本发明属于中药组合物,具体是指一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物及其制备方法。
背景技术:
1、桦褐孔菌,俗称桦树茸或桦树菇,是一种珍稀的药食两用菌,化学成分复杂,其多糖已被证明是最主要的活性成分之一,现代药理学表明,桦褐孔菌多糖具有抗肿瘤、降血糖、免疫调节、抗炎、消结节和抗氧化等药理活性。
2、现有报道中大多以粗提多糖成分为研究对象,而粗多糖含有蛋白质、色素、无机盐等非多糖物质,需采取脱蛋白、脱色素、去离子、分级等手段纯化粗多糖,目前,主要有tca法、sevage法、盐酸法,即利用蛋白质在有机溶剂中变性原理除去蛋白,但操作繁琐,溶剂消耗量大且不够彻底,效率不高,须反复多次;活性炭法、聚酰胺法和双氧水法以及大孔树脂法等,成本较高,在公开号为cn202011478246.1的专利中公开了一种桦褐孔菌多糖的提取和纯化方法,其依次通过乙酸乙酯和醇提,以及超声和纤维素酶酶解脱纤维素,木瓜蛋白酶脱蛋白,聚酰胺树脂柱脱色和ab-8树脂脱色的方法,以提高桦褐孔菌多糖的得率,但采用聚酰胺树脂柱脱色和ab-8树脂脱色的方法对于有机物的损耗率非常高。
技术实现思路
1、针对上述情况,为克服现有技术的缺陷,本发明提供了一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物及其制备方法,为了减轻患者服用中药时的心理压力,本发明提出通过壳包裹微丸的方式,实现了桦褐孔菌萃取组合物在胃肠中的持续释放;同时,中药组合物合理配伍,采用君臣佐使原则,起到了协同促进作用;此外,加入复合酶快速降解细胞壁,生成可溶性糖肽和多糖,避免了柱层析等损耗率过大的纯化。
2、本发明提供一种桦褐孔菌多糖及其提取方法,其通过离子液体结合复合酶酶解的方法,可以有效提高桦褐孔菌多糖的产率,特别是能够显著提高水溶性桦褐孔菌多糖的提取率。
3、为了实现上述目的,本发明采取的技术方案如下:本发明提出了一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物及其制备方法,所述桦褐孔菌萃取组合物包括如下重量份的组分:
4、桦褐孔菌多糖:30-70份;
5、灰树花提取物:7-30份;
6、猴头菇提取物:6-25份;
7、蒲公英提取物:5-15份;
8、肉桂提取物:3-10份;
9、桑叶提取物:10-20份;
10、低聚木糖:10-20份。
11、优选地,所述桦褐孔菌萃取组合物包括如下重量份的组分:
12、桦褐孔菌多糖:50-57份;
13、灰树花提取物:14-21份;
14、猴头菇提取物:8-15份;
15、蒲公英提取物:5-12份;
16、肉桂提取物:4-10份;
17、桑叶提取物:11-18份;
18、低聚木糖:12-20份。
19、进一步地,所述桦褐孔菌萃取组合物还包括外壳,所述外壳包括羧甲基纤维素、海藻酸钠和cacl2。
20、本发明还提供了一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物的制备方法,具体包括如下步骤:
21、(1)称取配制好的桦褐孔菌萃取组合物,加入10倍重量的水,浸泡2h;
22、(2)于100℃下煎煮30min后过滤,减压浓缩,真空冷冻干燥,过40目筛,即得桦褐孔菌萃取组合物冻干粉;
23、(3)桦褐孔菌萃取组合物冻干粉中加入无菌水捏合制备软材,至颜色均一且湿度适宜;
24、(4)将软材置于挤出滚圆机,将滚圆后的微丸放置于40℃烘箱烘干12h,过筛,得到桦褐孔菌萃取组合物微丸;
25、(5)将桦褐孔菌萃取组合物微丸均匀分散到羧甲基纤维素、海藻酸钠组成的溶液中,使用5ml注射器将混合物滴入cacl2溶液中;
26、(6)用去离子水冲洗,即得到壳型微丸桦褐孔菌萃取组合物。
27、优选地,步骤(4)中挤出滚圆机需设置孔板直径为1mm,挤出速度为30rpm/min,滚圆速度为1400rpm/min,滚圆时间为5min。
28、优选地,步骤(5)中羧甲基纤维素的浓度为8%(v/v),海藻酸钠的浓度为5%(v/v)。
29、优选地,步骤(5)中cacl2溶液的浓度为0.03mol/l,体积为80ml。
30、进一步地,所述桦褐孔菌多糖的制备方法具体包括如下步骤:
31、(1)将桦褐孔菌子实体粉碎过120目筛,60℃热风干燥至恒重,按料液比1:40加入无菌水,100℃提取30min,重复2次,合并提取液浓缩至原体积的1/8,冷却后7200r/min离心10min,取上清液;
32、(2)调整上清液ph值,加入纤维素酶和溶菌酶搅拌酶解,过滤得酶解提取液;
33、(3)酶解提取液中加入4倍体积的95%(v/v)乙醇,在4℃下醇沉12h,7200r/min离心10min收集沉淀,乙醇浸泡提取3次,减压浓缩,得乙醇浸提物;
34、(4)用水将乙醇浸提物分散成悬浊液,用98%(v/v)乙酸乙酯萃取,减压浓缩,真空冷冻干燥,得到桦褐孔菌多糖。
