本发明涉及医药制剂，尤其涉及一种重组人干扰素软膏及其制备方法。
背景技术：
1、重组人干扰素是一种具备抗病毒、抗肿瘤活性和免疫调节功能的医药品，它通过基因重组技术制备而成，与人体自然产生的干扰素结构功能相似。在医疗领域，它发挥着举足轻重的作用，能够增强细胞对病毒的抵抗力，抑制病毒复制，并激活免疫细胞，提高人体免疫力，有效治疗病毒性疾病和肿瘤。
2、重组人干扰素α-2b（rhifnα-2b）是重组人干扰素中的一种，具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等多重功能。通过与细胞表面受体结合，rhifnα-2b激活细胞内信号传导，发挥治疗作用。它主要用于治疗慢性病毒性肝炎（如乙型和丙型肝炎）、尖锐湿疣、某些血液病（如毛细胞白血病和慢性粒细胞白血病）、淋巴瘤以及黑色素瘤等病症。此外，也适用于其他病毒性疾病，如流感病毒性肺炎。治疗时，医生会根据患者病情制定个性化方案。rhifnα-2b使用可能伴随不良反应，需在医生指导下监测患者反应并调整治疗。其不同的剂型，如注射液、凝胶、软膏等，会影响药物的吸收和疗效。将重组人干扰素α-2b制备成软膏可方便局部用药，使药物能够直接作用于患处，提高局部药物浓度，从而增强治疗效果。此外，软膏剂型还可以减少药物的全身性副作用，提高患者的用药舒适度。然而，软膏剂型可能存在药物的皮肤渗透性差、引发皮肤刺激反应和稳定性差等缺陷，影响治疗效果和患者体验，因此，不断探索新的技术和方法以改进缺陷是很有必要的。
3、cn104043112b公开了一种含有重组人干扰素α-2b (假单胞菌)的软膏药物组合物，该发明所提供的药物包括以下成分：重组人干扰素α-2b、人血白蛋白、甘油、羧甲基纤维素钠、枸橼酸、枸橼酸钠、十二烷基硫酸钠、绿原酸和纯化水。发现将绿原酸加入到配方中和重组人干扰素α-2b一起制备成软膏制剂，皮肤刺激性大大减轻，同时可以加快药物的释放速度，有利于药物的吸收和制剂的使用。但是该药物组合物渗透性较差，可能导致药物不能有效地渗透到目标部位，产生在其他非目标部位积聚的情况，造成药物浪费和不必要的副作用，不仅降低了治疗效果，还可能增加患者的不适和风险。
4、cn110559425a公开了一种稳定的重组人干扰素软膏及其生产方法，该发明所提供的软膏原料包括重组人干扰素α-2b与软膏基质，其中乳膏基质由甘油、右旋糖酐40、对羟基苯甲酸乙酯、注射用水、白凡士林、单、双硬脂酸甘油酯、聚山梨酯～80组成。该发明所提供的重组人干扰素软膏的制备工艺包括水相配制、油相配制、原液稀释、以及基质乳化四个步骤，操作简便，便于实际生产应用。所制备的软膏能够在低温条件下长期保存，质量好、稳定性佳。但是该软膏可能对皮肤产生刺激，导致患者出现不适、疼痛、红肿、瘙痒等不良反应，患者依从性较差，不利于药物的使用。
技术实现思路
1、有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明提供了一种重组人干扰素软膏及其制备方法，使用重组人干扰素α-2b为主要活性成分，通过与其他原料合理配比，使得所制备得到的重组人干扰素软膏具有优秀的储存稳定性和经皮渗透效果，不仅优化了药物的经皮给药效果，而且减少了皮肤刺激，提高了患者的舒适度和治疗依从性。
2、本发明的目的之一是提供一种重组人干扰素软膏，按重量份计，各原料组分包括：
3、重组人干扰素α-2b 0.015～0.025份、稳定剂550～600份、增稠剂10～20份、促渗剂2～3份、表面活性剂5～8份、ph调节剂1～3份、防腐剂1～2份、水350～450份。
4、优选的，所述促渗剂选自β-石竹烯、氨基酸衍生物和1,2-丙二醇中的至少两种。
5、优选的，所述促渗剂中β-石竹烯、氨基酸衍生物和1,2-丙二醇质量比为0.5～1.5:0.5～1.5:0.75～1.5。
6、优选的，所述氨基酸衍生物选自l-亮氨酸甲酯盐酸盐、l-脯氨酸甲酯盐酸盐、l-脯氨酸十二烷基酯盐酸盐中的一种。
