本发明属于生物工程领域，具体涉及一株适用于口服的产气荚膜梭菌噬菌体及其应用。
背景技术：
1、产气荚膜梭菌(c.perfringens)是一种革兰氏阳性菌，专性厌氧，有a-e 5个毒素型，可产生可以12种毒素。该菌是一种条件致病菌，因此不是感染了产气荚膜梭菌就会致病，但是该菌容易成为人类和动物肠道的常在菌。而且可产生芽孢，生命力顽强，可长期存活，不易杀灭。而且产气荚膜梭菌一旦引起发病，往往呈急性，来不及表现临床症状就会出现死亡。
2、目前，针对产气荚膜梭菌引起的肠炎，使用噬菌体预防和治疗禽类肠炎已被大家所熟知，预防和治疗效果也得到了认同。目前，噬菌体的给药途径有3种：第一种是静脉注射，这种给药方式虽然可以达到预防和治疗效果，但是对于禽类养殖业显然是不友好的，在给药的过程中养殖人员劳动强度太大，不利于规模化养殖场使用与推广。第二种是皮肤给药，但是产气荚膜梭菌主要是在肠道产生毒素，引起禽类肠炎，因此，这种给药方式显然是不合理的。第三种给药方式为口服给药，可以将噬菌体混合在饲喂的水中，动物自主摄入，简便快捷，但是噬菌体是有生命的活体，由于胃液ph值非常低在1～2之间并且消化液中含有多种蛋白酶，大多数噬菌体会失活，因此，选择口服给药时，噬菌体不能穿过动物肠道到达病灶；或者噬菌体有幸穿过胃，但是噬菌体效价损失严重，达不到治疗效果等问题。
3、但是，目前还未出现有效预防和治疗产气荚膜梭菌感染的疾病适用于口服的噬菌体产品。
技术实现思路
1、本发明旨在针对现有技术的不足，提供适用于口服的产气荚膜梭菌噬菌体及其应用。本发明提供了一株适合口服的对消化液耐受的产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23006，该噬菌体不仅工业化生产时发酵液效价较高而且经胃液及肠液处理后仍具有较高的效价，因此可在禽类肠道内存留时间较长，可有效抑制产气荚膜梭菌引起的肠炎。
2、本发明上述目的通过以下技术方案实现：
3、第一方面，本发明提供了一株产气荚膜梭菌噬菌体(clostridium perfringensbacteriophage)，该噬菌体从河北省鸡粪便中分离得到，于2023年06月12日被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，其保藏编号为cgmcc no.45573，并被分类命名为噬菌体。
4、电镜下观察到：该产气荚膜梭菌噬菌体头部呈正六边形，头部直径约为38-42nm，尾部长度约为28-32nm，根据国际病毒分类学组织(ictv)病毒分类报告，可初步将该噬菌体归类为短尾科噬菌体科，将其命名为rdpcp23006。
5、第二方面，本发明还提供了一种噬菌体组合物，包括如上所述的产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23006。该噬菌体组合物可通过产气荚膜梭菌噬菌体rdpcp23006与其他噬菌体复配，用于制备防治产气荚膜梭菌感染的疾病的产品。
6、第三方面，本发明还提供了如上所述的产气荚膜梭菌噬菌体和如上所述的噬菌体组合物在制备预防和治疗产气荚膜梭菌感染的疾病的药物中的应用。本发明中术语“预防”是指包括通过给予所述噬菌体或者噬菌体组合物来抑制或延迟所述疾病的所有行为；本发明中术语“治疗”是指包括通过给予所述噬菌体或者噬菌体组合物使得所述疾病好转或者有所改善的所有行为。
7、第四方面，本发明还提供了一种噬菌体药物制剂，其有效成分包括如上所述的产气荚膜梭菌噬菌体或如上所述的噬菌体组合物。
8、可选的，所述噬菌体药物制剂中还包含药学上可接受的载体，其制剂形式为口服给药剂型、注射给药剂型、外用剂型或肠外给药剂型。优选的，其制剂形式为口服给药剂型。上述噬菌体药物制剂的剂型为散剂、水溶性粉剂、溶液剂等。
9、第五方面，本发明还提供了一种饲料添加剂，包括如上所述的产气荚膜梭菌噬菌体或如上所述的噬菌体组合物，上述饲料添加剂通过与禽类饲料进行混拌后，进行饲喂，从而达到预防或者治疗禽类肠炎的效果。优选的，饲料添加剂中噬菌体的效价至少为109pfu/g。
10、第六方面，本发明还提供了一种饮用水添加剂，包括如上所述的产气荚膜梭菌噬菌体或如上所述的噬菌体组合物。优选的，饮用水添加剂中噬菌体的效价至少为109pfu/g。
11、本发明的有益效果是：
12、1、本发明新提供一株适用于口服的产气荚膜梭菌噬菌体，该噬菌体rdpcp23006对肠道消化液具有一定耐受性，不需要过多的包埋技术即可顺利到达肠道，更加适合口服，而且可以在肠道中长时间存活，有利于杀死肠道中定植的产气荚膜梭菌，为工业化生产噬菌体用于产气荚膜梭菌感染的疾病的防治提供了噬菌体来源。
13、2、本发明提供的一株适用于口服的产气荚膜梭菌噬菌体，该噬菌体rdpcp23006在ph值为1.5的条件下可稳定维持20小时左右，并且在4天之内噬菌体均有活性。
14、3、本发明提供的一株适用于口服的产气荚膜梭菌噬菌体，实验结果表明，消化液对噬菌体rdpcp23006的抑菌能力无明显影响，且在噬菌体浓度较低的情况下抑菌时间长达380min。
15、4、本发明提供的一株适用于口服的产气荚膜梭菌噬菌体，在大群实验中，能将发病率从0.09％降至0.07％，对产气荚膜梭菌引起的禽类肠炎，尤其是鸡肠炎，较益生菌组具有更好预防和保护效果，为替代抗生素提供新的防治方案。
1.一株产气荚膜梭菌噬菌体，其特征在于，被命名为rdpcp23006，其保藏编号为cgmccno.45573。
2.一种噬菌体组合物，其特征在于，包括如权利要求1所述的产气荚膜梭菌噬菌体。
3.如权利要求1所述的产气荚膜梭菌噬菌体和如权利要求2所述的噬菌体组合物在制备预防和治疗产气荚膜梭菌感染的疾病的药物中的应用。
4.一种噬菌体药物制剂，其特征在于，其有效成分包括如权利要求1所述的产气荚膜梭菌噬菌体或如权利要求2所述的噬菌体组合物。
5.根据权利要求4所述的噬菌体药物制剂，其特征在于，所述噬菌体药物制剂中还包含药学上可接受的载体，其制剂形式为口服给药剂型、注射给药剂型、外用剂型或肠外给药剂型。
6.一种饲料添加剂，其特征在于，包括如权利要求1所述的产气荚膜梭菌噬菌体或如权利要求2所述的噬菌体组合物。
7.一种饮用水添加剂，其特征在于，包括如权利要求1所述的产气荚膜梭菌噬菌体或如权利要求2所述的噬菌体组合物。
