本发明涉及天然产物提纯，尤其涉及一种茶叶中茶多酚的提取方法。
背景技术：
1、茶叶中除了含有丰富的维生素、氨基酸以及人类需要的矿物质之外，还有茶多酚、茶色素、醌类、黄酮类等物质。其中，茶多酚是茶叶中多羟基酚类化合物的复合物，其主体成分是儿茶素及其衍生物，是茶叶中具有保健功能的主要成分。经研究表明，茶多酚具有抗氧化、抗菌、抗肿瘤、抗辐射等功效，还有降血脂、抑制心血管疾病等功能，也可以用于食品领域和日化行业，由此可见，茶多酚具有广泛的用途和广阔的使用前景。
2、现如今对于茶叶中的多酚物质的提取方法有很多，常见的有溶剂提取法、超声提取法、微波提取法、生物酶提取法等。而如今追求于绿色环保、可持续的理念，低共熔溶剂开始出现人们视野中，引起人们的关注。比如中国专利cn 201810809794.4公开了一种用于提取茶籽粕中茶多酚的低共熔溶剂及提取工艺，此方法利用甘油、脯氨酸和柠檬酸作为低共熔溶剂，但是仅采用低共熔溶剂时不能具有很好的提取效果，只能得到茶多酚粗提物，需要辅助hpd-600大孔树脂层析柱法分离提纯茶多酚粗提物，操作复杂且成本高。
3、因此，亟需提供一种萃取率高、绿色环保且操作成本低的茶叶中茶多酚的提取方法。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种茶叶中茶多酚的提取方法，本发明提供的提取方法萃取率高、绿色环保且操作成本低。
2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
3、本发明提供了一种茶叶中茶多酚的提取方法，包括以下步骤：
4、(1)将茶叶粉与乙醇混合，依次进行超声、静置和离心，得到茶叶处理液；
5、(2)提供低共熔溶剂，所述低共熔溶剂以甜菜碱作为氢键受体，以d-山梨醇作为氢键供体，所述低共熔溶剂中甜菜碱和d-山梨醇的物质的量之比为1∶2；
6、(3)将所述步骤(1)得到的茶叶处理液、正丙醇和所述步骤(2)得到的低共熔溶剂混合，依次进行超声和静置，得到上相和下相，所述上相为茶多酚提取液；所述正丙醇和低共熔溶剂的质量之比为(2.4～3.2)∶2.0；
7、(4)采用福林酚法测定所述步骤(3)中茶多酚提取液的茶多酚提取率。
8、优选地，所述步骤(1)中茶叶粉的质量与乙醇的体积之比为(0.05～0.50)g∶10ml。
9、优选地，所述步骤(2)中低共熔溶剂的制备方法包括加热法、冷冻干燥法、研磨法、微波辅助提取法或超声协助法。
10、优选地，所述加热法包括：将甜菜碱、d-山梨醇和水混合，经加热搅拌，得到低共熔溶剂；所述加热搅拌的加热温度为70～80℃，所述加热搅拌的时间为1h。
11、优选地，所述步骤(1)和(3)中超声的温度独立地为45～65℃。
12、优选地，所述步骤(1)和(3)中超声的时间独立地为10～35min。
13、优选地，所述步骤(3)中茶叶处理液中茶叶粉投加的质量与正丙醇和低共熔溶剂的体积之比为1∶(2.5～4.17)。
14、优选地，所述步骤(4)中福林酚法测定的方法包括：将茶多酚提取液、福林酚稀释液和碳酸钠溶液混合后，用超纯水定容，然后在黑暗处静置后过滤，得到滤液；以蒸馏水作为空白对照测定所述滤液的吸光度，利用标准曲线计算上相的多酚含量，再按照式(1)计算茶多酚的提取率：
15、
16、所述式(1)中：y为茶多酚提取率mg/g；c为上相中的茶多酚含量mg/ml；p为稀释倍数；v为上相的体积ml；m为茶粉的质量g。
17、本发明还提供了上述技术方案所述茶叶中茶多酚的提取方法的工艺条件优化方法，包括以下步骤：
