离柱为固定相，流速为3ml/min，在49:51比例的乙腈和含0.4％甲酸的超纯水为流动相时，保留时间32min的组分为化合物2；在62:38比例的甲醇和超纯水为流动相时，保留时间40min的为组分化合物1；在70:30比例的甲醇和超纯水为流动相时，保留时间27min的为组分化合物3，保留时间29min的为组分化合物4。
14、本发明的第五个目的是提供喹诺酮类化合物1-4在制备生物被膜抑制剂药物中的应用。
15、优选，所述的生物被膜抑制剂是铜绿假单胞菌的生物被膜抑制剂。
16、本发明公开了菲律宾海盆沉积物来源鲁戈斯芽孢杆菌bacillus rugosus scsio41395制备喹诺酮类化合物方法和在制备抗菌药物中的应用。本发明从鲁戈斯芽孢杆菌bacillus rugosus scsio 41395中制备得到了4个带有脂肪族侧链的喹诺酮类化合物[1-4]如式(ⅰ)所示)，其中化合物1和2为新天然产物，化合物4显著抑制铜绿假单胞菌生物被膜形成，群体感应系统和铁载体等致病菌毒力调控系统等，可用于开发抗菌药物。因此本发明为深海细菌bacillus rugosus scsio 41395提供了新的应用，为开发新的深海微生物来源抗菌药物提供了备选先导化合物。
17、鲁戈斯芽孢杆菌bacillus rugosus scsio 41395于2023年11月05日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(gdmcc)，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮政编码：510070，其保藏编号为gdmcc no：63981。
1.喹诺酮类化合物，其结构如式(ⅰ)所示：
2.鲁戈斯芽孢杆菌bacillus rugosus scsio 41395，其保藏编号为gdmcc no：63981。
3.权利要求2所述的鲁戈斯芽孢杆菌scsio 41395在制备权利要求1所述的喹诺酮类化合物中的应用。
4.一种制备权利要求1所述的喹诺酮类化合物的方法，其特征在于，是从权利要求2所述的鲁戈斯芽孢杆菌scsio 41395的发酵产物中制备分离得到的。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，具体步骤为：
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的制备鲁戈斯芽孢杆菌scsio 41395的发酵产物是将bacillus rugosus scsio 41395接种到种子培养基中，28℃，180rpm，培养3天制得种子液，将种子液接入到发酵培养基中，发酵得到鲁戈斯芽孢杆菌scsio 41395的发酵产物，所述的种子培养基和发酵培养基是每1000ml培养基是这样配制的：可溶性淀粉1g、酵母浸膏0.4g、蛋白胨0.2g，磷酸氢二钾质量分数0.05％，葡萄糖质量分数2％，氯化钙质量分数0.05％，溴化钾质量分数0.05％，海盐质量分数3.2％，溶剂为水。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的采用半制备高效液相色谱进行分离是在250nm和320nm波长监测下，以πnap分离柱为固定相，流速为3ml/min，在49:51比例的乙腈和含0.4％甲酸的超纯水为流动相时，保留时间32min的组分为化合物2；在62:38比例的甲醇和超纯水为流动相时，保留时间40min的为组分化合物1；在70:30比例的甲醇和超纯水为流动相时，保留时间27min的为组分化合物3，保留时间29min的为组分化合物4。
8.权利要求1所述的喹诺酮类化合物在制备生物被膜抑制剂药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述的生物被膜抑制剂是铜绿假单胞菌的生物被膜抑制剂。