7、进一步优选的，所述l-脯氨酸十二烷基酯盐酸盐的制备方法包括以下步骤，按重量份计：
8、取1.3～1.4份l～脯氨酸和2.5～2.8份正十二醇、2.2～2.4份对甲苯磺酸溶于100～120份甲苯中，在125～135℃下回流反应4～5h，反应液用200～220份质量百分比为5～6%的氢氧化钠水溶液萃取2～3次，用无水硫酸钠将萃取所得有机层干燥10～12h，用旋转蒸发器干燥，得到粗产物；以石油醚：异丙醇体积比为7～10:1混合的混合液作为洗脱剂对所得粗产物进行柱层析，得无色液体，即为l-脯氨酸十二烷基酯；以氯化氢气体与l-脯氨酸十二烷基酯的摩尔比为1.1～1.2:1将氯化氢气体通入到l-脯氨酸十二烷基酯中4～5h，用旋转蒸发器干燥，得到粘稠黄色液体，即为l-脯氨酸十二烷基酯盐酸盐。
9、优选的，所述重组人干扰素α-2b以活性质量比计，含量为1×104～2×108iu/克软膏。
10、优选的，所述重组人干扰素α-2b软膏ph值为5.5-6.5。
11、优选的，所述增稠剂选自羧甲基纤维素钠、卡波姆、伯洛沙姆、黄原胶、羟丙基瓜尔胶和羧甲基纤维素钠中的一种或多种。
12、优选的，所述表面活性剂选自聚乙二醇-7、硬脂酸酯、聚山梨酯-80、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯中的一种或多种。
13、优选的，所述ph调节剂选自柠檬酸、酒石酸、乙酸、氢氧化钠、三乙醇胺中的一种或多种。
14、优选的，所述防腐剂选自对羟基苯甲酸乙酯、苯氧乙醇、聚赖氨酸、山梨酸钾中的一种或多种。
15、优选的，所述稳定剂选自甘油和聚电解质复合物中的一种或两种。
16、进一步优选的，所述稳定剂中聚电解质复合物的制备方法包括以下步骤，按重量份计：
17、将4～4.5份壳聚糖溶解在100～120份1～2mg/ml的乙酸水溶液中，得到壳聚糖溶液；使用恒流泵以600～650μl/min速率将2～2.5份壳聚糖溶液逐滴加入到10～12份1～2wt%的纤维素硫酸钠水溶液中，在23～25℃下搅拌15～20min，得到聚电解质复合物；所得聚电解质复合物用水洗涤2～3次，然后冷冻干燥10～12h，备用；
18、或，将4～4.5份聚乙二醇化壳聚糖溶解在100～120份1～2mg/ml的乙酸水溶液中，得到聚乙二醇化壳聚糖溶液；使用恒流泵以600～650μl/min速率将2～2.5份聚乙醇化壳聚糖溶液逐滴加入到10～12份 1～2wt%的纤维素硫酸钠水溶液中，在23～25℃下搅拌15～20min，得到聚电解质复合物；所得聚电解质复合物用水洗涤2～3次，然后冷冻干燥10～12h，备用。
19、进一步优选的，所述聚乙二醇化壳聚糖的制备方法包括以下步骤，按重量份计：
20、将0.025～0.03份壳聚糖溶解在50～60份2～3mg/ml的乙酸水溶液中，搅拌22～24h；然后用5～6mol/l的氢氧化钠水溶液将ph调节至6～6.3，得到壳聚糖溶液；将0.4～0.45份甲氧基-聚乙二醇-琥珀酰亚胺戊酸酯溶解在8～10份无水二甲基亚砜中，得到甲氧基-聚乙二醇-琥珀酰亚胺戊酸酯溶液；然后将甲氧基-聚乙二醇-琥珀酰亚胺戊酸酯溶液加入壳聚糖溶液中，搅拌48～50h，得到混合溶液；将混合溶液置于透析袋中，用500～600份水透析4～5d，然后将透析过的混合物冻干，得到聚乙二醇化壳聚糖。
21、本发明的目的之二是提供上述重组人干扰素软膏的制备方法，包括以下步骤：
22、将稳定剂和水混合搅拌0.5～1.5h，然后于0.05～0.1mpa、温度为115～135℃的条件下进行加压加温灭菌处理，得到混合体系a；将重组人干扰素α-2b与混合体系a混合搅拌0.5～1.5h，得到重组人干扰素α-2b液体；将增稠剂、促渗剂、表面活性剂、ph调节剂、防腐剂、水于0.05～0.1mpa、温度为115～135℃的条件下进行加压加温灭菌处理，然后置于搅拌容器中在80～85℃、50～100rpm条件下搅拌搅拌混合1～1.5h，然后冷却至25℃以下，得到乳化基质；将重组人干扰素α-2b液体与乳化基质混合搅拌0.5～1.5h，得到软膏，灌装于药用软膏管中，经检定合格后包装成成品，成品软膏内容物重量为4.85g～5.15g/支。
