本发明涉及一种基于protac策略的小分子化合物及其药物组合物和应用，尤其涉及一种可制备为治疗或预防ezh2相关性疾病药物的protac小分子化合物及其药物组合物和应用。
背景技术：
1、多梳家族(polycomb group，pcg)是一类重要的调节组蛋白修饰的酶类，包含prc1(polycomb repressive complex 1)和prc2(polycomb repressive complex 2)两个复合物。作为pcg家族的重要成员之一，ezh2是prc2复合物的酶活性核心亚基，该复合物还包括suz12、eed和rbap46/48(也称为rbbp7/4)，从果蝇到哺乳动物都高度保守。ezh2通过suz12、eed、rbap46/48三个亚基形成prc2复合物发挥转录路调控作用，它能催化组蛋白h3第27位(h3k27)赖氨酸的单甲基化(h3k27me1)、二甲基化(h3k27me2)、三甲基化(h3k27me3)。h3k27me3与基因表达抑制有关，是组织和干细胞发育过程中的关键表观遗传学事件，具有调控下游基因的表达，维持细胞正常的功能。但是过度的h3k27三甲基化将导致肿瘤抑制基因沉默，从而促进多种人类癌症的发生。研究发现，ezh2还具有非组蛋白修饰的新功能，它参与rrna 2'-o-甲基化修饰，调控蛋白质翻译。
2、ezh2活性的异常增高与多种癌症的发生有关。在乳腺癌、前列腺癌、子宫内膜癌、黑色素瘤、膀胱癌、胶质母细胞瘤、肝癌、肺癌、t细胞淋巴瘤、卵巢癌等多种肿瘤组织中过表达，在非霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤等恶性肿瘤中突变，同时还发现ezh2表达增高与肿瘤的进展以及预后相关。因此，ezh2是基于表观遗传治疗肿瘤的一个非常有前景的靶点。
3、蛋白降解靶向嵌合体技术(proteolysis targeting chimera，protac)利用细胞固有的泛素-蛋白酶体系统(ubiquitinproteasome system，ups)调控靶向蛋白质降解，已成为一种具潜力的疾病治疗手段。与传统小分子相比，protac分子具有选择性高、抗突变、且理论上可以催化量使用，在克服耐药和靶向非成药靶点方面均具有很大的潜力。
4、根据ezh2在多种肿瘤的发生和发展过程中表达异常的特点，通过抑制肿瘤细胞内ezh2酶活性的方式，理论上就可以作为遏制肿瘤细胞增殖、侵袭和转移的治疗方法。目前ezh2小分子抑制剂主要有通过抑制sah水解酶而间接抑制ezh2的ezh2抑制剂、与sam竞争结合set活性位点的ezh2抑制剂以及基于蛋白降解技术的ezh2抑制剂三种。其中，sah水解酶抑制剂3-去氮腺嘌呤a(3-deazaneplanocina，dznep)并非ezh2的特异性抑制剂，缺乏选择性，有较大的毒性，制约了其进一步的研发。与sam竞争结合set活性位点的ezh2抑制剂中，epz-6438(tazemetostat，他折司他)已经于2020年1月23日上市，这是全球首个上市的ezh2抑制剂，用于16岁及以上患者治疗转移或局部晚期上皮样肉瘤和复发或难治性成人滤泡性淋巴瘤。
5、传统小分子药物使用后均会产生耐药性，将导致药效急剧下降，而基于蛋白降解技术的ezh2抑制剂陆续发展起来，代表性化合物如下：
6、
7、以上protac分子的相关生物活性、成药性等信息并没有过多披露。因此，寻求更多结构类型的具有更佳成药性的protac分子迫在眉睫。
技术实现思路
1、发明目的：本发明的第一目的是提供一种基于protac策略的小分子化合物，第二目的是提供一种含有所述化合物的药物组合物，第三目的是提供一种所述化合物及其药物组合物的药物应用。
2、技术方案：本发明所述的protac小分子具有式i的结构，还包含其立体异构体、几何异构体、药学上可接受的盐或它们的混合物：
3、p-l-e
4、i
5、p表示ezh2蛋白的配体，e表示e3连接酶的配体，l表示连接e和z的链。
6、其中：
7、p选自x1、x2选自ch或n；
8、e选自x3选自ch2或c(o)，m1、m2选自nh、o、h或不存在且不相同，m3选自卤素；
9、l选自m、n、k选自0～5的整数，p、q选自1或2，y1、y2选自n、c或ch且y1、y2与所连接的碳形成饱和或不饱和环系，z选自ch2或c(o)。
10、优选，所述结构中p选自以下任一的基团：
11、
12、优选，所述结构中e选自以下任一的基团：
13、
14、优选，所述结构中l选自以下任一的基团：
15、
16、进一步优选，所述结构中l选自以下任一的基团：
17、
18、优选，本发明所述的protac小分子选自以下任一的化合物：
19、
20、
21、
22、优选，本发明所述的药学上可接受的盐为所述化合物与选自以下任一的酸形成的盐：
23、盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、碳酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、萘磺酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸、琥珀酸、富马酸、水杨酸、苯基乙酸、杏仁酸或阿魏酸。
24、将以上方法制得的式i化合物与相应的酸成盐，即得所述化合物的药学上可接受的盐。
