本发明涉及生物检测，具体涉及胶乳免疫比浊测定尿免疫球蛋白g的试剂盒。
背景技术：
1、免疫球蛋白是人体的一种球蛋白，具有抗体的活性和结构，是机体在抗原刺激下有淋巴细胞产生的一类蛋白，具有免疫和生理调节作用，免疫球蛋白主要存在于血浆中，也常见于其他的体液及组织，免疫球蛋白分为五类，分别为igg、iga、igd、igm和ige，它们具有相似的基本结构，都是由两条相同的相对分子质量约为60000-80000的重链(h链)和两条相同的相对分子质量约20000-30000的轻链(h链)组成，具有一定的对称性，肽链之间通过二硫键连接形成四肽链结构。
2、免疫球蛋白g(immunoglobulin g，igg)，igg的分子量约为150kda，由四条多肽链组成，包括两条相同的重链和两条相同的轻链，重链与轻链之间由二硫键连接。igg约占免疫球蛋白总量的70-80％，igg可以分为四个亚类：igg1、igg2、igg3、igg4，分类依据与分子主链抗原性的不同及二硫键的位置、数目有关。igg分子可分为fab片段和fc片段，fab片段包括抗原结合位点，fc片段的氨基酸序列基本不变，称为恒定区。正常尿液中含有极微量的蛋白质，由正常肾小球毛细血管壁滤出，绝大部分被肾小球重吸收。igg最显著的特点是能够特异性的识别抗原，抗原能够诱导活化b淋巴细胞产生igg抗体，igg能够特异性的与之结合，形成抗原-抗体复合物。当肾小球发生疾病时，由于肾小球虑膜通透性增高或破损断裂，尿中可有免疫球蛋白g。
3、中国专利cn113156136a中公开了一种检测尿液中免疫球蛋白g的试剂盒，所述试剂盒包括试剂r1和试剂r2；所述试剂r1包括以下组分：tris碱、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、氯化钠、表面活性剂s9、edta-na2和苯甲酸钠；所述试剂r2包括以下组分：tris碱、羊抗人免疫球蛋白g多克隆抗体、动物血清、苯甲酸钠、海藻糖、edtana2和吐温。该发明试剂盒具有较高的灵敏度、较宽的线性范围和较好的重复性，可以对低值样本进行准确检测；同时本技术试剂盒还具有较好的稳定性，试剂能够稳定保存14个月，省去了试剂使用前的过滤步骤，简化了操作步骤的同时提高了检测结果的准确性。
4、中国专利cn105929171a中公开了一种高性能的人尿液免疫球蛋白g检测试剂盒，该发明的试剂盒，包括试剂2，所述试剂2为标记有兔抗人免疫球蛋白g多克隆抗体的胶乳颗粒溶液；其中，所述胶乳颗粒粒径范围为130nm-300nm，每升试剂2中抗体的用量为10ml-20ml。该发明可替代进口试剂，节约病患开支；同时能够提高检测效率。
5、目前仍缺少一种基于胶乳免疫比浊法，且具有较高的检测准确性和稳定性的尿液中免疫球蛋白g的检测试剂盒。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种基于胶乳免疫比浊法的免疫球蛋白g检测试剂盒，所述的试剂盒具有较高的稳定性和准确性，可用于尿液中免疫球蛋白g的检测。
2、为实现上述发明目的，本发明的技术方案如下：
3、一方面，本发明提供了一种免疫球蛋白g的检测试剂盒，所述的试剂盒包括r1试剂和r2试剂；
4、所述的r1试剂中包括10-200mm三羟甲基氨基甲烷、1-10g/l牛血清白蛋白、10-50g/l反应增强剂、0.1-10ml/l防腐剂、100-300mm nacl、2-6g/l表面活性剂；
5、所述的r2试剂中包括10-200mm三羟甲基氨基甲烷、100-300mm nacl、1-5g/l抗体偶联胶乳颗粒、1-5g/l甘油、5-10g/l甲基-β-环糊精、1-10g/l牛血清白蛋白、2-6g/l表面活性剂和0.1-10ml/l防腐剂。
6、优选地，所述的r1试剂中包括100-200mm三羟甲基氨基甲烷、2-8g/l牛血清白蛋白、10-40g/l反应增强剂、1-5ml/l防腐剂、100-200mm nacl、4-6g/l表面活性剂；
7、所述的r2试剂中包括100-200mm三羟甲基氨基甲烷、100-200mm nacl、1-4g/l抗体偶联胶乳颗粒、1-3g/l甘油、5-8g/l甲基-β-环糊精、2-8g/l牛血清白蛋白、4-6g/l表面活性剂和1-5ml/l防腐剂。
8、优选地，所述的反应增强剂选自peg2000、peg4000、peg6000、peg8000、peg12000、peg20000中的一种或多种；进一步地，所述的反应增强剂为peg4000。
9、优选地，所述的抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。
10、进一步地，所述的抗体为羊抗人免疫球蛋白多抗、兔抗人免疫球蛋白多抗、鼠抗人免疫球蛋白多抗。
11、再进一步地，所述的抗体为羊抗人免疫球蛋白多抗。
12、优选地，所述的胶乳颗粒为聚苯乙烯胶乳颗粒，粒径为200-500nm；
13、根据本发明的一些实施方式，所述的胶乳颗粒的表面修饰有功能团；
14、再进一步地，所述的功能团选自羧基、氨基、羟基、醛基、酰肼或氯甲基。
15、进一步地，所述的胶乳颗粒为羧基化聚苯乙烯胶乳颗粒。
16、优选地，所述的抗体与胶乳颗粒的质量比为1：(10-30)。
17、进一步地，所述的抗体偶联胶乳颗粒为羊抗人免疫球蛋白g抗体胶乳颗粒。