35、优选地,步骤(2)中所述上清液ph值为6。
36、优选地,步骤(2)中搅拌条件为40℃下搅拌1.5h。
37、优选地,步骤(2)中需控制纤维素酶活力为58.8u/ml、溶菌酶活力为70.5u/ml。
38、本发明取得的有益效果如下:
39、(1)本发明提出的中药组合物具有以下功效:桦褐孔菌:活血散结,疏肝解郁,益气养血,健脾和胃,抗肿瘤,提高机体防御和抗病能力,调节肠道菌群;灰树花:性平,味甘,功效:益气健脾,补虚扶正,清热解毒,治脾虚气弱,动脉硬化,降血糖,提高免疫力,缓解疼痛;猴头菇:性平,味甘,功效:健脾养胃,益气生津,治体虚乏力,慢性胃炎;蒲公英:性寒,味苦、甘,功效:清热解毒,保肝利尿,消痈散结,祛湿热,治急性乳腺炎,淋巴腺炎,急性结膜炎,急性扁桃体炎,尿路感染;肉桂:性热,味辛、甘,功效:补火助阳,暖脾胃,除积冷,补肾虚,活血通经,治肢冷脉微,亡阳虚脱,虚阳浮越;桑叶:性寒,味苦、甘,功效:祛风清热,凉血明目,抗炎利尿,治风温发热,头痛,肺热咳嗽,风痹;低聚木糖:抑制病原菌和腹泻,护肝降脂,增强免疫力,抗癌;
40、(2)本发明创新性地采用壳型微丸,改善了中药口感,同时提高了载药量、降低用药次数;
41、(3)海藻酸钙凝胶常用于构建壳结构,但在肠道中非常不稳定,本发明通过加入羧甲基纤维素,与海藻酸钙结合制备成复合凝胶,两者之间的氢键作用,使聚合物链彼此更紧密,从而减小凝胶的孔径,调节壳的微观结构,具有更高的稳定性和ph敏感性;
42、(4)采用相对低温的萃取方式,保留更多的黄酮类及多糖类,本发明制备的桦褐孔菌萃取组合物壳型微丸具有更好的消结节及增强免疫力的保健功效;
43、(5)本发明采用纤维素酶和溶菌酶作为复合酶酶解,溶菌酶主要通过破坏细胞壁中的n-乙酰胞壁酸和n-乙酰氨基葡萄糖之间的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成具有生物药理活性的可溶性糖肽;纤维素酶降解纤维素成葡萄糖;本发明通过纤维素酶和溶菌酶的组合,能够快速降解细胞壁,同时生成可溶性糖肽和多糖,利于与大分子有机物分离,避免了柱层析等损耗率过大的纯化;
1.一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物的制备方法,其特征在于,具体包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物的制备方法,其特征在于:步骤(4)中挤出滚圆机需设置孔板直径为1mm,挤出速度为30rpm/min,滚圆速度为1400rpm/min,滚圆时间为5min。
3.根据权利要求2所述的一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物的制备方法,其特征在于:步骤(5)中羧甲基纤维素的浓度为8%(v/v),海藻酸钠的浓度为5%(v/v)。
4.根据权利要求3所述的一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物的制备方法,其特征在于,步骤(5)中cacl2溶液的浓度为0.03mol/l,体积为80ml。
5.根据权利要求4所述的一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物的制备方法,其特征在于,所述桦褐孔菌多糖的制备方法具体包括如下步骤:
6.根据权利要求5所述的一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物的制备方法,其特征在于:步骤(2)中所述上清液ph值为6。
7.根据权利要求6所述的一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物的制备方法,其特征在于:步骤(2)中搅拌条件为40℃下搅拌1.5h。
8.一种根据权利要求7所述的一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物的制备方法,其特征在于:步骤(2)中需控制纤维素酶活力为58.8u/ml、溶菌酶活力为70.5u/ml。
9.根据权利要求8所述的一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物的制备方法,其特征在于,所述桦褐孔菌萃取组合物包括如下重量份的组分:桦褐孔菌多糖50-57份、灰树花提取物14-21份、猴头菇提取物8-15份、蒲公英提取物5-12份、肉桂提取物4-10份、桑叶提取物11-18份、低聚木糖12-20份。
10.根据权利要求9所述的一种消结节提高免疫力的桦褐孔菌萃取组合物的制备方法,其特征在于:所述桦褐孔菌萃取组合物还包括外壳,所述外壳包括羧甲基纤维素、海藻酸钠和cacl2。
