本发明涉及分子生物学检测，尤其涉及一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的snp位点组合、产品、试剂盒以及方法。
背景技术：
1、妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus ，gdm）是妊娠期常见疾病，由首次诊断为高血糖决定。gdm在一定程度上对孕妇和胎儿的健康有害。对于孕妇来说，它可能会增加并发症的发生率，如妊娠高血压、心血管疾病和糖代谢抑制。对于胎儿来说，存在早产和新生儿低血糖的风险。因此，为了预防和治疗gdm的发生，有必要探讨其发病机制和危险因素。gdm的发病机制可能包括胰岛素分泌受损和胰岛素抵抗。饮食、环境和遗传因素有助于gdm的发展，其中单核苷酸多态性（snps）是一个重要的遗传变异因素。
2、小rna（mirna）在妊娠期间的代谢信号通路中发挥关键调节作用，可能影响胰岛β细胞分化和胰岛发育。越来越多的研究表明，mirna中的snp对其成熟、表达和功能有影响。mirna表达的失调与癌症、糖尿病和心血管疾病的发展相关。
3、虽然现有技术中有针对基因的单一多态性位点与gdm的相关性的研究，但是灵敏度均不高；另外，现有技术中也缺乏通过mirna的单核苷酸多态性检测gdm遗传易感性的试剂盒，无法及时筛查出gdm易感高危人群，故无法提前做好gdm预防措施。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的snp位点组合、产品、试剂盒以及方法，该试剂盒通过检测与gdm遗传易感性密切相关的mir-196a2 rs11614913和mir-27a rs895819两个位点的联合基因型和单倍型，可有效筛查出gdm遗传易感高危人群，从而为及早进行个性化干预和治疗提供重要依据。
2、为达到上述技术效果，本发明采用了以下技术方案：
3、第一方面，本发明提供一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的snp位点组合，包括：
4、位于mir-196a2基因上的rs11614913号snp位点i和位于mir-27a基因上的rs895819号snp位点ii。
5、第二方面，本发明还提供一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的snp位点组合在制备预测妊娠糖尿病患病风险的产品中的用途，或，在制备筛查或辅助筛查妊娠糖尿病的产品中的用途。
6、进一步地，上述用途包括步骤：
7、获取受试者的生物样本，提取所述生物样本的样本dna；
8、检测所述样本dna在所述snp位点i和snp位点ii的碱基序列，并以此确定受试者在snp位点i和snp位点ii的基因型。
9、优选地，所述生物样品来源于人的血液、粪便、尿液、口腔上皮细胞、脱落细胞、口腔拭子或咽喉拭子中的任意一种，且优选为血液样本。
10、第三方面，本发明还提供一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的产品，该产品包括用于检测位于mir-196a2基因上的rs11614913号snp位点i和位于mir-27a基因上的rs895819号snp位点ii的基因型的试剂，优选地，所述产品为试剂盒。
11、第四方面，本发明还提供一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的试剂盒，该试剂盒至少包括特异性引物对i和/或特异性引物对ii：
12、所述特异性引物对i用于特异性扩增包含snp位点i的核苷酸片段；
13、所述特异性引物对ii用于特异性扩增包含snp位点ii的核苷酸片段；
14、其中，所述snp位点i为位于mir-196a2基因上的rs11614913号snp位点，所述snp位点ii为位于mir-27a基因上的rs895819号snp位点。
15、优选地，所述特异性引物对i包括核苷酸序列如seq id no：1所示的上游引物和核苷酸序列如seq id no：2所示的下游引物；
16、优选地，所述特异性引物对ii包括核苷酸序列如seq id no：3所示的上游引物和核苷酸序列如seq id no：4所示的下游引物。
17、优选地，所述试剂盒还包括：特异性荧光探针、无核酶水、缓冲液、dntp混合液、dna聚合酶中的一种或多种。
18、优选地，所述特异性荧光探针包括特异性荧光探针对i和/或特异性荧光探针对ii，所述特异性荧光探针对i包括核苷酸序列如seq id no：5所示的带vic荧光基团探针i和核苷酸序列如seq id no：6所示的带fam荧光基团探针i；所述特异性荧光探针对ii包括核苷酸序列如seq id no：7所示的带vic荧光基团探针ii和核苷酸序列如seq id no：8所示的带fam荧光基团探针ii。
19、第四方面，本发明还提供一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的方法，包括步骤：
20、获取受试者的生物样本，提取所述生物样本的样本dna；
21、通过荧光定量pcr反应对样本dna中包括snp位点i和snp位点ii的核苷酸片段进行扩增，并对荧光定量pcr反应过程中产生的荧光信号进行收集，通过对荧光信号进行分析确定受试者在snp位点i和snp位点ii的基因型。
22、与现有技术相比，本发明的有益效果为：
23、基于现有技术中缺乏针对妊娠糖尿病遗传易感性的试剂盒，而且针对单个snp位点进行分析评估gdm发病风险的敏感性和特异性、实用性较差的缺陷，首次提出同时检测mir-196a2 rs11614913 snp位点i和mir-27a rs895819 snp位点ii的组合基因型和单倍型，采用snp位点i基因分型和snp位点ii基因分型结合的方式，可极大地提高预测的准确性，从而有效预测gdm发病风险，便于针对高风险受试者采取更精准的营养干预及保健措施，让妊娠糖尿病高危易感人群在孕前及怀孕早期做充分准备，以降低患妊娠糖尿病的风险及减少妊娠糖尿病所致的不良母婴结局，具有极大的临床应用价值。
1.一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的snp位点组合，其特征在于，包括：
2.如权利要求1所述的一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的snp位点组合在制备预测妊娠糖尿病患病风险的产品中的用途，或，在制备筛查或辅助筛查妊娠糖尿病的产品中的用途。
3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，包括步骤：
4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述生物样品来源于人的血液、粪便、尿液、口腔上皮细胞、脱落细胞、口腔拭子或咽喉拭子中的任意一种。
5.一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的产品，其特征在于：包括用于检测位于mir-196a2基因上的rs11614913号snp位点i和位于mir-27a基因上的rs895819号snp位点ii的基因型的试剂，优选地，所述产品为试剂盒。
6.一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的试剂盒，其特征在于：包括特异性引物对i和/或特异性引物对ii；
7.如权利要求6所述的一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的试剂盒，其特征在于：
8.如权利要求6所述的一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：特异性荧光探针、无核酶水、缓冲液、dntp混合液、dna聚合酶中的一种或多种。
9.如权利要求8所述的一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的试剂盒，其特征在于：
10.一种检测妊娠糖尿病遗传易感性的方法，其特征在于，包括步骤：