18、优选地，所述的防腐剂选自叠氮钠、苯酚、proclin300、对羟基苯甲酸、2-氯乙酰胺、脱氢乙酸钠、尼泊尔金甲酯钠、对羟基甘氨酸钠、4-羟基苯甲酸乙酯、5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷、甲基异噻唑啉酮中的一种或多种。
19、进一步优选地，所述的防腐剂为proclin300。
20、优选地，所述的表面活性剂选自吐温20、吐温80、曲拉通100、聚氧乙基月桂醚、烷基酚聚氧乙烯醚、月桂醇硫酸钠中的一种或多种。
21、进一步地，所述的表面活性剂为曲拉通100、聚氧乙基月桂醚和月桂醇硫酸钠组合。
22、再进一步地，所述的曲拉通100、聚氧乙基月桂醚和月桂醇硫酸钠的质量比为(1-3)：(0.1-1)：(1-5)。
23、更进一步地，所述的曲拉通100、聚氧乙基月桂醚和月桂醇硫酸钠的质量比为(2-3)：(0.5-1)：(2-4)。
24、最优选地，所述的曲拉通100、聚氧乙基月桂醚和月桂醇硫酸钠的质量比为2：0.5：3。
25、优选地，所述的试剂盒中还包括标准品和/或质控品。
26、进一步地，所述的标准品包括不同浓度的免疫球蛋白g、牛血清白蛋白和防腐剂。
27、进一步地，所述的质控品包括免疫球蛋白g、牛血清白蛋白和防腐剂。
28、优选地，所述的试剂r1和试剂r2的ph为6.0-8.0。
29、优选地，检测的主波长为570nm。
30、优选地，利用所述的免疫球蛋白g检测试剂盒的方法，包括以下步骤：
31、(1)以校准品的吸光度变化值△a(a校准-a空白)/min为纵坐标，其相应的浓度c校准为横坐标绘制校准曲线；
32、(2)根据样本的△a(a测定-a空白)/min在校准曲线上找出对应的样本浓度。
33、又一方面，本发明提供了所述的免疫球蛋白g检测试剂盒在尿液中免疫球蛋白g检测中的应用。
34、根据本发明的一些实施方式，所述的检测免疫球蛋白g的检测方法包括以下步骤：
35、(1)绘制标准曲线：以校准品的吸光度变化值△a(a校准-a空白)/min为纵坐标，相应的浓度c校准为横坐标绘制校准曲线；
36、(2)将试剂r1和待测样本混匀，在37℃条件下温育5min，加入试剂r2，立即测定读取吸光度值a1，5min后读取吸光度值a2，计算吸光度值变化△a＝a2-a1；
37、(3)根据样本的△a(a测定-a空白)/min在校准曲线上找出对应的样本浓度。
38、本发明试剂盒的检测原理：样本中的免疫球蛋白g与羊抗人免疫球蛋白g抗体乳胶颗粒结合形成抗原-抗体复合物，产生一定浊度。该浊度高低在一定抗体存在时与抗原的含量成比例。可通过测定特定波长下的浊度变化(吸光度变化)，计算出样本中免疫球蛋白g的含量。
39、本发明的有益效果为：
40、本发明提供了基于胶乳免疫比浊法的免疫球蛋白g的检测试剂盒，该试剂盒的稳定性较强，长期保存仍具有较好的检测效果，并且检测的准确度较高，重复性好，可用于尿液中免疫球蛋白g的检测，具有广阔的应用前景。
1.一种免疫球蛋白g的检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括r1试剂和r2试剂；
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的反应增强剂选自peg2000、peg4000、peg6000、peg8000、peg12000、peg20000中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的防腐剂选自叠氮钠、苯酚、proclin300、对羟基苯甲酸、2-氯乙酰胺、脱氢乙酸钠、尼泊尔金甲酯钠、对羟基甘氨酸钠、4-羟基苯甲酸乙酯、5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷、甲基异噻唑啉酮中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的表面活性剂选自吐温20、吐温80、曲拉通100、聚氧乙基月桂醚、烷基酚聚氧乙烯醚、月桂醇硫酸钠中的一种或多种。
5.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的表面活性剂为曲拉通100、聚氧乙基月桂醚和月桂醇硫酸钠组合。
6.根据权利要求5所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的曲拉通100、聚氧乙基月桂醚和月桂醇硫酸钠的质量比为(1-3)：(0.1-1)：(1-5)。
7.根据权利要求6所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的曲拉通100、聚氧乙基月桂醚和月桂醇硫酸钠的质量比为(2-3)：(0.5-1)：(2-4)。
8.根据权利要求7所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的曲拉通100、聚氧乙基月桂醚和月桂醇硫酸钠的质量比为2：0.5：3。
9.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中还包括标准品和/或质控品。
10.权利要求1-9任一项所述的检测试剂盒在尿液中免疫球蛋白g检测中的应用。
