本发明涉及农产品安全检测的，更具体地，本发明涉及久效磷半抗原、抗原、抗体、检测装置及其制备和应用。
背景技术：
1、免疫学检测分析方法是将化学合成、生物技术与理化测试手段有机结合起来，具有特异性强、灵敏度高、方便快捷、分析容量大、分析费用低、仪器化程度要求不高等特点。在对复杂样品中超微量农药残留分析和现场快速检测方面具有广阔的应用前景和开发潜力。近年来免疫检测技术在农药残留分析方面的研究日益增多，但关于久效磷的免疫检测方法国内外还不多见，目前报道的只有用戊二醛为交联剂制备久效磷人工抗原和包被抗原，免疫得到抗体的效果一般。本发明采用新的合成方法设计和开发出合适的久效磷半抗原，制备得到灵敏度高的久效磷抗体，并由此建立相应的久效磷快速检测方法，实现通过免疫学方法来快速检测农产品中的久效磷残留。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供了久效磷半抗原、抗原、抗体、检测装置及其制备和应用。
2、根据本发明的一个方面，提供了久效磷的免疫半抗原，其结构如式（ⅰ）所示：
3、，式（ⅰ）。
4、根据本发明的另一个方面，提供了久效磷的包被半抗原，其结构如式（ⅱ）所示：
5、，式（ⅱ）。
6、根据本发明的再一个方面，提供了制备久效磷的免疫半抗原或久效磷的包被半抗原的方法，包括以下步骤：
7、s1，将乙酰乙酸叔丁酯与n-氯代丁二酰亚胺发生卤取代反应，得到中间体1，中间体1的结构式见下面反应式（ⅲ）：
8、式（ⅲ）；
9、s2，中间体1与亚磷酸三甲酯在二氯乙烷中加热下发生perkow重排反应，得到中间体2，中间体2的结构式见下面反应式（ⅳ）：
10、式（ⅳ）；
11、s3，中间体2与三氟乙酸发生反应脱去叔丁基，得到中间体3，中间体3的结构式见下面反应式（ⅴ）：
12、式（ⅴ）；
13、s4，将中间体3和n-羟基琥珀酰亚胺反应制成第一活泼酯，第一活泼酯在碱性条件下与4-氨基丁酸反应，得到久效磷的免疫半抗原mcp-h-1，反应式见下式（ⅵ）：
14、式（ⅵ）；
15、s5，将中间体3和n-羟基琥珀酰亚胺在缩合剂作用下，反应制成第二活泼酯，第二活泼酯在碱性条件下与4-氨基甲基苯乙酸反应，得到久效磷的包被半抗原mcp-h-2，反应式见下式（ⅶ）：
16、式（ⅶ）。
17、根据本发明的第四个方面，提供了久效磷抗原包括久效磷免疫抗原和久效磷包被抗原，久效磷免疫抗原为久效磷的免疫半抗原与载体蛋白的偶联物，久效磷包被抗原为久效磷的包被半抗原与载体蛋白的偶联物，载体蛋白为牛血清白蛋白、人血清白蛋白、鸡卵清白蛋白或血蓝蛋白。
18、根据本发明的第五个方面，提供了久效磷的免疫半抗原或久效磷的包被半抗原或久效磷抗原在久效磷的免疫学检测中非疾病诊断的应用。
19、根据本发明的第六个方面，提供了久效磷抗体，久效磷抗体是由久效磷免疫抗原经动物免疫制备得到，久效磷抗体为久效磷单克隆抗体。
20、根据本发明的第七个方面，提供了久效磷抗体在久效磷的免疫学检测中非疾病诊断的应用。
21、根据本发明的第八个方面，提供了一种久效磷胶体金层析检测装置，包括试纸条和反应杯，试纸条包括反应膜，反应膜设有检测区和质控区，检测区包被有久效磷包被抗原，反应杯中含有胶体金标记的久效磷抗体。
22、根据本发明的第九个方面，提供了一种检测样品中久效磷的方法，为采用一种久效磷胶体金层析检测装置，对样品中的久效磷进行检测，样品为农产品。
23、本发明的有益效果：本发明提供的久效磷半抗原的制备方法，使用的化学试剂容易得到、操作过程简单、合成步骤简洁有效、反应产率较高、并且检测成本较低。本发明提供由久效磷的免疫半抗原偶联载体蛋白制备的人工抗原，以及免疫实验动物后使其机体产生的特异性针对抗久效磷的抗体，效价高，对久效磷抗体建立elisa标准曲线其ic50值为7.59ng/ml，对久效磷的线性检测范围（ic20-ic80）为2.28-25.23ng/ml，符合最新颁布的国家标准gb 2763-2021《食品安全国家标准 食品中最大农药残留限量》久效磷的限量规定。因此，本发明可应用于对农产品中久效磷残留含量的快速检测。
1.久效磷的免疫半抗原，其特征在于，其结构如式（ⅰ）所示：
2.久效磷的包被半抗原，其特征在于，其结构如式（ⅱ）所示：
3.制备权利要求1所述的久效磷的免疫半抗原或权利要求2所述的久效磷的包被半抗原的方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.久效磷抗原，其特征在于，所述久效磷抗原包括久效磷免疫抗原和久效磷包被抗原，所述久效磷免疫抗原为权利要求1所述的久效磷的免疫半抗原与载体蛋白的偶联物，所述久效磷包被抗原为权利要求2所述的久效磷的包被半抗原与载体蛋白的偶联物，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、人血清白蛋白、鸡卵清白蛋白或血蓝蛋白。
5.权利要求1所述的久效磷的免疫半抗原或权利要求2所述的久效磷的包被半抗原或权利要求4所述的久效磷抗原在久效磷的免疫学检测中非疾病诊断的应用。
6.久效磷抗体，其特征在于，所述久效磷抗体是由权利要求4所述的久效磷免疫抗原经动物免疫制备得到，所述久效磷抗体为久效磷单克隆抗体。
7.权利要求6所述的久效磷抗体在久效磷的免疫学检测中非疾病诊断的应用。
8.一种久效磷胶体金层析检测装置，其特征在于，包括试纸条和反应杯，所述试纸条包括反应膜，所述反应膜设有检测区和质控区，所述检测区包被有权利要求4所述的久效磷包被抗原，所述反应杯中含有胶体金标记的权利要求6所述的久效磷抗体。
9.一种检测样品中久效磷的方法，其特征在于，所述方法为采用权利要求8所述的一种久效磷胶体金层析检测装置，对样品中的久效磷进行检测，所述样品为农产品。
