本发明属于医药学领域，具体涉及一种复方四黄水凝胶及其制备方法。
背景技术：
1、复方四黄外洗剂是中山市中医院的中药复方外用洗剂，是以《肘后备急方》所记载的黄连解毒汤为处方基础，结合外用中药现代药理作用加减而成。它具有清热解毒，去腐生肌，消肿止痛的功效，能促进创面愈合，防止伤口感染，对治疗早期炎症渗出水肿、开放性骨折感染创面、外科感染伤口及手部开放性损伤等效果显著。
2、但由于复方四黄外洗剂为外洗剂，使用时易给患者和医护人员带来不便。该剂型可能导致皮肤吸收不均，造成药效不一，不利于伤口的痊愈等问题；且药液容易蒸发，可能需要一天内多次给药，增加患者或医护人员的工作量。此外患者特殊部位的创面用药时还需要用绷带和纱布固定，易降低患者的顺应性，同时产生耗材和医疗废料，造成浪费。
3、针对上述问题，中国专利202210560512.8公开了“复方四黄复合水凝胶”，其由连翘、黄芩、虎杖、大黄、黄连、黄柏、卡波姆u21、海藻酸钠、透明黄原胶、水溶性壳聚糖、水溶性氮酮、丙二醇、10％氢氧化钠标准溶液、strat-m人工膜、盐酸小檗碱对照品、野黄芩苷对照品、乙腈和双蒸水为原料制备而成，但其原料种类繁多较多、原材料成本昂贵，制备方法复杂且对工艺条件要求高，不利于大规模生产。
技术实现思路
1、本发明的目的在于：提供一种复方四黄水凝胶，该复方四黄水凝胶内部为半互穿共混网络，具有良好溶胀保湿性能和力学性能，能有效地支持皮肤修复，它还具有良好的生物相容性和低溶血率，保证了伤口敷料的安全性。本发明还提供了所述复方四黄水凝胶的制备方法，该制备方法简单、原材料来源广泛，适合大规模生产。
2、为了实现上述目的，本发明采取以下技术方案：
3、一种复方四黄水凝胶，由以下质量百分比的组分组成：
4、
5、以上各组分质量百分比之和为100％。
6、本发明中所述二价金属离子盐为氯化钙。
7、进一步地，优选所述复方四黄水凝胶由以下质量百分比的组分组成：
8、
9、
10、所述壳聚糖季铵盐的取代度为98％。
11、本发明中，所述复方四黄外洗剂冻干粉末由复方四黄外洗剂经冻干后制得；所述复方四黄外洗剂由虎杖、连翘、黄芩、黄柏、黄连、大黄按质量比(1～1.3):(1～2):(1～1.6):(1～1.6):(0.8～1.2):1制备而成。
12、所述复方四黄外洗剂的制备步骤如下：
13、1)按比例取黄芩、大黄、虎杖、连翘，加7～9倍量水，煎煮2～3次，每次1～2h，过滤合并煎液，浓缩至相对密度为1.05～1.10(60℃)，放冷，缓慢加入乙醇使含醇量为68～72％，搅匀，静置过夜，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，并浓缩至相对密度约为1～1.1(60℃)的清膏，备用；
14、2)另取黄连、黄柏，粉碎，加5～7倍量68～72％的乙醇回流提取3次，分别为2h、1h、1h，过滤，合并滤液，回收乙醇，浓缩至相对密度为和步骤1)中相同，加入等量沸水搅拌，过滤，滤液用20％盐酸溶液调节ph至1～2，冷藏，放置过夜，过滤，沉淀物以适量水加热溶解，加入步骤1)中的提取物、以及适量的苯甲酸钠和尼泊金乙酯，加水稀释，搅匀，用20％氢氧化钠溶液调节ph值至ph至6.5～7.5，搅匀，分装，即得。
15、本发明还提供了所述复方四黄水凝胶的制备方法，主要包括以下步骤：
16、s1用去离子水分别配制浓度为5～7wt％的壳聚糖季铵盐溶液，以及丝胶蛋白浓度为3.5～4.5wt％、透明质酸浓度为3.5～4.5wt％的混合溶液1；
17、s2将步骤s1中的壳聚糖季铵盐溶液和混合溶液1按照体积比1:(1～1.5)边搅拌边混合，通过静电作用形成凝胶基质前体，静置使其充分溶胀、排除气泡；
18、s3用去离子水将复方四黄外洗剂冻干粉末配制成浓度为14～16wt％的复方四黄外洗剂溶液，再加入海藻酸钠，充分混匀成混合溶液2；
19、s4用去离子水将氯化钙配制浓度为0.8～1.2wt％的cacl2溶液；
20、s5将步骤s3中配制好的混合溶液2与s2中的凝胶基质前体按体积比(0.5～1):1混合均匀成凝胶剂，按比例加入步骤s4中配制的cacl2溶液，用naoh溶液调节凝胶剂的ph至中性，放入3～6℃环境中静置排气泡，使其均匀稳定，即可。
21、所述步骤s2中，壳聚糖季铵盐溶液和混合溶液1按照体积比1:1边搅拌边混合。
22、所述步骤s5中，混合溶液2与凝胶基质前体混合的体积比为0.5:1。
23、所述步骤s5中，cacl2溶液的加入量为凝胶剂质量的1～1.6％。
24、本发明中，不能直接在凝胶剂中加入氯化钙粉末，凝胶富含水分，直接加氯化钙粉末时，仅凝胶表面可形成交联，难以形成均匀的胶。本发明中将氯化钙配制成浓度为0.8～1.2wt％的cacl2溶液，避免了cacl2浓度过高会导致胶体脆化。
25、所述步骤s1、s3、s4配制溶液时，将配制的溶液置于磁力搅拌器上以300rmp，搅拌15min，使溶质充分溶解。
26、本发明中壳聚糖季铵盐带正电，与带负电的混合溶液1一起混合时，通过静电作用形成均匀的凝胶基质前体。再加入海藻酸钠和少量氯化钙，二次交联，提高凝胶的机械性能，并负载复方四黄外洗剂，制备了具有半互穿共混网络的复方四黄水凝胶，进一步提高了水凝胶的力学稳定性。本发明复方四黄水凝胶通过调节胶原纤维沉积和新结缔组织形成来促进创面再生，并且促进伤口血管生成，进一步加速创面愈合。
