本发明属于脂质体制剂的制备，具体涉及一种和厚朴酚脂质体冻干剂及其制备方法。
背景技术：
1、厚朴为多年生木兰科植物厚朴凹叶厚朴的干燥树皮，是一种临床上常用的中药材，其主要有效成分包括厚朴酚、和厚朴酚、异厚朴酚、四氢厚朴酚、厚朴碱等，其中以厚朴酚、和厚朴酚的含量最高。
2、研究表明，和厚朴酚具有广泛的药理作用，包括抗菌作用、抗炎作用、抗焦虑作用、抗吗啡戒断反应、抑制儿茶酚胺的分泌、钙调素措抗作用、抗病毒作用、抗肿瘤作用以及抗衰老作用等[1]。因此和厚朴酚在临床上具有较大的应用前景。和厚朴酚的结构式如下。
3、
4、然而，由于和厚朴酚的结构中含有酚羟基，导致其水溶性差且易被氧化降解，口服生物利用度低且在体内消除半衰期较短[2]，因此大大限制了该药用成分的吸收和利用，临床应用效果有待提高。
5、脂质体作为一种药物传递系统，能够提高水溶性与稳定性差的药物的跨膜能力与口服生物利用度[3]。因此，有关和厚朴酚脂质体的制备工作已经大量开展。
6、脂质体是由一个或多个同心脂质双分子层组成的磷脂囊泡，该脂质双分子层是封闭离散的含水空间。脂质体系统的囊泡可以包封各种亲脂性和亲水性的药物。疏水性分子插入脂质双层中，而亲水分子可以包埋在水性中心[4]。
7、虽然脂质体表现出较好的负载和厚朴酚进行药物递送的效果，但和厚朴酚脂质体一直存在化学稳定性问题，研究报道高温、高湿和光照对和厚朴酚原料药均有影响，表明和厚朴酚原料药稳定性差。而和厚朴酚脂质体冻干粉在25℃和40℃放置，其氧化指数和泄漏率均大幅增加，故仅能在2-8℃以下低温储存，并且在高湿和高温环境下，尤其是高湿环境下，平均粒径、泄漏率和氧化指数都随时间的延长而增加[2]，和厚朴酚脂质体冻干剂储存条件十分苛刻。
8、目前，针对和厚朴酚脂质体冻干剂的处方及工艺研究仍存在相应的不足，产品存在易降解、易泄露等稳定性问题，使得对产品的存储环境提出较高的要求。本发明针对上述技术问题进行研究并得以完成。
9、涉及的考查文献如下：
10、[1]湖北大学硕士学位论文[d]，《和厚朴酚长循环脂质体的制备及药动学研究》，作者：陈一桢。
11、[2]陈一桢等，和厚朴酚长循环脂质体的制备及药动学研究[j]，中草药，2017。
12、[3]阙慧卿等，雷公藤内酯醇纳米脂质体的处方及制备工艺研究[j]，中草药，2016。
13、[4]metselaar j m，storm g. liposomes in the treatment of inflammatorydisorders[j]. expert opin drug deliv，2005。
技术实现思路
1、本发明的目的是为了解决上述技术问题，提供一种和厚朴酚脂质体冻干剂及其制备方法。所述脂质体冻干剂杂质含量低，稳定性更好，对贮存环境要求降低。
2、为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
3、本发明第一方面提供一种和厚朴酚脂质体冻干剂，所述冻干剂活性成分为和厚朴酚，所述冻干剂含有保护剂，所述保护剂含聚维酮，并且所述保护剂在冻干前加入。
4、本发明第二方面提供一种具体的和厚朴酚脂质体冻干剂，所述冻干剂由如下重量比的组分组成：
5、和厚朴酚1份、磷脂2~8份、胆固醇0.3~2.2份、聚乙二醇或聚乙二醇化磷脂0.1~1.5、保护剂30~300份；
6、优选为和厚朴酚1份、磷脂2~8份、胆固醇0.3~1.2份、聚乙二醇或聚乙二醇化磷脂0.1~0.5、保护剂30~300份。
7、进一步，保护剂选自聚维酮和甘露醇的组合物，或者聚维酮和海藻糖的组合物，或者聚维酮与蔗糖的组合物。
8、进一步，保护剂为聚维酮和蔗糖，并且聚维酮和蔗糖的重量比为0.01~2:10，优选为0.05~1:10。
9、进一步，所述聚维酮包括聚维酮k15、聚维酮k17聚维酮k25、聚维酮k30、聚维酮k60中的任意一种或其组合。
10、进一步，所述聚维酮为聚维酮k25。
11、进一步，所述保护剂由聚维酮k25和蔗糖重量比0.9:10组成。
12、进一步，所述聚乙二醇或聚乙二醇化磷脂，其聚乙二醇的分子量为800~20000 da。
13、进一步，所述聚乙二醇或聚乙二醇化磷脂，其聚乙二醇的分子量为1000~8000 da。
14、本发明所述磷脂，可以为大豆磷脂、氢化大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸、神经鞘磷脂、二肉豆蔻磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱或磷脂酸肌醇中的任意一种或其组合，但不局限于此。较佳地，为大豆磷脂、蛋黄卵磷脂或磷脂酰胆碱。
15、本发明所述聚乙二醇，可以为聚乙二醇1000、聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇8000中的任意一种或其组合，但不局限于此。较佳地，为聚乙二醇2000。
