本发明属于基因疾病诊断,具体涉及一种检测前列腺癌的环状rna生物标志物及其应用。
背景技术:
1、前列腺癌是一种常见的恶性肿瘤,并且是造成男性肿瘤死亡的第二大病因。雄激素剥夺治疗(androgen deprivation therapy,adt)是对这部分患者的最主要治疗方法。尽管在adt治疗初期前列腺癌被不同程度的控制,但经过大约18个月敏感期后,大部分患者的疾病会逐渐出现不可逆的进展。因此,早期筛查对于前列腺癌的早期诊断和预后至关重要。血清前列腺特异抗原(psa)是目前已被批准的前列腺癌筛查手段,并已被证明可降低前列腺癌死亡率。然而,psa作为筛查试验的假阳性率较高,会导致大量阴性的有创前列腺活检;此外,约15%的psa正常患者患有前列腺癌。因此,探寻敏感性和特异性更高的前列腺癌筛查工具,一直是前列腺癌研究的热点。
2、circrna环状rna(circular rna,circrna)是一种内源性的非编码rna(noncodingrna,ncrna)。实际上,circrna种类繁多且高度保守,在自然界生物细胞中广泛表达。与很多基因的表达相类似,circrna的表达同时具有时间特异性以及空间特异性。作为竞争性内源rna(competing endogenous rna,cerna),circrna在体内主要是通过结合微小rna(microrna)发挥分子海绵(molecular sponges)作用进而对基因表达起调控作用。由于circrna分子呈环状,性质稳定,rna水解酶(rnaser)无法结合以及降解circrna,因此其作为有关疾病的新诊断或预后标志物的潜能巨大。
技术实现思路
1、为了弥补现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种前列腺癌的环状rna生物标志物及其应用,通过检测has_circ_00008234的水平,可以判断受试者是否患有前列腺癌,并从前列腺癌的高危人群前列腺增生患者中筛查出前列腺癌患者。
2、为解决上述技术问题,本发明提供了以下技术方案:
3、本发明提供了用于检测环状rna的试剂在制备诊断前列腺癌产品中的应用,所述环状rna为has_circ_00008234。
4、优选的,所述has_circ_00008234在前列腺癌样本中表达上调。
5、优选的,所述试剂为用于反转录pcr、实时定量pcr、原位杂交、芯片检测has_circ_00008234的试剂。
6、优选的,通过反转录pcr检测has_circ_00008234的试剂包括特异性扩增has_circ_00008234的引物,通过实时定量pcr检测has_circ_00008234的试剂包括特异性扩增has_circ_00008234的引物或探针,通过原位杂交检测has_circ_00008234的试剂包括特异性识别has_circ_00008234的探针,通过芯片检测has_circ_00008234的试剂包括特异性识别has_circ_00008234的探针。
7、优选的,所述试剂用于检测血清或尿液样本。
8、优选的,所述产品包括芯片、试剂盒或核酸膜条。
9、本发明提供一种诊断前列腺癌的试剂盒,所述试剂盒包括实时定量pcr扩增所述has_circ_00008234的引物对;所述引物对包括上游引物和下游引物,所述上游引物的碱基序列如seq id no.1所示,所述下游引物的碱基序列如seq id no.2所示。
10、优选的,所述试剂盒还包括qpcr预混液和无酶水。
11、与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
12、本发明本首次提出has_circ_00008234在前列腺癌患者中表达上调,通过检测has_circ_00008234的表达水平,可以判断受试者是否患有前列腺癌或者是否存在患有前列腺癌的风险,并区分前列腺恶性肿瘤和良性前列腺增生,从而实现前列腺癌的筛查和诊断。
13、本发明可通过反转录pcr、实时定量pcr、原位杂交、组织芯片技术检测has_circ_00008234,相对于前列腺增生样本,has_circ_00008234明显表达上调,表明该样本具有前列腺癌的风险。
1.用于检测环状rna的试剂在制备诊断前列腺癌产品中的应用,其特征在于,所述环状rna为has_circ_00008234。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述has_circ_00008234在前列腺癌样本中表达上调。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述试剂为用于反转录pcr、实时定量pcr、原位杂交、芯片检测has_circ_00008234的试剂。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,通过反转录pcr检测has_circ_00008234的试剂包括特异性扩增has_circ_00008234的引物,通过实时定量pcr检测has_circ_00008234的试剂包括特异性扩增has_circ_00008234的引物或探针,通过原位杂交检测has_circ_00008234的试剂包括特异性识别has_circ_00008234的探针,通过芯片检测has_circ_00008234的试剂包括特异性识别has_circ_00008234的探针。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述试剂用于检测血清或尿液样本。
6.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述产品包括芯片、试剂盒或核酸膜条。
7.一种诊断前列腺癌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括实时定量pcr扩增所述has_circ_00008234的引物对;所述引物对包括上游引物和下游引物,所述上游引物的碱基序列如seq id no.1所示,所述下游引物的碱基序列如seq id no.2所示。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括qpcr预混液和无酶水。