本发明属于药物质量检测，具体涉及一种基于一测多评法的肾石通颗粒质量控制方法。
背景技术：
1、肾石通颗粒由金钱草、延胡索(醋制)、鸡内金(烫)、王不留行(炒)、萹蓄、瞿麦、牛膝、海金沙、丹参、木香组成，具有清热利湿，活血止痛，化石，排石的功效，用于治疗肾结石，肾盂结石，膀胱结石，输尿管结石。肾石通颗粒的质量标准收载于《中华人民共和国卫生部药品标准--中药成方制剂》中，其中只有性状和检查项，对各主要成分的含量测定未作规定。
2、对于传统中成药复方制剂的质量控制，目前多采用薄层色谱法和高效液相色谱法(hplc)对单味药活性成分进行定性和定量鉴别，不能全面反映肾石通颗粒中的化学成分及其相对含量。一测多评法是由王智民提出的通过测定1种代表性成分的含量，依据相对校正因子完成对多种成分含量测定的方法，能够有效解决对照品缺乏的问题，节约检测成本，从而完成对中药及其复方制剂所含多成分的质量控制。目前还没有应用一测多评法同时测定肾石通颗粒中多种成分含量的质量控制方法，且现有方法多只测定其中一两种成分，缺乏代表性，很难有效反映制剂的整体质量；或者需要使用多个成分对照品，检测成本高。因此，有必要基于一测多评法开发一种肾石通颗粒质量控制方法，以更有效的反映制剂的整体质量，并降低检测成本。
技术实现思路
1、为了克服上述现有技术的不足，本发明提出了一种基于一测多评法的肾石通颗粒质量控制方法，该方法在节约对照品，降低质量控制成本的同时，能够同时得到肾石通颗粒中两味药(王不留行，丹参)的三种主要成分的含量，更具有代表性，更能准确反映制剂的质量。
2、为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：
3、本发明第一方面提供了一种基于一测多评法的肾石通颗粒检测方法，包括以下步骤：
4、s1、将肾石通颗粒溶于75％甲醇中制成14-16g/50ml的溶液，即得供试品溶液；
5、s2、将王不留行黄酮苷溶于甲醇中制成390-410μg/ml的对照品储备溶液，使用前再稀释至125-130μg/ml即得对照品溶液；
6、s3、将供试品溶液和对照品溶液分别进样进行高效液相色谱(hplc)测定，计算峰面积后，利用外标法计算得到王不留行黄酮苷的含量；
7、s4、根据公式fsi＝fs/fi＝(as/ws)/(ai/wi)，分别计算丹酚酸b、丹酚酸a的含量；其中，fsi为相对校正因子，as为供试品中王不留行黄酮苷的峰面积，ws为供试品中王不留行黄酮苷的浓度，ai为供试品中某待测成分峰面积，wi为供试品中某待测成分的浓度；丹酚酸b和丹酚酸a的fsi分别为2.347，0.930。
8、本发明利用一测多评法建立了一种肾石通颗粒检测方法，在已知肾石通颗粒中王不留行黄酮苷含量的情况下，可以依据相对校正因子直接计算得到丹酚酸a和丹酚酸b的含量，进而实现肾石通颗粒中两味药(王不留行，丹参)的三种主要成分(王不留行黄酮苷，丹酚酸a，丹酚酸b)的含量测定。本发明在节约对照品，降低质量控制成本的同时，能够同时得到肾石通颗粒中三种主要成分的含量，更具有代表性，更能准确反映制剂的质量，具有广阔的应用前景。
9、优选地，所述高效液相色谱测定所用的色谱柱为ultimate xb-c18，规格4.6×250mm，5μm。
10、优选地，所述高效液相色谱测定的进样量为15-25μl，检测波长为350-370nm。
11、优选地，所述高效液相色谱测定的流速为0.9-1ml/min。更优选的流速为1ml/min。
12、优选地，所述高效液相色谱测定的柱温为25-30℃。更优选的柱温为30℃。
13、优选地，所述高效液相色谱测定的流动相为：乙腈(b)-0.2％磷酸水溶液(a)，梯度洗脱程序为：0-30min 5％b-20％b，95％a-80％a；30-60min 20％-45％b，80％a-55％a；60-65min45％-5％b，55％a-95％a；65-70min 5％b，95％a。
14、优选地，步骤s1中，通过超声将肾石通颗粒溶于75％甲醇中，超声的时间为45-60min。更优选的超声时间为60min。
15、优选地，供试品溶液在进行高效液相色谱测定前，先经过0.22-0.45μm微孔滤膜过滤。
16、本发明第二方面提供了第一方面所述的肾石通颗粒检测方法在肾石通颗粒质量控制中的应用。
17、与现有技术相比，本发明的有益效果是：
18、现有肾石通颗粒质量控制方法大多只测定肾石通颗粒中一到两种成分的含量，缺乏代表性，很难有效反映制剂的整体质量。为此，本发明利用一测多评法建立了一种同时测定肾石通颗粒中两味药(王不留行，丹参)的三种主要成分(王不留行黄酮苷，丹酚酸a，丹酚酸b)的含量测定方法，在已知肾石通颗粒中王不留行黄酮苷含量的情况下，可以依据相对校正因子直接计算得到丹酚酸a和丹酚酸b的含量。本发明能够在只使用王不留行黄酮苷一种成分对照品的情况下，同时测出肾石通颗粒中三种主要成分的含量，大大减少对照品的使用，降低检测成本。同时，检测多种主要成分含量更能准确反映制剂的质量，更有利于质量控制。此外，本发明还测定了丹酚酸a成分，目前还没有关于测定肾石通颗粒中丹酚酸a成分含量的方法。
1.一种基于一测多评法的肾石通颗粒检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种基于一测多评法的肾石通颗粒检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱测定所用的色谱柱为ultimate xb-c18，规格4.6×250mm，5μm。
3.根据权利要求1所述的一种基于一测多评法的肾石通颗粒检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱测定的进样量为15-25μl，检测波长为350-370nm。
4.根据权利要求1所述的一种基于一测多评法的肾石通颗粒检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱测定的流速为0.9-1ml/min。
5.根据权利要求1所述的一种基于一测多评法的肾石通颗粒检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱测定的柱温为25-30℃。
6.根据权利要求1所述的一种基于一测多评法的肾石通颗粒检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱测定的流动相为：乙腈(b)-0.2％磷酸水溶液(a)，梯度洗脱程序为：0-30min5％b-20％b，95％a-80％a；30-60min 20％-45％b，80％a-55％a；60-65min 45％-5％b，55％a-95％a；65-70min 5％b，95％a。
7.根据权利要求1所述的一种基于一测多评法的肾石通颗粒检测方法，其特征在于，步骤s1中，通过超声将肾石通颗粒溶于75％甲醇中，超声的时间为45-60min。
8.根据权利要求1所述的一种基于一测多评法的肾石通颗粒检测方法，其特征在于，供试品溶液在进行高效液相色谱测定前，先经过0.22-0.45μm微孔滤膜过滤。
9.权利要求1-8任一项所述的肾石通颗粒检测方法在肾石通颗粒质量控制中的应用。