16、本发明所述聚乙二醇化磷脂，可以为磷脂酰胆碱-聚乙二醇2000（pc-peg2000）、磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（pe-peg2000）、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（dspe-peg2000）、二硬脂酰磷脂酰胆碱-聚乙二醇2000（dspc-peg2000）、二棕榈酰磷脂酰胆碱-聚乙二醇2000（dppc-peg2000）、二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（dppe-peg2000）中的任意一种或其组合，但不局限于此。较佳地，为二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（dspe-peg2000）。
17、本发明所述和厚朴酚脂质体冻干剂的制备方法，包括如下步骤：
18、（1）取磷脂、胆固醇、聚乙二醇或聚乙二醇化磷脂、和厚朴酚，混合均匀，向混合物中加入有机溶剂充分溶解，搅拌15~60min，然后在25~60℃和80~150 rpm下旋转蒸发除去有机溶剂，得到一层均匀的磷脂薄膜，抽真空处理除去残余的有机溶剂；
19、（2）向磷脂薄膜中加入注射用水，于25~70℃和200~2000rpm条件下搅拌1~1.5 h，所得产物进行均质，得到脂质体溶液；
20、（3）将步骤（2）所得脂质体溶液在2~10℃用0.22μm滤器过滤，加入保护剂，200~500rpm条件下搅拌10~30min，静置10~60min后，冷冻干燥，制备成和厚朴酚脂质体冻干剂。
21、进一步，步骤（1）中所述有机溶剂为无水乙醇、氯仿、二氯甲烷、甲醇中的任意一种或其任意组合；优选为氯仿与无水乙醇体积比1：1~10的混合溶液或者氯仿与甲醇体积比1：1~10的混合溶液。
22、本发明的有益效果如下：
23、本发明提供的和厚朴酚脂质体冻干剂，添加聚维酮和蔗糖组成的冻干保护剂，不仅有利于冻干粉的成型，而且可将和厚朴酚纳入聚维酮的聚合结构中，形成保护作用，增加和厚朴酚脂质体的稳定性。同时，通过控制聚维酮和蔗糖的配比，进一步增强冻干剂在高温高湿及光照下稳定性，制备得到的和厚朴酚脂质体冻干剂，随贮藏时间的延长，其杂质含量和泄露率不会显著增加，产品对温湿度及光照的敏感性更低，可以实现更长的保存期限。
1.一种和厚朴酚脂质体冻干剂，其特征在于，所述冻干剂活性成分为和厚朴酚，所述冻干剂含有保护剂，所述保护剂含聚维酮，并且所述保护剂在冻干前加入。
2.根据权利要求1所述的和厚朴酚脂质体冻干剂，其特征在于，所述冻干剂由如下重量比的组分组成：
3.根据权利要求2所述的和厚朴酚脂质体冻干剂，其特征在于，所述冻干剂由如下重量比的组分组成：
4.根据权利要求1所述的和厚朴酚脂质体冻干剂，其特征在于，所述保护剂选自聚维酮和甘露醇的组合物，或者聚维酮和海藻糖的组合物，或者聚维酮与蔗糖的组合物。
5.根据权利要求4所述的和厚朴酚脂质体冻干剂，其特征在于，所述保护剂为聚维酮和蔗糖，并且聚维酮和蔗糖的重量比为0.01~2:10。
6.据权利要求5所述的和厚朴酚脂质体冻干剂，其特征在于，所述聚维酮和蔗糖的重量比为0.05~1:10。
7.根据权利要求1所述的和厚朴酚脂质体冻干剂，其特征在于，所述聚维酮包括聚维酮k15、聚维酮k17、聚维酮k25、聚维酮k30、聚维酮k60中的任意一种或其组合。
8.根据权利要求7所述的和厚朴酚脂质体冻干剂，其特征在于，所述聚维酮为聚维酮k25。
9.根据权利要求1所述的和厚朴酚脂质体冻干剂，其特征在于，所述保护剂由聚维酮k25和蔗糖重量比0.9:10组成。
10.根据权利要求2所述的和厚朴酚脂质体冻干剂，其特征在于，所述聚乙二醇或聚乙二醇化磷脂，其聚乙二醇的分子量为800~20000 da。
11.根据权利要求10所述的和厚朴酚脂质体冻干剂，其特征在于，所述其聚乙二醇的分子量为1000~8000 da。
12.根据权利要求1-11任一项所述和厚朴酚脂质体冻干剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
13.根据权利要求12所述的和厚朴酚脂质体冻干剂的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述有机溶剂为无水乙醇、氯仿、二氯甲烷、甲醇中的任意一种或其任意组合。
14.根据权利要求13所述的和厚朴酚脂质体冻干剂的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为氯仿与无水乙醇体积比1：1~10的混合溶液或者氯仿与甲醇体积比1：1~10的混合溶液。
