本发明属于生物医药技术，涉及治疗类风湿性关节炎（ra）的药物，具体涉及一种共递送多核酸药物的聚合物囊泡及其制备方法与治疗ra的应用。
背景技术：
1、针对类风湿性关节炎（ra）这种复杂的多基因控制的自身免疫疾病，现有技术公开了多种免疫抑制剂[guo, k.; et al., treatment effects of the second-generationtyrosine kinase inhibitor dasatinib on autoimmune arthritis. frontiers inimmunology 2018, 9, 3133. liu, s.; et al., recent advances on signalingpathways and their inhibitors in rheumatoid arthritis. clinical immunology2021, 230, 108793. tenshin, h.; et al., tgf-beta-activated kinase-1 inhibitorll-z1640-2 reduces joint inflammation and bone destruction in mouse models ofrheumatoid arthritis by inhibiting nlrp3 inflammasome, tace, tnf-alpha andrankl expression. clinical pharmacology and therapeutics 2022, 11, e1371.]。但临床结果表明，持续用免疫抑制治疗ra容易削弱免疫系统功能，增加病患感染风险[chen,h. k.; et al., risk of heart failure in rheumatoid arthritis patients treatedwith tumor necrosis factor-alpha inhibitors. clinical pharmacology andtherapeutics 2021, 110, 1595-1603.]。ra的发病机制涉及到复杂的基因通路和炎症网络，包括多种细胞因子和炎症细胞之间的串联[chen, x.; et al., restoringimmunological tolerance in established experimental arthritis bycombinatorial citrullinated peptides and immunomodulatory signals. nano today2021, 41, 101307. ]；最重要的炎症细胞之一巨噬细胞能通过分泌多种促炎细胞因子调节ra免疫微环境[chen, z.; et al., anti-inflammatory and immune-regulatorycytokines in rheumatoid arthritis. nature reviews rheumatology 2019, 15, 9-17. ]。甲氨蝶呤（mtx）是最常用的ra临床一线用药，主要通过切断叶酸转变成四氢叶酸来选择性作用于dna合成期，以抑制免疫细胞增值及作用于腺苷通路来达到抗炎作用；但长期用药导致肠胃不适和肝功能损伤等。基于ra发病机制的复杂性，临床常采用多药联用，研究者也设计了多种纳米药物的联合治疗。虽然理论上，设计合适的药物联用可能从不同机制协同地阻断ra病程，但是现有联合药物相对于单药的改善还需提升，药物剂量还需下降。
技术实现思路
1、本发明设计了四个甘露糖配体簇修饰的共载双核酸药物（sitnfα和siirf5）的囊泡（4man-ps-siit），通过抑制病变部位巨噬细胞内经典炎症tnf-α通路和tlr通路来改善ra免疫微环境，实现高效协同抑制ra进程、治疗ra。
2、本发明采用如下技术方案：
3、一种共递送多核酸药物的聚合物囊泡，包括聚合物及其装载的核酸药物；所述多核酸药物包括tnf-α小干扰rna（sitnfα）和toll样受体（tlr）小干扰rna（siirf5）；所述聚合物为亲水链段-p(酯-dtc)-阳离子片段，或者所述聚合物为亲水链段-p(酯-dtc)-阳离子片段、靶向分子-亲水链段-p(酯-dtc)的混合物。
4、本发明公开了上述共递送多核酸药物的聚合物囊泡的制备方法，以聚合物、核酸药物为原料，组装得到共递送多核酸药物的聚合物囊泡。
5、本发明公开了上述共递送多核酸药物的聚合物囊泡在制备抗炎药物中的应用。优选的，抗炎中，炎症包括体内炎症、体外炎症，优选的，炎症包括风湿性关节炎、炎症性肠病、红斑狼疮，进一步优选的，炎症包括风湿性关节炎。
