本发明涉及纳米抗体,具体涉及抗牛血清白蛋白的纳米抗体bsa-4-41及其应用。
背景技术:
1、骆驼科或软骨鱼类动物体内存在天然缺失轻链的重链抗体(heavy chainantibody,hcab),其可变区(variable domains of heavy chain of heavy chainantibody,vhh)即为单域重链抗体,因其尺寸小,也被称为纳米抗体。纳米抗体是目前已知分子量最小的抗原结合片段,其分子量仅为15kda,约为传统igg抗体的十分之一,此外纳米抗体还具有其它一些列有别于传统抗体的诸多优点,如稳定性高、水溶性强、体积小、耐有机溶剂、易于改造、可识别隐蔽表位等。
2、牛血清白蛋白(bovine serum albumin,bsa)是一种从牛血清中提取得到的球蛋白,是血清中最丰富的蛋白质成分,由583个氨基酸残基组成,分子量约为66.43kda,等电点pi为4.7。bsa在溶液中的稳定性和热稳定性较高,在生物学和生物医学等研究中有多种重要应用,如在做免疫分析时可作为封闭剂,其也可作为载体蛋白,用于小分子化合物的偶联,以制备获得全抗原,用于免疫动物或者构建免疫分析方法。此外,牛血清是当前细胞培养中培养液的重要组分,而bsa是牛血清中的主要成分,同时作为异源蛋白也是引起过敏反应的主要因素之一。
3、因此,检测并去除用牛血清培养的细胞溶液中的bsa,对于提高细胞生物制品的生物安全性具有重要作用;制备开发获得抗bsa的抗体对于bsa的定向固定、纯化以及检测等至关重要。
技术实现思路
1、本发明旨在提供抗bsa的纳米抗体bsa-4-41及其应用,改善现有多克隆抗体、单克隆抗体存在的制备流程复杂、成本高的缺点。
2、一方面,本发明提供一种抗bsa的纳米抗体bsa-4-41,所述纳米抗体包括如seq idno.1所示的氨基酸序列。
3、可选地,所述纳米抗体包括单体、二价抗体、多价抗体中至少一种。
4、第二方面,本发明提供编码纳米抗体bsa-4-41的基因,所述基因核苷酸序列如seqid no.9所示。
5、第三方面,本发明提供所述编码纳米抗体的基因在构建表达载体中的应用。
6、第四方面,本发明提供所述纳米抗体组成的药物偶联物,所述药物偶联物包括标记物、药物、细胞因子、纳米材料、功能蛋白中的至少一种。
7、第五方面,本发明提供所述纳米抗体bsa-4-41在药物组合物中的应用。
8、第六方面,本发明提供所述纳米抗体bsa-4-41在免疫检测中的应用。
9、第七方面,本发明提供所述纳米抗体bsa-4-41构建的重组蛋白。
10、本发明具备的有益效果包括:
11、(1)本发明提供的纳米抗体的制备方法流程简单、成本低;
12、(2)本发明提供的纳米抗体来源于四川阿帕克生物科技有限公司的噬菌体展示天然纳米抗体库(alpsdab-p),具有库容大、多样性强等优点;
13、(3)本发明提供的纳米抗体能够与bsa特异性结合,可以应用于bsa定向结合、免疫检测、富集纯化等领域;
14、(4)本发明提供的纳米抗体的氨基酸序列可以作为前体,通过随机或定点突变技术进行改造,能够获得性质(水溶性、产量、亲和力、特异性、稳定性等)更好的突变体。
1.一种抗牛血清白蛋白的纳米抗体bsa-4-41,其特征在于,所述纳米抗体包括如seqid no.1所示的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的纳米抗体,其特征在于,所述纳米抗体包括单体、二价抗体、多价抗体中至少一种。
3.编码如权利要求1所述的纳米抗体bsa-4-41的基因,其特征在于,所述基因核苷酸序列如seq id no.9所示。
4.如权利要求3所述的基因在构建表达载体中的应用。
5.如权利要求1所述纳米抗体组成的药物偶联物,其特征在于,所述药物偶联物包括标记物、药物、细胞因子、纳米材料、功能蛋白中的至少一种。
6.如权利要求1-2任一项所述的纳米抗体bsa-4-41在药物组合物中的应用。
7.如权利要求1-2任一项所述的纳米抗体bsa-4-41在免疫检测中的应用。
8.如权利要求1-2任一项所述的纳米抗体bsa-4-41构建的重组蛋白。