一、本发明涉及医药领域,特别是一种从麻黄根中提取的芳基萘类酚酸化合物及其制备方法和应用。
背景技术:
0、二、背景技术
1、抑郁症是以情绪功能障碍、思维迟缓、意志力减退、认知功能损害和社会功能障碍为主要临床特征的精神疾病。抑郁症现已成为自杀的首要因素,严重影响人类生活质量。目前临床研究皮质酮水平与抑郁症严重程度有关,抑郁症患者血浆皮质酮水平升高,抗糖皮质激素治疗对重症抑郁症患者效果明显,治疗后使血浆皮质酮水平下降。血浆及脑脊液中的皮质酮水平的持续升高对抑郁症的发生可能起到重要的作用。因此采用皮质酮诱导pc-12细胞损伤模型进行化合物抗抑郁活性筛选,寻找潜在的抗抑郁活性的天然产物是药学科研工作者迫切解决的技术问题。
2、麻黄根别名苦椿菜,为麻黄科(ephedraceae dumortier)麻黄属(ephedra tournex linn.)植物草麻黄(ephedra sinica stapf.)或中麻黄(ephedra intermedia schrenket c.a.mey.)的干燥根和根茎,主要分布在山西、陕西、四川等地,为传统中药,收载于《中国药典》。始见于《神农本草经》,具有治疗中风,伤寒头痛,温疟,发表出汗,去邪热气,止咳逆上气,除寒热,破积聚的功效。相关研究表明,麻黄根的化学成分主要为生物碱类、黄酮类、酚酸类和多糖类等。但是目前对麻黄根和茎的进一步研究较少,为了充分利用我国丰富的麻黄资源,进一步开发麻黄新的药用价值,寻找其新的活性成分,本发明选取麻黄根作为研究对象,但至今未见有从麻黄根中制备具有潜在的抗抑郁活性的芳基萘类酚酸化合物1(麻黄根酚酸b)、化合物2(麻黄根酚酸c)和化合物3(麻黄根酚酸d),也未有如何从麻黄根中提取抗抑郁活性的麻黄根酚酸类成分的公开报导。
技术实现思路
0、三、
技术实现要素:
1、针对上述情况,为解决现有技术之缺陷,本发明之目的就是提供一种从麻黄根中提取的芳基萘类酚酸化合物及其制备方法和应用,可有效开发麻黄新的药用价值,实现在制备抗抑郁活性药物中的应用问题。
2、本发明解决的技术方案是,一种从麻黄根中提取的芳基萘类酚酸化合物,包括化合物1、化合物2和化合物3,其分子式分别是c14h12o5、c13h11no3和c13h10o4,结构式分别为:
3、
4、其制备方法,包括以下步骤:
5、1)取草麻黄的干燥根及根茎,采用水煎煮法用15倍量水提取2次,每次2h,经水煎煮提取后的草麻黄根再用95%乙醇使用10l的加热回流装置提取2次,每次1kg麻黄根加4l乙醇,加热回流2h,提取液减压浓缩得总浸膏,用水分散溶解,依次用石油醚(5次×7l)、二氯甲烷(10次×10l)、乙酸乙酯(12次×10l)、正丁醇(6次×6l)萃取,回收溶剂后得到石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位;
6、2)将步骤1)得到的二氯甲烷部位经硅胶柱色谱(100~200目)分离,拌样硅胶和空白硅胶比例为1:7-8,使用石油醚-乙酸乙酯按体积比10:1、5:1、3:1、1:1以及二氯甲烷-甲醇按体积比20:1进行梯度洗脱,得到相应的15个流分m1~m15;
7、3)将步骤2)得到的流分m12经硅胶柱色谱(200~300目)分离,以石油醚-乙酸乙酯按体积比30:1、20:1、10:1、5:1以及二氯甲烷-甲醇按体积比30:1、20:1、10:1进行梯度洗脱,得到相应的6个流分m12-1~m12-6;
8、4)将步骤3)得到的流分m12-5减压浓缩,mci gel chp 20p柱色谱,依次用70%、80%、90%、100%甲醇洗脱,每个洗脱部位用量为柱体积的10倍,流速3ml/min,采用茴香醛-浓硫酸喷雾检识,每100ml检识一次,合并相同流份,得到8个组份m12-5-1~m12-5-8;
9、5)将步骤4)得到的流分m12-5-4用半制备hplc分离,上规格型号为:250×10mm,粒径5μm,孔径12nm的5c18-ms-ⅱ色谱柱,流动相为甲醇:水=47:53,流速3ml/min,收集保留时间tr=27~29min的流份,浓缩干燥,得到化合物麻黄根酚酸b;
10、6)将步骤2)得到的流分m14经硅胶柱色谱(200~300目)分离,以石油醚-乙酸乙酯按体积比50:1、30:1、15:1、5:1、3:1进行梯度洗脱,得到相应的5个流分m14-1~m14-5;
11、7)将步骤6)得到的流分m14-2减压浓缩,mci gel chp 20p柱色谱,依次用70%、80%、90%、100%甲醇洗脱,每个洗脱部位用量为柱体积的10倍,流速3ml/min,采用茴香醛-浓硫酸喷雾检识,每100ml检识一次,合并相同流份,得到5个组份m14-2-1~m14-2-5;
12、8)将步骤7)得到的流分m14-2-4用半制备hplc分离,上规格型号为:250×10mm,粒径5μm,孔径12nm的5c18-ms-ⅱ色谱柱,流动相为甲醇:水=42:58,流速3ml/min,收集保留时间tr=52~54min的流份,浓缩干燥,得到化合物麻黄根酚酸c;
13、9)将步骤2)得到的流分m11减压浓缩,mci gel chp 20p柱色谱,依次用50%、70%、80%、90%、100%甲醇洗脱,每个洗脱部位用量为柱体积的10倍,流速3ml/min,采用茴香醛-浓硫酸喷雾检识,每100ml检识一次,合并相同流份,得到9个组份m11-1~m11-8;
14、10)将步骤9)得到的流分m11-8用半制备hplc分离,上规格型号为:250×10mm,粒径5μm,孔径12nm的5c18-ms-ⅱ色谱柱,流动相为甲醇:水=60:40,流速3ml/min,收集保留时间tr=7~9min的流份,浓缩干燥,得到化合物麻黄根酚酸d。
15、本发明所述的酚酸类化合物麻黄根酚酸b、麻黄根酚酸c、麻黄根酚酸d在制备抗抑郁药物中的应用。
16、本发明经鉴定,是三个从麻黄根中提取的芳基萘类酚酸化合物,其制备方法易操作,导向性强,产品纯度高,该化合物可有效用于制备抗抑郁活性的药物,开拓了麻黄根的药用价值,经济和社会效益巨大。
1.一种从麻黄根中提取的芳基萘类酚酸化合物,其特征在于,包括化合物1、化合物2和化合物3,其分子式分别是c14h12o5、c13h11no3和c13h10o4,结构式分别为:
2.权利要求1所述的从麻黄根中提取的芳基萘类酚酸化合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
3.根据权利要求2所述的从麻黄根中提取的芳基萘类酚酸化合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
4.权利要求1所述的从麻黄根中提取的芳基萘类酚酸化合物在制备抗抑郁药物中的应用。
5.权利要求2或3所述的提取方法提取的芳基萘类酚酸化合物在制备抗抑郁药物中的应用。