25、“药学上可接受的盐”是指化合物的盐，由具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当化合物中含有相对酸性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物的游离体形式接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、有机氨或镁盐或类似的盐。当化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物的游离体形式接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括无机酸盐，所述无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸(形成碳酸盐或碳酸氢盐)、磷酸(形成磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、硫酸(形成硫酸盐或硫酸氢盐)、氢碘酸、亚磷酸等；以及有机酸盐，所述有机酸包括如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸和甲磺酸等类似的酸；有机酸盐还包括氨基酸(如精氨酸等)、葡糖醛酸等有机酸的盐。当某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。优选地，以常规方式使盐与碱或酸接触，再分离母体化合物，由此再生化合物的游离体形式。化合物的游离体形式与其各种盐的形式的不同之处在于某些物理性质，例如在极性溶剂中的溶解度不同。
26、“药学上可接受的盐”可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。一般地，优选醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈等非水介质。
27、优选，所述的立体异构体为p、e、l中的手性c、n引入的异构体；所述的几何异构体为l中双键引入的顺反异构体。
28、优选，所述的同位素化合物为所述化合物中的氢被氘取代的化合物。
29、本发明所述的药物组合物包含本发明所述的所述protac小分子以及药学上可接受的载体。
30、优选，所述的药物组合药的制剂形式选自片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂、注射剂、口服液、糖浆剂、吸入剂、软膏剂、贴剂或栓剂。
31、“药学上可接受的载体”可为药物生产领域中广泛采用的辅料。辅料主要用于提供一个安全、稳定和功能性的药物组合物，还可以提供方法，使受试者接受给药后活性成分以所期望的速率溶出，或促进受试者接受组合物给药后活性成分得到有效吸收。所述的药用辅料可以是惰性填充剂，或者提供某种功能，例如稳定该组合物的整体ph值或防止组合物活性成分的降解。所述的药用辅料可以包括下列辅料中的一种或多种：粘合剂、助悬剂、乳化剂、稀释剂、填充剂、成粒剂、胶粘剂、崩解剂、润滑剂、抗粘着剂、助流剂、润湿剂、胶凝剂、吸收延迟剂、溶解抑制剂、增强剂、吸附剂、缓冲剂、螯合剂、防腐剂、着色剂、矫味剂和甜味剂。
32、本发明所述的药物组合物可根据公开的内容使用本领域技术人员已知的任何方法来制备。例如，常规混合、溶解、造粒、乳化、磨细、包封、包埋或冻干工艺。
33、本发明所述的药物组合物可以任何形式给药，包括注射(静脉内)、粘膜、口服(固体和液体制剂)、吸入、眼部、直肠、局部或胃肠外(输注、注射、植入、皮下、静脉内、动脉内、肌内)给药。本发明的药物组合物还可以是控释或缓释剂型(例如脂质体或微球)。固体口服制剂的实例包括但不限于粉末、胶囊、囊片、软胶囊剂和片剂。口服或粘膜给药的液体制剂实例包括但不限于悬浮液、乳液、酏剂和溶液。局部用制剂的实例包括但不限于乳剂、凝胶剂、软膏剂、乳膏剂、贴剂、糊剂、泡沫剂、洗剂、滴剂或血清制剂。胃肠外给药的制剂实例包括但不限于注射用溶液、可以溶解或悬浮在药学上可接受载体中的干粉制剂、注射用悬浮液和注射用乳剂。所述的药物组合物的其它合适制剂的实例包括但不限于滴眼液和其他眼科制剂；气雾剂，如鼻腔喷雾剂或吸入剂；适于胃肠外给药的液体剂型；栓剂以及锭剂。
34、本发明所述的protac小分子或其药物组合物应用在制备降解ezh2或抑制ezh2的药物中。
35、优选，所述药物为抗肿瘤药物。
36、进一步优选，所述肿瘤选自霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、弥漫大b细胞淋巴瘤、乳腺癌、前列腺癌或恶性横纹肌瘤。
37、有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下显著优点：
38、该类化合物可有效降解肿瘤细胞中的ezh2蛋白，并且具有显著的抗肿瘤细胞增殖作用，ic50值达到纳摩尔浓度水平，甚至低于5nm；口服生物利用度高，体内暴露量大。疗效确切，可广泛应用于与ezh2蛋白相关的疾病，特别是各类淋巴瘤和恶性横纹肌瘤。
1.一种protac小分子，其特征在于，具有式i的结构，还包含其立体异构体、几何异构体、药学上可接受的盐或它们的混合物：
2.根据权利要求1所述的protac小分子，其特征在于，所述结构中p选自以下任一的基团：
3.根据权利要求1所述的protac小分子，其特征在于，所述结构中e选自以下任一的基团：
4.根据权利要求1所述的protac小分子，其特征在于，所述结构中l选自以下任一的基团：
5.根据权利要求1所述的protac小分子，其特征在于，选自以下任一的化合物：
6.根据权利要求1所述的protac小分子，其特征在于，所述药学上可接受的盐为所述化合物与选自以下任一的酸形成的盐：
7.一种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1所述protac小分子以及药学上可接受的载体。
8.一种权利要求1所述的protac小分子或权利要求7所述的药物组合物在制备降解ezh2或抑制ezh2的药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述药物为抗肿瘤药物。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述肿瘤选自霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、弥漫大b细胞淋巴瘤、乳腺癌、前列腺癌或恶性横纹肌瘤。
