本发明涉及生物医药,特别涉及钙电流通路作为靶点在筛选用于防治血管钙化药物中的应用。
背景技术:
1、动脉粥样硬化是一种血管慢性炎症性疾病,是冠心病发生的重要病理基础之一。由动脉粥样硬化引发的心血管疾病死亡率仍居中国居民首位,是人类健康的头号杀手之一,动脉粥样硬化斑块若不稳定,其破裂形成的血栓可能导致心血管恶性事件(如心肌梗塞等)。影响斑块稳定性的因素包括坏死核心的大小、纤维帽的组成与厚度等,其中斑块处出现微钙化现象将严重降低斑块稳定性。
2、血管平滑肌胞内钙浓度增加可促进肌动蛋白-肌球蛋白跨桥形成,引起血管收缩。血管收缩调节主要与细胞膜上电压依赖性钙通道、细胞膜内受体偶联的钙释放等途径相关。
3、现有技术中,除了经典钙靶点与通路,如蛋白激酶c,l型钙通道以外,瞬时受体电位通道trpc3已被证明在高血压中表达增高,然而,尚不清楚trpc3对全细胞细胞膜钙电流影响,以及其与经典钙通路调控关系,因此发现trpc3与钙电流确切关系以及相关应用对心血管疾病防治和新药开发很重要。
4、因此,本申请提供了钙电流通路作为靶点在筛选用于防治血管钙化药物中的应用来满足需求。
技术实现思路
1、本发明要解决的技术问题是提供钙电流通路作为靶点在筛选用于防治血管钙化药物中的应用以解决现有的瞬时受体电位通道trpc3应用环境的问题。
2、为解决上述技术问题,本发明提供如下技术方案:
3、钙电流通路作为靶点在筛选用于防治血管钙化药物中的应用,其中,所述钙电流通路为瞬时受体电位通道trpc3,所述trpc3在制备预防或治疗动脉粥样硬化的药物中的应用;或,
4、所述瞬时受体电位通道trpc3在制备预防治疗冠脉搭桥术后桥血管再狭窄的药物中的应用;或,
5、所述瞬时受体电位通道trpc3在制备抑制血管内膜增生的药物中的应用;或,
6、所述瞬时受体电位通道trpc3在制备抑制血管平滑肌细胞增多的药物中的应用;
7、任意所述药物作用于所述瞬时受体电位通道通过激动剂gsk1702934a信号通路实现血管平滑肌细胞钙电流增加;
8、所述药物靶向作用于血管平滑肌细胞。
9、优选地,所述药物含有抑制剂pyr10,且包含电压依赖性钙通道的l型钙通道;
10、所述抑制剂pyr10作用于激动剂gsk1702934a并诱导l型钙通道的电流抑制;
11、所述抑制剂pyr10为瞬时受体电位通道trpc3选择性抑制剂。
12、优选地,所述瞬时受体电位通道trpc3活性通过使用膜片钳技术;或,
13、全细胞电流、放射性标记离子流;或,
14、电压敏感染料;或,
15、离子敏感染料的荧光,测量或检测ca流出的变化来进行测量或检测。
16、钙电流通路作为靶点在筛选用于防治血管钙化药物中应用的方法:
17、a.接触表达瞬时受体电位通道trpc3的细胞;
18、b.加入l型钙通道抑制剂nifedipine抑制ca内流测量gsk1702934a诱导的全细胞膜片钳钙电流。
19、优选地,其中细胞为荧光细胞,细胞为mdck、hek293、hek293t、bhk、cos、nih3t3、swiss3t3或cho细胞。
20、本发明与现有技术相比,至少具有如下有益效果:
21、本发明用大量可重复性的细胞电生理与药理学实验证明了trpc3在血管平滑肌细胞膜水平上与钙通道的密切关系,trpc3通道可诱导2.6倍的细胞钙电流增加,这对细胞外钙内流的作用明显不可忽视,由此也应为钙通道重要新靶点和新药开发的靶点。
22、该应用可用于trpc3表达研究,借以监测与trpc3分子表达相关的组织和疾病,如动脉粥样硬化等。同时也可以用于trpc3蛋白过表达的组织及疾病监测,亦或经过人源化改造后与药物偶联进行免疫靶向治疗。
23、该应用在使用激动剂开放trpc3通道后能够使更++2+多的一价阳离子na和k及二价阳离子ca进入细胞内,改善了全细胞膜片钳检测电流小的问题,增加了检测中钙流/膜电位信号强度,进而完善了trpc3小分子抑制剂药物筛选方法。
1.钙电流通路作为靶点在筛选用于防治血管钙化药物中的应用,其中,所述钙电流通路为瞬时受体电位通道trpc3,所述trpc3在制备预防或治疗动脉粥样硬化的药物中的应用;或,
2.根据权利要求1的应用,其特征在于,所述药物含有抑制剂pyr10,且包含电压依赖性钙通道的l型钙通道;
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述瞬时受体电位通道trpc3活性通过使用膜片钳技术;或,
4.根据权利要求任一所述应用的方法:
5.根据权利要求4所述应用的方法,其中细胞为荧光细胞,细胞为mdck、hek293、hek293t、bhk、cos、nih3t3、swiss3t3或cho细胞。