本发明属于食品检测领域，具体涉及一种乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法。
背景技术：
1、1-脱氧野尻霉素(dnj)又名1-脱氧烯胺霉素、1-脱氧杂氮-d-葡萄糖，是一种强效α-葡萄糖苷酶抑制剂，可以有效抑制人体糖分的转化，降低血液中的糖含量。除降糖作用外，该物质还有降血压、降血脂、护肝、抗癌、抗氧化等多种作用，因而目前有许多食品生产商将其加入食品中，用于生产具有降糖作用的低热量食品，深受消费者青睐。
2、1-脱氧野尻霉素存在于桑科植物morus alba l.的枝、叶、根中，目前针对1-脱氧野尻霉素的检测方法主要有液相法(分为高效液相色谱-荧光法和高效液相色谱-紫外法)、分光光度法(碘-碘化钾显色)、离子色谱法。其中离子色谱法具有样品处理简单、易操作的特点，但是其分离效果和可靠性都不够理想，而分光光度法无法进行分离，在处理复杂样品时，会有很大的误差。
3、中国专利cn201410108293.5(公开日：2014年06月18日)公开了一种桑叶复方制剂的预处理方法及1-脱氧野尻霉素的检测方法，该法先将桑叶复方制剂的溶液、缓冲溶液和芴甲氧羰酰氯的溶液混合均匀，再与甘氨酸混合均匀，过滤完成前处理得到待测液，然后再将待测液采用高效液相色谱-紫外法进行测试分析。该专利虽然能对桑叶制剂的中1-脱氧野尻霉素进行检测，但由于乳制品中包含蛋白质、乳糖等成分，相较于桑叶制剂，其组成更加复杂。另外乳制品中存在的1-脱氧野尻霉素是人工添加的，其含量较低(1～100mg或更低)，因而高效液相色谱-紫外法很难适用于乳制品中1-脱氧野尻霉素含量的测定。基于此，本领域亟需一种能够检测乳制品中1-脱氧野尻霉素含量的方法。
技术实现思路
1、鉴于上述现有技术的不足，本发明提供了一种乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法，能够准确检测出乳制品中低含量的1-脱氧野尻霉素。
2、本发明提供一种乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法，包括以下步骤：
3、将待测样品与乙腈混合，沉淀所述待测样品中的蛋白质，得到待测样品中间液，将所述待测样品中间液与盐酸水溶液混合进行超声提取，分离后得到的上清液即为样品提取液，将所述样品提取液与硼砂水溶液和芴甲氧羰酰氯乙腈溶液混合，进行避光反应，反应结束后过滤得到滤液，使用高效液相色谱-串联质谱法分析所述滤液，得到待测样品中1-脱氧野尻霉素含量。
4、可选地，所述待测样品与乙腈与盐酸水溶液的质量体积比为(2.5～5)g：(3～7)ml：(10～20)ml。进一步地，所述待测样品与乙腈与盐酸水溶液的质量体积比为(2.5～5)g：5ml：15ml。
5、可选地，所述超声提取的功率是30～60khz，时间为10～20min。
6、可选地，所述分离为离心分离，转速为3000～4000rpm，时间为3～8min。
7、可选地，所述硼砂水溶液为饱和硼砂水溶液，所述芴甲氧羰酰氯乙腈溶液的浓度为5g/l。
8、可选地，所述样品提取液与硼砂水溶液与芴甲氧羰酰氯乙腈溶液的体积比为2：1：1。
9、可选地，所述样品提取液与硼砂水溶液与芴甲氧羰酰氯乙腈溶液的混合时间为15～60s。
10、可选地，所述混合为涡旋混合，涡旋转速1000～3000rpm。
11、可选地，所述避光反应的时间为15～45min。
12、可选地，所述过滤为0.22μm有机相滤膜微滤。
13、可选地，所述高效液相色谱-串联质谱的参数如下：
14、色谱条件：
15、色谱柱：c18色谱柱，柱长10cm，内径2.5μm，填料粒径2.5μm；
16、柱温：40℃；
17、流动相：a为0.1％甲酸的4mmol/l乙酸铵溶液，流动相b为甲醇；
18、洗脱程序：
19、初始结点：a为80％，b为20％，流速0.3ml/min；
20、2.5min：a为5％，b为95％，流速0.3ml/min；
21、3.5min：a为95％，b为5％，流速0.3ml/min；
22、3.51min：a为80％，b为20％，流速0.3ml/min；
23、5min：a为80％，b为20％，流速0.3ml/min；
24、质谱条件：
25、电离方式：esi+；
26、脱溶剂气温度：550℃；
27、辅助加热气压力：55psi；
28、气帘气：35psi；
29、雾化气：55psi；
30、离子化电压：5500v；
31、质谱参数，目标物为dnj-fmoc衍生物：
32、当碰撞电压为16ev时：母离子为385.9m/z，子离子为189.9m/z，驻留时间100ms，去簇电压30v；
33、当碰撞电压为21ev时：母离子为385.9m/z，子离子为163.9m/z，驻留时间100ms，去簇电压30v。
34、有益效果：
35、本发明主要提供一种乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法。先加入乙腈沉淀乳制品中的蛋白质，加入盐酸水溶液提取样品中的1-脱氧野尻霉素(dnj)，取部分提取液，在碱性环境中加入芴甲氧羰酰氯(fmoc-cl)衍生，采用液相色谱-串联质谱法进行检测。
36、本发明结合了高效液相色谱法的优点，通过色谱柱对样品中可能出现的干扰物进行分离，同时通过质谱法对目标物进行定性，避免了液相法定性不准确和干扰物分离不彻底的问题，实现对目标物的准确定量，并可以将1-脱氧野尻霉素的定量限降低至0.1mg/kg，能够为乳制品中低含量的1-脱氧野尻霉素检测提供方案思路。
1.一种乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法，其特征在于，所述待测样品与乙腈与盐酸水溶液的质量体积比为(2.5～5)g：(3～7)ml：(10～20)ml。
3.根据权利要求2所述的乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法，其特征在于，所述待测样品与乙腈与盐酸水溶液的质量体积比为(2.5～5)g：5ml：15ml。
4.根据权利要求1所述的乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法，其特征在于，所述超声提取的功率是30～60khz，时间为10～20min。
5.根据权利要求1所述的乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法，其特征在于，所述分离为离心分离，转速为3000～4000rpm，时间为3～8min。
6.根据权利要求1所述的乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法，其特征在于，所述硼砂水溶液为饱和硼砂水溶液，所述芴甲氧羰酰氯乙腈溶液的浓度为5g/l。
7.根据权利要求6所述的乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法，其特征在于，所述样品提取液与硼砂水溶液与芴甲氧羰酰氯乙腈溶液的体积比为2：1：1。
8.根据权利要求7所述的乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法，其特征在于，所述样品提取液与硼砂水溶液与芴甲氧羰酰氯乙腈溶液的混合为涡旋混合，涡旋转速为1000～3000rpm，混合时间为15～60s，所述避光反应的时间为15～45min。
9.根据权利要求1所述的乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法，其特征在于，所述过滤为0.22μm有机相滤膜。
10.根据权利要求1所述的乳制品中1-脱氧野尻霉素的测定方法，其特征在于，所述高效液相色谱-串联质谱的参数如下：
