本发明属于药物检测，具体涉及一种检测甲氧依托咪酯盐酸盐对映体含量的分析方法。
背景技术：
1、随着立体化学的发展，手性药物的立体选择性研究备受关注。具有相同物理化学性质的手性异构体在生物体内可能表现出截然不同的吸收、代谢、药理作用、致畸、致癌、致突变和内分泌干扰活性等性质，因此对于具有不对称中心的手性药物，开发手性化合物分离分析方法是必要的。甲氧依托咪酯盐酸盐是一种短效静脉全身麻醉药，作为一种新型的依托咪酯类似物，其可减少依托咪酯引起的肾上腺皮质功能抑制，同时具有依托咪酯的快速起效镇静催眠和稳定的血流动力学特征。甲氧依托咪酯盐酸盐是一种含咪唑基的羧化物，化学名为r-(+)-1-(1-苯乙基)-1h-咪唑-5-羧酸甲氧基乙酯盐酸盐，其结构如下式1所示。
2、
3、甲氧依托咪酯盐酸盐结构中存在一个手性中心，具有两种光学异构体[r(+)]与[s(-)]，但只有[r(+)]具有催眠作用，因此考虑到药品的安全性和有效性，需要严格控制甲氧依托咪酯盐酸盐中对映体的含量。目前尚未见检测甲氧依托咪酯盐酸盐对映体含量的分析方法的相关报道。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种甲氧依托咪酯盐酸盐对映体含量的分析方法；本发明具有良好的专属性、灵敏度、重复性和准确度，从而更全面地实现甲氧依托咪酯盐酸盐的质量控制。
2、本发明提供了一种检测甲氧依托咪酯盐酸盐对映体含量的分析方法，包括如下步骤：
3、(1)溶液的配制
4、1)取供试品，制成供试品溶液；
5、2)取甲氧依托咪酯盐酸盐对映体对照品，制成对照品溶液；
6、3)取甲氧依托咪酯盐酸盐对映体对照品和甲氧依托咪酯盐酸盐对照品，制成系统适用性溶液；
7、(2)定性检测：将所述系统适用性溶液、所述对照品溶液和所述供试品溶液分别采用高效液相色谱法检测，并记录色谱图；根据所述系统适用性溶液、所述对照品溶液的色谱图中色谱峰，得到所述供试品溶液中甲氧依托咪酯盐酸盐对映体的定性检测色谱峰；
8、(3)定量检测：根据所述对照品溶液的浓度与其色谱图中色谱峰峰面积，及所述供试品溶液中甲氧依托咪酯盐酸盐对映体的色谱峰峰面积，计算，得到所述供试品溶液中甲氧依托咪酯盐酸盐对映体的浓度；然后根据所述供试品溶液的浓度分析，即得到所述供试品溶液中甲氧依托咪酯盐酸盐对映体的含量。
9、上述分析方法，步骤(1)-1)～(1)-3)中，溶剂均采用相同的稀释剂；
10、所述稀释剂为甲醇和乙醇的混合液；
11、上述分析方法中，所述甲醇和所述乙醇的体积比为1：1。
12、上述分析方法中，所述高效液相色谱法采用的色谱条件如下：
13、检测器为紫外检测器或二极管阵列检测器；
14、检测波长为239nm～241nm；
15、固定相为多糖衍生物正相手性柱(oj-h chiralcel，4.6×250mm，5μm)；
16、流动相为正己烷-乙醇-二乙胺，体积比为89～91:9～11:0.1；
17、流速为0.9ml/min～1.1ml/min；
18、柱温为30℃～40℃；
19、进样体积5μl。
20、上述分析方法中，所述高效液相色谱法采用的色谱条件如下：
21、检测器为紫外检测器或二极管阵列检测器；
22、检测波长为240nm；
23、固定相为多糖衍生物正相手性柱(oj-h chiralcel，4.6×250mm，5μm)；
24、流动相为正己烷-乙醇-二乙胺，体积比为90:10:0.1；
25、流速为1.0ml/min；
26、柱温为35℃；
27、进样体积5μl。
28、上述分析方法中，所述系统适用性溶液的色谱图中所述甲氧依托咪酯盐酸盐对照品与所述甲氧依托咪酯盐酸盐对映体对照品的色谱峰之间分离度大于1.5；
29、所述对照品溶液中甲氧依托咪酯盐酸盐对映体峰面积重复测定3～6次，具体可为5次，rsd不大于5.0％。
30、上述分析方法中，所述供试品溶液的制备方法：取所述供试品适量，精密称定，加所述稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml含甲氧依托咪酯盐酸盐2mg～4mg的溶液。上述分析方法中，所述对照品溶液的制备方法：取所述甲氧依托咪酯盐酸盐对映体对照品适量，精密称定，加所述稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml含甲氧依托咪酯盐酸盐1.0～31.2μg的溶液。
31、上述分析方法中，所述系统适用性溶液的制备方法：取所述甲氧依托咪酯盐酸盐对映体对照品和所述甲氧依托咪酯盐酸盐对照品适量，精密称定，加所述稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml含甲氧依托咪酯盐酸盐2mg～4mg和甲氧依托咪酯盐酸盐对映体2～31.2μg的溶液。