18、(a)利用权利要求1所述的提取方法对茶叶粉进行提取，分别进行单因素试验，得到低共熔溶剂的添加量、料液比、温度和正丙醇的添加量分别对茶多酚提取率的影响曲线，根据所述低共熔溶剂的添加量、料液比、温度和正丙醇的添加量分别对茶多酚提取率的影响曲线分别得到低共熔溶剂的添加量、最佳料液比、最佳温度和最佳正丙醇的添加量的可优化取值；所述料液比为茶叶处理液中茶叶粉投加的质量与正丙醇和低共熔溶剂的体积之比；
19、(b)根据所述步骤(a)得到的低共熔溶剂的添加量、最佳料液比、最佳温度和最佳正丙醇的添加量的可优化取值，按照box-behnken试验原理，确定低共熔溶剂添加量，然后以醇添加量、温度和料液比作为自变量，以茶多酚提取率为响应值，设计响应面试验，得到响应面试验结果；
20、(c)应用统计学软件design-expert 13.0软件对所述步骤(b)得到的响应面试验结果进行回归拟合分析，得到模型预测拟合茶多酚提取率y与醇添加量a、温度b、料液比c的二次多项回归方程，根据所述模型拟合得到最优提取工艺，所述提取工艺包括低共熔溶剂的添加量、料液比、温度和正丙醇的添加量。
21、本发明提供了一种茶叶中茶多酚的提取方法，包括以下步骤：将茶叶粉与乙醇混合，依次进行超声、静置和离心，得到茶叶处理液；提供低共熔溶剂，所述低共熔溶剂以甜菜碱作为氢键受体，以d-山梨醇作为氢键供体，所述低共熔溶剂中甜菜碱和d-山梨醇的物质的量之比为1∶2；将茶叶处理液、正丙醇和所述低共熔溶剂混合，依次进行超声和静置，得到上相和下相，所述上相为茶多酚提取液；所述正丙醇和低共熔溶剂的质量之比为(2.4～3.2)∶2.0；采用福林酚法测定所述茶多酚提取液的茶多酚提取率。本发明选取的低共熔溶剂通过控制氢键受体和氢键供体的种类和比例来改变des的结构和性质，使其与正丙醇构建的双水相体系具有低共熔溶剂与双水相萃取二者的优势，使体系具有条件温和、生物相容性良好、粘度小不易乳化、成本低且对茶多酚提取效果好。实施例结果显示，本发明提供的方法从双水相体系中提取茶多酚的含量为1.21μg/ml，即提取绿茶中茶多酚的含量为31.17mg。
1.一种茶叶中茶多酚的提取方法，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的茶叶中茶多酚的提取方法，其特征在于，所述步骤(1)中茶叶粉的质量与乙醇的体积之比为(0.05～0.50)g:10ml。
3.根据权利要求1所述的茶叶中茶多酚的提取方法，其特征在于，所述步骤(2)中低共熔溶剂的制备方法包括加热法、冷冻干燥法、研磨法、微波辅助提取法或超声协助法。
4.根据权利要求3所述的茶叶中茶多酚的提取方法，其特征在于，所述加热法包括：将甜菜碱、d-山梨醇和水混合，经加热搅拌，得到低共熔溶剂；所述加热搅拌的加热温度为70～80℃，所述加热搅拌的时间为1h。
5.根据权利要求1所述的茶叶中茶多酚的提取方法，其特征在于，所述步骤(1)和(3)中超声的温度独立地为45～65℃。
6.根据权利要求5所述的茶叶中茶多酚的提取方法，其特征在于，所述步骤(1)和(3)中超声的时间独立地为10～35min。
7.根据权利要求1所述的茶叶中茶多酚的提取方法，其特征在于，所述步骤(3)中茶叶处理液中茶叶粉投加的质量与正丙醇和低共熔溶剂的体积之比为1:(2.5～4.17)。
8.根据权利要求1所述的茶叶中茶多酚的提取方法，其特征在于，所述步骤(4)中福林酚法测定的方法包括：将茶多酚提取液、福林酚稀释液和碳酸钠溶液混合后，用超纯水定容，然后在黑暗处静置后过滤，得到滤液；以蒸馏水作为空白对照测定所述滤液的吸光度，利用标准曲线计算上相的多酚含量，再按照式(1)计算茶多酚的提取率：
9.一种如权利要求1所述茶叶中茶多酚的提取方法的工艺条件优化方法，包括以下步骤：