27、本发明中使用到的各种溶液一般均为现配现用，因为提前较长时间配制的溶液中含有各种杂质或细菌，影响到本发明产品复方四黄水凝胶的使用效果，因此，非必要不使用提前较长时间配制好的溶液制胶。
28、本发明相对于现有技术而言，有益效果如下：
29、1.本发明的复方四黄水凝胶为多孔结构，其具有良好的溶胀保湿性及力学性能，能有效地支持皮肤修复，且具有良好的生物相容性，更适合于伤口敷料；
30、2.本发明复方四黄水凝胶的制备方法简单，原料成本低，适合大规模生产；
31、3.本发明制备的复方四黄水凝胶具有明显的缓释效果，有利于减少给药次数，减少了患者或医护人员的工作量；
32、4.本发明制备的复方四黄水凝胶具有良好的生物相容性和低溶血率，进一步提高了伤口敷料的安全性；
33、5.本发明制备的复方四黄水凝胶具有良好的降解性，不会对环境造成污染。
34、说明书附图
35、图1为csh@gel和gel的成品图。
36、图2为csh@gel和gel的断面形貌图；
37、其中：2a为放大200x时csh@gel的sem图；2b为放大200x时gel的sem图；2c为放大50x时csh@gel的sem图；2d为放大50x时gel的sem图。
38、图3为水凝胶中各组分的ft-ir红外光谱图。
39、图4为csh@gel和gel的溶胀性能(mean±sd，n＝3)。
40、图5为csh@gel和gel的降解性能(mean±sd，n＝3)。
41、图6为csh@gel和gel的dsc曲线对比图。
42、图7为csh@gel和gel的储能模量(g′)与损耗模量(g″)的温度依赖性。
43、图8为csh@gel和gel的储能模量(g′)和损耗模量(g″)的应变依赖性。
44、图9为剪切应力与储能模量和损耗模量的变化关系。
45、图10为水凝胶的载药与释药性能对比图；
46、其中：10a为ber的标准曲线；10b为游离ber和负载ber的水凝胶在37℃恒温的透析液(ph＝6.8，pbs:dmso＝2:1)中的释放情况(mean±sd，n＝3)。
47、图11为csh、gel和csh@gel对(raw 264.7细胞与nih-3t3细胞的毒性(mean±sd，n＝3)；与对照组相比，**p<0.01***p<0.001。
48、图12为csh、gel和csh@gel的溶血率对比图。
49、图13为csh、gel和csh@gel的体外抑菌活性测试图；
50、其中：13a为csh、gel和csh@gel分别处理后存活菌落生长情况图像；13b为csh、gel和csh@gel分别处理后od600法测得的大肠杆菌浓度；13c为csh、gel和csh@gel分别处理后od600法测得的黄色葡萄球菌浓度(与对照组比较*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001)。
51、图14为csh、gel和csh@gel的体外抗炎活性测试图；
52、其中：14a、14b、14c分别为qpcr法检测tnf-α、il-1β、il-6(mean±sd，n＝3)，与lps组相比，*p<0.05，***p<0.001与对照组相比，###p<0.001。
53、图15为csh、gel和csh@gel的体内生物活性评价。
54、其中15a为各组大鼠的感染创面愈合进程图(mean±sd，n＝8)；图15b为各组大鼠对应时间点的伤口面积(mean±sd，n＝8)，与模型组相比*p<0.05，**p<0.01)；15c为创面愈合率(mean±sd，n＝8)，与模型组相比*p<0.05，**p<0.01。
55、图16为用csh、gel和csh@gel处理伤口第10天和第14天时lb琼脂板上的真实细菌的cfu图像。
56、图17为伤口愈合状况的h&e染色评价结果图。
57、图18为胶原重建效果的masson染色评价结果图。
58、图19为各组创面第4、10和14天cd31免疫阳性分析(lsa×200)。
1.一种复方四黄水凝胶，其特征在于由以下质量百分比的组分组成：
2.根据权利要求1所述的复方四黄水凝胶，其特征在于所述二价金属离子盐为氯化钙。
3.根据权利要求2所述的复方四黄水凝胶，其特征在于由以下质量百分比的组分组成：
4.根据权利要求1中所述的复方四黄水凝胶，其特征在于所述复方四黄外洗剂冻干粉末由复方四黄外洗剂经冻干后制得；所述复方四黄外洗剂由虎杖、连翘、黄芩、黄柏、黄连、大黄按质量比(1～1.3):(1～2):(1～1.6):(1～1.6):(0.8～1.2):1制备而成。
5.一种权利要求1至4中任一项所述的复方四黄水凝胶的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
6.根据权利要求5中所述的复方四黄水凝胶的制备方法，其特征在于所述步骤s2中，壳聚糖季铵盐溶液和混合溶液1按照体积比1:1边搅拌边混合。
7.根据权利要求5中所述的复方四黄水凝胶的制备方法，其特征在于所述步骤s5中，混合溶液2与凝胶基质前体混合的体积比为0.5:1。
8.根据权利要求5中所述的复方四黄水凝胶的制备方法，其特征在于所述步骤s5中，cacl2溶液的加入量为凝胶剂质量的1～1.6％。