23、甘油：甘油是一种优秀的保湿剂，不仅能够吸收和保留水分，保持软膏的适宜水分含量，还能使皮肤角质层软化，增加药物的渗透性。同时，甘油的溶剂特性有助于重组人干扰素α-2b在软膏基质中的均匀分散，从而提高药物的稳定性和疗效。
24、柠檬酸：柠檬酸作为一种ph调节剂，为重组人干扰素α-2b提供一个稳定的酸性环境，有助于提高药物的稳定性。此外，柠檬酸的螯合作用能够减少金属离子的不良影响，进一步保护药物免受降解。
25、聚山梨酯-80：聚山梨酯-80作为一种表面活性剂，能够降低药物与皮肤之间的界面张力，促进药物的渗透。它的乳化作用还有助于药物在软膏中的均匀分散，提高软膏的稳定性和药物的生物利用度。
26、对羟基苯甲酸乙酯：对羟基苯甲酸乙酯具有抗菌和防腐作用，能够有效防止软膏在储存和使用过程中的微生物污染，保护重组人干扰素α-2b不受微生物降解，延长软膏的有效期。
27、羧甲基纤维素钠：羧甲基纤维素钠作为一种增稠剂，能够提高软膏的粘度和稳定性，使其更易于涂抹和均匀覆盖皮肤表面。羧甲基纤维素钠形成的三维网络结构作为药物载体，有助于药物的均匀分散和缓慢释放，从而促进药物的有效穿透和吸收。
28、β-石竹烯：β-石竹烯作为一种天然渗透增强剂，具有较长的碳链和较高的脂溶性。β-石竹烯能与皮肤角质层脂质相互作用，干扰角质层的脂质排列，导致脂质分子从有序的晶体结构转变为无序的液晶结构，这种结构的变化有助于药物分子的渗透。并且，β-石竹烯可以在脂质双层中运动缓慢，通过与脂质紧密结合，有助于在角质层中的保留，有利于提升药物渗透性。除此之外，β-石竹烯能通过增加皮肤的水分子透过率暂时性降低皮肤屏障功能，这种降低是可逆的，在促进药物渗透的同时，确保了药物渗透后皮肤的自我恢复能力，能够最小化对皮肤屏障的长期破坏，从而减少药物对皮肤的潜在刺激性。与化学合成的渗透增强剂相比，β-石竹烯具有更高的生物相容性，对表皮角质细胞的细胞毒性低，不会引起显著的皮肤红斑反应，在经皮给药中具有巨大的潜力和优势，能够显著提高药物的透皮吸收效率。
29、脯氨酸十二烷基酯盐酸盐：由于大分子药物本身的分子尺寸和复杂性，β-石竹烯在对于大分子药物的递送能力受到药物分子量限制，本发明人发现，对于分子量较大的重组人干扰素α-2b，β-石竹烯的促渗透效果受限。脯氨酸十二烷基酯盐酸盐作为一种化学促渗剂，其结构中的十二烷基酯链可以与皮肤角质层中的脂质相互作用，能够进一步扰乱脂质双层结构，增加脂质分子间的流动性，并且脯氨酸十二烷基酯盐酸盐可与角蛋白的氨基酸残基相互作用，能够导致角蛋白构象发生变化，降低角蛋白网络的紧密度。脯氨酸十二烷基酯盐酸盐的以上的两点特性，有助于形成有利于重组人干扰素α-2b的渗透的通道，减少皮肤屏障的阻力，增强重组人干扰素α-2b在皮肤中的渗透能力。本发明人发现，将脯氨酸十二烷基酯盐酸盐与β-石竹烯协同使用，可以弥补了β-石竹烯在对于高分子量的大分子药物的递送能力受到药物分子量限制的缺陷，共同减少皮肤屏障的阻力，为药物渗透创造更有利的环境，明显提升重组人干扰素α-2b的皮肤渗透效果。此外，当脯氨酸十二烷基酯盐酸盐与β-石竹烯共同使用时，两者可能共同作用于重组人干扰素α-2b，形成一种协同溶解作用，进一步增加药物在皮肤表面的溶解度，并促进药物分子向皮肤深层的扩散。
30、丙二醇：丙二醇作为一种多元醇，可以与脯氨酸十二烷基酯盐酸盐中的十二烷基酯链共同作用，更有效地扰动皮肤角质层的脂质双层结构，增加脂质分子间的流动性，为重组人干扰素α-2b提供更多的穿透途径。与此同时，丙二醇具有出色的水合能力，能够吸收和保留水分，使皮肤角质层变得更加柔软，这种软化作用降低了角质层的屏障功能，使得重组人干扰素α-2b更容易穿透皮肤，从而提高了药物的透皮吸收效率。此外，丙二醇还能改善重组人干扰素α-2b在制剂中的溶解度，提供更多的药物分子用于穿透皮肤，这一点对于提高药物的生物利用度和治疗效果至关重要。