32、上述分析方法中，所述计算方法采用外标法。
33、上述分析方法中，步骤(2)还包括配制杂质定位溶液，并采用所述高效液相色谱法检测，以排除对所述甲氧依托咪酯盐酸盐映异构体检测的干扰峰；
34、所述杂质定位溶采用2-巯基依托咪酯、依托咪酯杂质c、依托咪酯、美托咪酯、杂质a、杂质c、依托咪酯酸和杂质b配制，溶剂为所述稀释剂；
35、所述依托咪酯杂质c的结构式如式ⅰ所示：
36、
37、所述杂质a，化学名为1-(1-(3-羟基苯基)乙基)-1h-咪唑-5-羧酸-2-甲氧基乙酯，分子式为c15h16n2o4，结构式如式ⅱ所示：
38、
39、所述杂质b，化学名为r-(+)-1-(1-苯乙基)-1h-咪唑-5-羧酸甲氧基乙二酯盐酸盐，分子式为c26h28cl2n4o4，结构式如式ⅲ所示：
40、
41、所述杂质c，化学名为r-(+)-1-(1-苯乙基)-1h-咪唑-5-甲酸羟乙基酯，分子式为c14h16n2o3，结构式如式ⅳ所示：
42、
43、本发明中，所述2-巯基依托咪酯，化学名为r-(+)-1-(1-苯乙基)-1h-咪唑-2-巯基-5-甲酸乙酯，分子式为c14h16n2o2 s，结构式如式ⅴ所示：
44、
45、所述依托咪酯，化学名为r-(+)-1-(1-苯乙基)-1h-咪唑-5-甲酸乙酯，分子式为c14h16n2o2，结构式如式ⅵ所示：
46、
47、所述美托咪酯，化学名为r-(+)-1-(1-苯乙基)-1h-咪唑-5-甲酸甲酯，分子式为c13h14n2o2，结构式如式ⅶ所示：
48、
49、所述依托咪酯酸，化学名为r-(+)-1-(1-苯乙基)-1h-咪唑-5-甲酸，分子式为c12h12n2o2，结构式如式ⅷ所示：
50、
51、本发明具有以下有益效果：
52、本发明弥补了甲氧依托咪酯盐酸盐对映体含量检测技术的空缺，本发明摸索并优化出高效液相的色谱条件，实现了对甲氧依托咪酯盐酸盐对映体定性定量的检测；并且本发明的分析方法具有良好的专属性，灵敏度高(具体的实验中定量限溶液的浓度为1.016μg/ml，信噪比均不小于10，重复进样6次的峰面积rsd为7.3％，小于10.0％；检测限溶液的浓度为0.305μg/ml，信噪比不小于3)，具有重复性，准确度高(具体实验中采用3个浓度水平的9份准确度溶液，回收率均在90％～108％之间，rsd值均小于10％)，精密度良好，耐用性好(适用色谱条件范围较宽、室温(25℃)条件放置4～24小时是稳定的)，对甲氧依托咪酯盐酸盐的质量控制、保证用药安全有重要意义。
1.一种检测甲氧依托咪酯盐酸盐对映体含量的分析方法，包括如下步骤：
2.根据权利要求1中所述分析方法，其特征在于，步骤(1)-1)～(1)-3)中，溶剂均采用相同的稀释剂；
3.根据权利要求2中所述分析方法，其特征在于，所述甲醇和所述乙醇的体积比为1：1。
4.根据权利要求1或2中所述分析方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用的色谱条件如下：
5.根据权利要求1-4中任一项所述分析方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用的色谱条件如下：
6.根据权利要求1-5中任一项所述分析方法，其特征在于，所述系统适用性溶液的色谱图中所述甲氧依托咪酯盐酸盐对照品与所述甲氧依托咪酯盐酸盐对映体对照品的色谱峰之间分离度大于1.5；
7.根据权利要求1-6中任一项所述分析方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法：取所述供试品适量，精密称定，加所述稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml含甲氧依托咪酯盐酸盐2mg～4mg的溶液。
8.根据权利要求1-7中任一项所述分析方法，其特征在于，所述对照品溶液的制备方法：取所述甲氧依托咪酯盐酸盐对映体对照品适量，精密称定，加所述稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml含甲氧依托咪酯盐酸盐1～31.2μg的溶液。
9.根据权利要求1-8中任一项所述分析方法，其特征在于，所述系统适用性溶液的制备方法：取所述甲氧依托咪酯盐酸盐对映体对照品和所述甲氧依托咪酯盐酸盐对照品适量，精密称定，加所述稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml含甲氧依托咪酯盐酸盐2mg～4mg和甲氧依托咪酯盐酸盐对映体2～31.2μg的溶液。
10.根据权利要求1-9中任一项所述分析方法，其特征在于，所述计算方法采用外标法；