6、本发明中，多核酸药物为双核酸药物，具体为tnf-α小干扰rna（sitnfα）和toll样受体（tlr）小干扰rna；优选的，双核酸药物为sitnfα和siirf5，通过抑制病变部位巨噬细胞内经典炎症tnf-α通路和tlr通路来改善ra免疫微环境，实现高效协同抑制ra进程、治疗ra。进一步优选的，sitnfα、siirf5的质量比为1∶（0.2～5），优选的，sitnfα、siirf5的质量比为1∶（0.3～2.5），进一步优选的，sitnfα、siirf5的质量比为1∶（0.5～1.5）。
7、本发明中，所述亲水链段-p(酯-dtc)-阳离子片段由亲水链段、疏水链段以及阳离子片段组成，靶向分子-亲水链段-p(酯-dtc)由靶向分子、亲水链段、疏水链段组成。疏水链段是酯、dtc无规共聚链段，称为p(酯-dtc)；其中酯为常规药学上可接受的酯单体、碳酸酯单体等，包括直链结构、支链结构以及环结构，比如三亚甲基碳酸酯单体tmc、丙交酯单体la、己内酯单体cl等。
8、本发明中，亲水链段为聚乙二醇链段（peg）；疏水链段的分子量为亲水链段分子量的2～10倍，优选2～6倍；pdtc链段的分子量为疏水链段总分子量的5%～30%，优选10～20%，pdtc链段是指dtc单元组成的链段。优选的，peg的分子量为2000～12000 da，优选的分子量为3000～8000 da。
9、本发明中，阳离子片段包括精胺、聚乙烯亚胺，优选为聚乙烯亚胺。优选的，聚乙烯亚胺的分子量为亲水链段分子量的10%～30%，优选20～27%。
10、本发明中，所述聚合物为亲水链段-p(酯-dtc)-阳离子片段、靶向分子-亲水链段-p(酯-dtc)的混合物时，靶向分子-亲水链段-p(酯-dtc)、亲水链段-p(酯-dtc)-阳离子片段的摩尔比为1∶（5～15），优选1∶（7～10）。
11、本发明，靶向分子包括多肽、糖，优选的，靶向分子为甘露糖。
12、优选的，本发明将peg-p(tmc-dtc)-pei和4man-peg-p(tmc-dtc) 按照比例混合，加入到含核酸药物的缓冲液中自组装、自交联即可得到共递送多核酸药物的聚合物囊泡。
13、本发明设计制备了由四个甘露糖簇修饰的共载sitnfα和siirf5聚合物囊泡（4man-ps-siit），研究了其在体外和ra小鼠体内的抗炎能力和联合靶向治疗。得到的4man-ps-siit粒径约为50 nm，sirna的装载稳定高效（载药量为9.0 wt.%），在模拟炎症的巨噬细胞中能同时有效沉默tnf-α和irf5基因，并将巨噬细胞诱导成m2型；其通过腹腔注射进入cia小鼠体内后能有效富集到病患关节病释放sirna。在zia和cia小鼠中，4man-ps-siit能通过sitnfα阻断tnf-α炎性通路降低ra部位tnf-α表达，通过siirf5抑制tlr-irf5通路来调控ra部位炎性巨噬细胞，使其诱导为m2型，比单载囊泡显示了更显著抗炎作用和软骨和骨保护作用。体外和体内实验结果支持共载囊泡中sitnfα对siirf5功能（复极化）的增强作用以及siirf5导致的m1m减少作用对sitnfα功能（下调炎性蛋白）的促进作用。这一共载sirna囊泡能把目标基因迥异的多种sirna递送到同一目标细胞中，再利用各自的作用机制从不同途径切断致病进程，有望对其他复杂的多种通路控制的自身免疫疾病的靶向治疗有所启发。
1.一种共递送多核酸药物的聚合物囊泡，包括聚合物及其装载的核酸药物，其特征在于，所述多核酸药物包括tnf-α小干扰rna和toll样受体小干扰rna；所述聚合物为亲水链段-p(酯-dtc)-阳离子片段，或者所述聚合物为亲水链段-p(酯-dtc)-阳离子片段、靶向分子-亲水链段-p(酯-dtc)的混合物。
2.根据权利要求1所述共递送多核酸药物的聚合物囊泡，其特征在于，多核酸药物为双核酸药物。
3.根据权利要求2所述共递送多核酸药物的聚合物囊泡，其特征在于，双核酸药物为tnf-α小干扰rna和toll样受体小干扰rna。
4.根据权利要求1所述共递送多核酸药物的聚合物囊泡，其特征在于，酯为常规药学上可接受的酯单体或者碳酸酯单体；阳离子片段包括精胺、聚乙烯亚胺；亲水链段为聚乙二醇链段；靶向分子包括多肽、糖。
5.根据权利要求1所述共递送多核酸药物的聚合物囊泡，其特征在于，疏水链段的分子量为亲水链段分子量的2～10倍；pdtc链段的分子量为疏水链段总分子量的5%～30%。
6.权利要求1所述共递送多核酸药物的聚合物囊泡在制备抗炎药物中的应用。
7.权利要求1所述共递送多核酸药物的聚合物囊泡在制备体内炎症和/或体外炎症治疗药物中的应用。
8.权利要求1所述共递送多核酸药物的聚合物囊泡在制备关节炎治疗药物中的应用。
9.权利要求1所述共递送多核酸药物的聚合物囊泡的制备方法，以聚合物、核酸药物为原料，组装得到共递送多核酸药物的聚合物囊泡。
10. tnf-α小干扰rna和toll样受体小干扰rna在制备治疗关节炎的药物中的应用。
