本发明涉及医学检测，具体涉及一种套染的染色方法及应用。
背景技术：
1、肝纤维化（hepaticfibrosis）或肝硬化（cirrhosis）在国际疾病分类-11（internationalclassificationofdiseases，icd-11）为db93.0。肝纤维化是指肝脏细胞外基质（即胶原、糖蛋白和蛋白多糖等）的弥漫性过度沉积与异常分布，是肝脏对慢性损伤的病理性修复反应，是各种慢性肝病向肝硬化发展过程中的关键步骤和影响慢性肝病预后的重要环节。肝纤维化进一步发展可引起肝小叶结构紊乱，肝细胞结节性再生，形成假小叶结构即肝硬化，临床上出现肝功能减退和门静脉高压症表现。
2、目前，判断肝脏的炎症和纤维化程度的常用的方法是gordon银氨染色和masson染色，其中，gordon银氨染色显示肝组织内的网状纤维；masson染色显示肝脏组织内胶原纤维、肌纤维等的结构变化情况。但是，现有技术中，常将上述两种染色方法分别染色在2张切片上。因此，不能在同一视野下，同时观察网状纤维支架分布和胶原纤维增生情况；同时肝脏穿刺标本较为珍贵，而在两张玻片上染色易造成标本的浪费，且在观察比对两种染色切片时，需要反复更换切片，导致阅片不方便；最后，两张玻片上染色还会增加人力和耗材成本。
技术实现思路
1、针对以上技术问题，本发明提供一种套染的染色方法及应用。该方法将gordon银氨染色和masson染色进行改良后，合并套染在一张切片上，获得良好的染色效果，可在同一视野下观察肝组织的网状纤维、胶原纤维、肌纤维等变化，降低受检者有创采集样本的量，减轻受检者负担。
2、为解决上述技术问题，本发明采用了如下技术方案：
3、第一方面，本发明提供一种套染的染色方法，在同一切片上先后进行gordon银氨染色和masson染色，其中，在masson染色过程中省略苏木素染色步骤。
4、结合第一方面，在切片上首先进行gordon银氨染色操作，然后将所述切片浸入丽春红酸性品红染液浸染，再在磷钼酸水溶液分化、苯胺蓝染液染色、冰醋酸水溶液冲洗切片，直至切片无蓝色脱出，封固，得套染切片。
5、本发明实施例提供的套染染色方法，通过在同一张切片上先进行gordon银氨染色，再进行masson染色，并省略了masson染色中苏木素染色步骤，实现了将两种染色染方法合并套染，可在同一视野下观察到网状纤维呈黑色，胶原纤维呈蓝色，肌纤维呈红色，定位准确，染色清晰，利于观察不同纤维化程度改变，获得良好的染色效果。从切片、烤片和染色处理等方面提高了工作效率；还节约了玻片和实验相关耗材和人力成本；还可节约珍贵切片一张以用于其他检测，避免了受检者的再次有创采集样本，减轻患者负担。
6、结合第一方面，具体包括以下步骤：
7、s1、取一石蜡组织的切片，脱蜡至水，再经以下处理：高锰酸钾氧化、草酸水溶液漂白、硫酸铁胺水溶液浸泡切片媒染；
8、s2、在经步骤s1处理后的切片上滴加gordon银氨染液、避光5min，滴加新配制的甲醛染液还原，再经氯化金水溶液调色、硫代硫酸钠水溶液固定；
9、s3、切片浸入丽春红酸性品红染液浸染，然后在磷钼酸水溶液分化、再经苯胺蓝染液染色、冰醋酸水溶液冲洗切片，直至切片无蓝色脱出；
10、s4、切片经乙醇稍洗、无水乙醇脱水、二甲苯透明、中性树胶封固，得套染切片。
11、第二方面，本发明还提供一种上述套染的染色方法在组织染色中的应用。
12、可选的，上述套染的染色方法在肝脏组织染色中的应用。
13、本发明实施例中将gordon银氨染色和masson染色染在同一张肝脏组织切片上，使肝组织内的网状纤维、胶原纤维和肌纤维等结构变化情况显示在同一张组织切片上，实现在同一视野下观察网状纤维支架分布和胶原纤维增生变化情况，极大提高了阅片效率，且减少受检者有创采集样本的量。
1.一种套染的染色方法，其特征在于，在同一切片上先后进行gordon银氨染色和masson染色，其中，在masson染色过程中省略苏木素染色步骤。
2.根据权利要求1所述的套染的染色方法，其特征在于，在切片上首先进行gordon银氨染色操作，然后将所述切片浸入丽春红酸性品红染液浸染，再在磷钼酸水溶液分化、苯胺蓝染液染色、冰醋酸水溶液冲洗切片，直至切片无蓝色脱出，中性树胶封固，得套染切片。
3.根据权利要求1或2所述的套染的染色方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的套染的染色方法，其特征在于，步骤s1中，具体包括：
5.根据权利要求3所述的套染的染色方法，其特征在于，步骤s3中，具体包括：
6.根据权利要求3所述的套染的染色方法，其特征在于，步骤s4中，所述无水乙醇脱水为依次使用体积分数为95％、95％、100％、100％的乙醇梯度脱水，直至二甲苯透明。
7.一种权利要求1-6所述套染的染色方法在组织染色中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述套染的染色方法在肝脏组织染色中的应用。