31、本发明的有益效果：
32、与现有技术相比，本发明通过精心选择和配比重组人干扰素α-2b、甘油、柠檬酸、聚山梨酯-80、对羟基苯甲酸乙酯、羧甲基纤维素钠等原料组分，成功制备了具有优异稳定性和疗效的重组人干扰素软膏。这种软膏不仅保持了各组分原有的优势，如甘油的保湿和皮肤软化作用、柠檬酸的ph调节和螯合作用、聚山梨酯-80的促渗和乳化作用、对羟基苯甲酸乙酯的抗菌和防腐作用以及羧甲基纤维素钠的增稠和药物载体功能，而且通过各组分的协同作用，实现了增效效果。这种协同作用不仅提升了药物的渗透效率和生物利用度，还优化了患者的使用体验，提高了治疗的依从性和安全性，为重组人干扰素α-2b的临床应用提供了一种有效的局部给药新选择。
33、本发明通过将β-石竹烯、l-脯氨酸十二烷基酯盐酸盐和丙二醇三种成分结合使用得到本发明促渗剂，将该促渗剂用于制备的重组人干扰素α-2b软膏中，展现出显著的促渗效果和良好的安全性。β-石竹烯、l-脯氨酸十二烷基酯盐酸盐和丙二醇通过互补性促进机制、协同溶解作用、脂质流动性和排列的调节以及减少皮肤屏障的阻力，为药物分子提供了更多的穿透途径，增加了药物的渗透性。这三种成分的协同作用，不仅提高了药物的透皮吸收效率，而且通过调节释放和穿透速率，实现了均匀和持续的药物释放，从而提高了治疗效果并减少了皮肤刺激性。这种配方在确保高生物相容性的同时，优化了经皮给药的效果，为临床治疗提供了一种有效的药物递送策略。
34、此外，本发明还通过将纤维素硫酸钠与聚乙二醇化壳聚糖通过静电相互作用形成的聚电解质复合物，为重组人干扰素α-2b提供了一个稳定的药物递送系统，同时降低了皮肤刺激。聚电解质复合物的三维网络结构增强了药物稳定性，减缓聚集，而聚乙二醇链的引入提升了水溶性和柔性，有助于药物在生物膜的穿透。另外，聚电解质复合物的缓释特性控制了药物释放速率，降低皮肤表面药物浓度，减轻刺激。并且，聚乙二醇化壳聚糖的生物相容性减少了免疫和炎症反应，而水合作用使皮肤角质层软化，减少摩擦。这些机制共同作用，不仅提高了重组人干扰素α-2b的疗效，也优化了患者的使用体验。
1.一种重组人干扰素软膏，其特征在于，按重量份计，各原料组分包括：
2.如权利要求1所述的重组人干扰素软膏，其特征在于，所述氨基酸衍生物选自l-亮氨酸甲酯盐酸盐、l-脯氨酸甲酯盐酸盐、l-脯氨酸十二烷基酯盐酸盐中的一种。
3.如权利要求2所述的重组人干扰素软膏，其特征在于，所述l-脯氨酸十二烷基酯盐酸盐的制备方法包括以下步骤，按重量份计：
4.根据权利要求1所述的重组人干扰素软膏，其特征在于：所述重组人干扰素α-2b以活性质量比计，含量为1×104～2×108iu/克软膏。
5.如权利要求1所述的重组人干扰素软膏，其特征在于：所述增稠剂选自羧甲基纤维素钠、卡波姆、伯洛沙姆、黄原胶、羟丙基瓜尔胶和羧甲基纤维素钠中的一种或多种；所述表面活性剂选自聚乙二醇-7、硬脂酸酯、聚山梨酯-80、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯中的一种或多种。
6.如权利要求1所述的重组人干扰素软膏，其特征在于：所述ph调节剂选自柠檬酸、酒石酸、乙酸、氢氧化钠、三乙醇胺中的一种或多种；所述防腐剂选自对羟基苯甲酸乙酯、苯氧乙醇、聚赖氨酸、山梨酸钾中的一种或多种；所述稳定剂选自甘油和聚电解质复合物中的一种或两种。
7.如权利要求6所述的重组人干扰素软膏，其特征在于，所述稳定剂中聚电解质复合物的制备方法包括以下步骤，按重量份计：
8.如权利要求7所述的重组人干扰素软膏，其特征在于，所述聚乙二醇化壳聚糖的制备方法包括以下步骤，按重量份计：
9.如权利要求1-8任一项所述的重组人干扰素软膏的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
